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新锌指蛋白HZF1的功能研究

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
前言第13-16页
材料与方法第16-50页
 一.材料第16-27页
  1.工具酶及分子量Marker第16页
  2.主要生化试剂第16-17页
  3.其它材料第17页
  4.菌株第17页
  5.细胞系第17-18页
  6.质粒第18-23页
  7.培养基、血清及添加剂第23页
  8.同位素标记化合物第23-24页
  9.引物第24-25页
  10.试剂盒第25页
  11.软件第25页
  12.主要仪器及设备第25-27页
 二.实验方法第27-50页
  1.细胞培养及诱导第27-28页
  2.细胞总RNA的提取第28-29页
  3.Northern杂交第29-32页
  4.真核表达质粒的构建第32-35页
  5.质粒的提取第35-37页
  6.RT-PCR第37-40页
  7.红系分化的检测第40页
  8.巨核系分化的检测第40-41页
  9.重组蛋白的表达纯化及抗体的制备第41-44页
  10.Western blot第44-46页
  11.双萤光检测蛋白的转录激活作用第46页
  12.蛋白双向电泳第46-50页
结果第50-83页
 一.HZF1基因结构及表达分析第50-61页
  1.三个HZF1转录物的发现第50-55页
  2.生物信息学分析第55-56页
  3.K562细胞的诱导第56-58页
  4.HZF1的表达谱第58-61页
  5.HZF1的亚细胞定位第61页
 二.HZF1多克隆抗体的制备第61-65页
  1.融合蛋白表达载体的构建和鉴定第61-62页
  2.HZF1融合蛋白的诱导表达第62-63页
  3.HZF1融合蛋白的表达纯化第63-64页
  4.兔抗HZF1血清的制备第64-65页
 三.HZF1基因的功能第65-78页
  1.反义抑制HZF1影响K562细胞的分化第65-71页
  2.RNA干扰抑制HZF1表达影响K562细胞的分化第71-78页
 四.HZF1基因功能的分子机制第78-83页
  1.双萤光检测分析HZF1蛋白的激活结构域第78-80页
  2.HZF1与ERK信号通路的关系第80-82页
  3.RNA干扰抑制HZF1表达的K562细胞中的蛋白表达变化第82-83页
讨论第83-90页
 一.HZF1基因结构及表达分析第84-85页
 二.HZF1基因的功能第85-88页
 三.HZF1行使功能的分子机制第88-90页
展望第90-91页
参考文献第91-96页
小结第96-99页
文献综述1第99-122页
文献综述2第122-129页
研究生期间发表论文和专利申请第129-130页
致谢第130页

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