| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 第一部分 Rubisco活化酶结构特征及其调节机制 | 第12-16页 |
| 1.体内外机制的矛盾与酶的发现 | 第12-13页 |
| 2.Rubisco活化酶的分子特性 | 第13-14页 |
| 3.Rubisco活化酶对Rubisco的活化作用 | 第14-15页 |
| 4.环境因素对Rubisco活化酶调节Rubisco的影响 | 第15-16页 |
| 第二部分 启动子研究概述 | 第16-28页 |
| 1.启动子简述 | 第16-21页 |
| ·启动子的一般特征 | 第16-17页 |
| ·反式作用因子 | 第17页 |
| ·植物启动子的分类 | 第17-21页 |
| ·组成型启动子 | 第17-18页 |
| ·CaMV35S启动子 | 第18页 |
| ·Nos和Ocs启动子 | 第18页 |
| ·双向启动子和可变启动子 | 第18-19页 |
| ·组织特异性启动子 | 第19页 |
| ·诱导表达启动子 | 第19-21页 |
| ·伤诱导表达启动子 | 第19页 |
| ·病原诱导表达启动子 | 第19页 |
| ·激素诱导表达启动子 | 第19-21页 |
| ·脱落酸(ABA)诱导启动子 | 第19-20页 |
| ·生长素诱导启动子 | 第20页 |
| ·乙烯诱导启动子 | 第20页 |
| ·赤霉素诱导启动子 | 第20-21页 |
| 2.组织特异性启动子的研究 | 第21-26页 |
| ·在营养器官中表达的组织特异性启动子 | 第21-23页 |
| ·叶片特异表达启动子(green tissue specific promoter) | 第21页 |
| ·韧皮部特异表达启动子(phloeom specific promoter) | 第21-22页 |
| ·维管束特异表达启动子(vascular bundle specific promoter) | 第22页 |
| ·块茎专一表达启动子(tuber specific promoter) | 第22-23页 |
| ·根特异表达启动子(root tissue specific promoter) | 第23页 |
| ·在生殖器官中表达的组织特异性启动子 | 第23-26页 |
| ·花粉组织特异性启动子(pollen specific promoter) | 第23-24页 |
| ·花器官特异表达启动子(flower specific promoter) | 第24页 |
| ·果实特异表达启动子(fruit specific promoter) | 第24-25页 |
| ·种子特异表达启动子(seed specific promoter) | 第25-26页 |
| 3.本研究的目的和意义及技术路线 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-43页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-43页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌及农杆菌的转化 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌的热击转化 | 第30页 |
| ·重组质粒DNA冻融法转入农杆菌LBA4404 | 第30页 |
| ·电击转化 | 第30-31页 |
| ·目的片段的回收 | 第31页 |
| ·马铃薯基因组DNA的提取方法 | 第31-32页 |
| ·马铃薯总RNA提取方法 | 第32页 |
| ·rca基因全长的获得 | 第32-36页 |
| ·第一链的cDNA合成 | 第32页 |
| ·rca基因中间目的片段的获得 | 第32-33页 |
| ·rca基因3’末端的获得 | 第33-34页 |
| ·rca基因5’末端的获得 | 第34-36页 |
| ·第一链的cDNA合成 | 第34-35页 |
| ·Hybrid RNA的分解 | 第35页 |
| ·连接反应(单链cDNA的环化或形成首尾连接物) | 第35页 |
| ·PCR反应 | 第35-36页 |
| ·全长的获得 | 第36页 |
| ·rca基因5’上游序列的获得 | 第36-38页 |
| ·DNA的限制酶酶切反应 | 第36-37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·PCR扩增rca基因5’末端上游部分序列 | 第38页 |
| ·构建植物表达载体(pRCAP) | 第38-40页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第40页 |
| ·光照诱导rca基因表达试验 | 第40页 |
| ·Northern Blot | 第40-42页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第42-43页 |
| 第三章 结果与分析 | 第43-56页 |
| ·rca基因全长序列的获得 | 第43-50页 |
| ·马铃薯总RNA的提取 | 第43页 |
| ·设计简并引物 | 第43-44页 |
| ·rca基因中间目的片段的获得 | 第44-45页 |
| ·rca基因3’末端的获得 | 第45-46页 |
| ·rca基因5’末端的获得 | 第46-47页 |
| ·rca基因全长序列的获得 | 第47-50页 |
| ·rca基因组织特异性和光诱导性的Northern Blot检测 | 第50页 |
| ·rca基因5’上游序列的获得 | 第50-51页 |
| ·pRCAP植物表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第52页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第52-53页 |
| ·GUS组织化学染色检测rca启动子的启动功能 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 结论及创新点 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
