中国肝癌病人中四种p53突变体细胞功能的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·P53 简介 | 第10-12页 |
| ·一级结构 | 第10-11页 |
| ·p53 高级结构 | 第11-12页 |
| ·P53 功能研究进展 | 第12-16页 |
| ·p53 的上游信号网络 | 第12页 |
| ·p53 的下游信号网络 | 第12-16页 |
| ·P53 基因突变与肿瘤发生 | 第16-19页 |
| ·p53 突变的特点 | 第17-19页 |
| ·p53 突变对其功能的影响 | 第19页 |
| ·基于p53 的基因治疗 | 第19页 |
| ·P53 突变与肝癌的研究进展 | 第19-21页 |
| ·肝癌中p53 突变的特点 | 第19-20页 |
| ·肝癌中影响p53 突变的因素 | 第20-21页 |
| ·本研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-34页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·有关分子生物学实验材料及试剂 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·试剂盒 | 第25页 |
| ·试剂配方 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·国际生物学信息途径和计算机分析软件 | 第27页 |
| ·生物信息途径 | 第27页 |
| ·生物电泳凝胶成像及扫描分析软件 | 第27页 |
| ·核酸分析软件 | 第27页 |
| ·统计分析软件 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-31页 |
| ·肝癌组织总DNA 的提取：（按产品说明书进行） | 第27-28页 |
| ·PCR 反应体系及条件 | 第28页 |
| ·胶回收 | 第28页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第28-29页 |
| ·Western blotting | 第29页 |
| ·pCMV-p53 的构建 | 第29-30页 |
| ·质粒抽提（按产品说明书进行） | 第30-31页 |
| ·细胞培养 | 第31-32页 |
| ·细胞复苏 | 第31页 |
| ·细胞的传代培养 | 第31页 |
| ·细胞冻存 | 第31-32页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第32页 |
| ·双荧光素酶报告反应系统检测荧光素酶活性 | 第32-33页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第33-34页 |
| 第三章 结果 | 第34-43页 |
| ·肝癌组织标本基因组DNA 的获取 | 第34页 |
| ·P53 基因各外显子的 PCR 扩增 | 第34-35页 |
| ·P53 基因突变的测序筛查结果 | 第35-37页 |
| ·四种P53 突变体的真核表达载体构建 | 第37-39页 |
| ·WESTERN BLOT 检测 | 第39页 |
| ·四种突变体对转录活性的影响 | 第39-41页 |
| ·四种突变体对细胞凋亡的影响 | 第41-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-46页 |
| ·中国肝癌病人中P53 突变的筛查 | 第43页 |
| ·四种突变体对细胞功能的影响 | 第43-46页 |
| ·四种突变体对转录活性的影响 | 第43-44页 |
| ·四种突变体对细胞凋亡的影响 | 第44-46页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第46-49页 |
| ·结论 | 第46页 |
| ·创新点 | 第46页 |
| ·未来工作展望 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
