中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
缩写词简表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
技术路线 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-24页 |
1 材料 | 第16-17页 |
·细胞系 | 第16页 |
·组织 | 第16页 |
·试剂 | 第16-17页 |
·软件 | 第17页 |
·仪器 | 第17页 |
2 方法 | 第17-24页 |
·细胞培养 | 第17-18页 |
·蛋白质的抽提 | 第18-19页 |
·细胞总蛋白的抽提 | 第18页 |
·细胞分泌蛋白质的抽提 | 第18-19页 |
·细胞培养上清的预处理 | 第18页 |
·细胞培养上清的超滤离心 | 第18-19页 |
·细胞分泌蛋白质的裂解 | 第19页 |
·蛋白浓度测定 | 第19-20页 |
·双向凝胶电泳 | 第20页 |
·考染显色 | 第20页 |
·凝胶图像分析 | 第20-21页 |
·质谱样品制备 | 第21页 |
·质谱分析 | 第21-22页 |
·数据库查询 | 第22页 |
·Western blot分析 | 第22-23页 |
·免疫组化 | 第23-24页 |
结果 | 第24-41页 |
1 蛋白浓度测定 | 第24-25页 |
2 人NPC细胞系5-8F和6-10B的总蛋白和分泌蛋白质双向凝胶电泳图谱的建立 | 第25-28页 |
·细胞总蛋白的双向凝胶电泳图谱及图像差异分析 | 第25-27页 |
·细胞分泌蛋白质的双向凝胶电泳图谱及图像差异分析 | 第27-28页 |
3 差异蛋白质点的质谱鉴定 | 第28-34页 |
·细胞总蛋白的差异蛋白质点的质谱鉴定 | 第28-32页 |
·分泌蛋白质的差异蛋白质点的质谱鉴定 | 第32-34页 |
4 蛋白质的翻译后修饰 | 第34-37页 |
5 差异表达的蛋白质的功能分类及亚细胞定位 | 第37-39页 |
·细胞总蛋白差异表达的蛋白质的功能分类及亚细胞定位 | 第37-38页 |
·分泌蛋白质组差异表达的蛋白质的功能分类及亚细胞定位 | 第38-39页 |
6 差异蛋白质表达水平的验证 | 第39-41页 |
·Western Blot检测差异蛋白质在5-8F和6-10B中的表达水平 | 第39-40页 |
·免疫组织化学方法检测nm23-H1的表达 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-48页 |
1 实验方法 | 第41-43页 |
2 人NPC细胞5-8F和6-10B的总蛋白和分泌蛋白质双向凝胶电泳图谱的建立 | 第43页 |
3 5-8F和6-10B细胞的差异表达蛋白质 | 第43-44页 |
4 5-8F和6-10B细胞差异蛋白质的表达水平验证 | 第44-45页 |
5 差异蛋白质与NPC转移的相关性分析 | 第45-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
综述 | 第52-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读学位期间主要的研究成果及奖励 | 第65页 |