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金银花内生真菌的分离鉴定和分子系统学研究

提要第1-4页
Abstract第4-9页
引言第9-10页
第一部分 文献综述第10-22页
 1 药用植物内生真菌的概念及其研究概况第10-12页
   ·药用植物内生真菌的多样性第10页
   ·药用植物内生真菌与宿主的关系第10-11页
   ·药用植物内生真菌次生代谢产物的多样性第11-12页
 2 金银花内生真菌研究进展第12页
 3 药用真菌的研究概况第12-13页
 4 茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis第13页
 5 Phellinus 属与Phylloporia 真菌的分类历史及系统发育研究进展第13-14页
 6 真菌分子生物学鉴定方法简介第14-19页
   ·DNA 碱基组成分析第14-15页
   ·DNA 分子杂交技术第15页
   ·限制性片段长度多态性分析第15-16页
   ·随机扩增多态性DNA 标记第16页
   ·微卫星DNA 指纹图谱技术第16-17页
   ·核酸序列分析第17-19页
 7 系统发育树主要的构建方法第19-22页
   ·距离法第19页
   ·最大简约法第19-20页
   ·最大似然法第20-22页
第二部分 茶藨子叶状层菌生药学研究第22-35页
 1 种名鉴定第22页
 2 形态结构第22-23页
 3 一般生长习性第23页
 4 鉴别第23-25页
   ·性状鉴别第23页
   ·显微鉴别第23-24页
   ·一般理化鉴别第24页
   ·薄层色谱鉴别第24-25页
 5 茶藨子叶状层菌在植株上的寄生规律第25-35页
   ·茶藨子叶状层菌寄生与植株生长年限的关系第25-27页
   ·茶藨子叶状层菌寄生与植株品种之间的关系第27-29页
   ·叶状层菌寄生与植株叶片生长情况的关系第29-31页
   ·叶状层菌寄生与植株枝条生长情况的关系第31-33页
   ·叶状层菌寄生植株与其花蕾重量(20 个花重克数)的相关性第33-35页
第三部分 金银花内生真菌的分离纯化及其初步鉴定第35-40页
 1 材料与方法第35-36页
   ·材料第35页
   ·仪器和设备第35页
   ·试剂第35页
   ·培养基的制备第35-36页
 2 分离纯化第36-37页
   ·样品表面消毒及预处理第36页
   ·菌种的分离与纯化第36-37页
 3 菌种的形态学鉴定第37-38页
   ·菌落的形态观察第37-38页
 4 菌种的保存第38页
 5 结果分析第38-40页
第四部分 基于ITS 序列分析的分子系统发育研究第40-53页
 1 实验材料第40-42页
   ·供试菌株第40页
   ·培养基及配方第40-41页
   ·主要实验仪器第41页
   ·试剂准备第41-42页
 2 实验方法第42-45页
   ·菌种的保藏第42页
   ·菌体的培养收集以及预处理第42页
   ·菌体总DNA 的提取第42-43页
   ·PCR 反应体系、步骤及扩增的引物第43-44页
   ·PCR 扩增产物的回收与纯化第44-45页
   ·目的片段的测序第45页
 3 结果与分析第45-53页
   ·菌种凝胶电泳检查第45-46页
   ·实验测得的各菌株ITS 序列碱基第46-48页
   ·利用GenBank(Blast)对比法分析金银花内生真菌的种属第48-49页
   ·金银花内生真菌的系统发育分析第49-51页
   ·结果与讨论第51-53页
全文结论第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-61页
攻读学位期间发表的论文第61-65页
详细摘要第65-68页

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