中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
前言 | 第13-16页 |
材料与方法 | 第16-50页 |
一.材料 | 第16-27页 |
1.工具酶及分子量Marker | 第16页 |
2.主要生化试剂 | 第16-17页 |
3.其它材料 | 第17页 |
4.菌株 | 第17页 |
5.细胞系 | 第17-18页 |
6.质粒 | 第18-23页 |
7.培养基、血清及添加剂 | 第23页 |
8.同位素标记化合物 | 第23-24页 |
9.引物 | 第24-25页 |
10.试剂盒 | 第25页 |
11.软件 | 第25页 |
12.主要仪器及设备 | 第25-27页 |
二.实验方法 | 第27-50页 |
1.细胞培养及诱导 | 第27-28页 |
2.细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
3.Northern杂交 | 第29-32页 |
4.真核表达质粒的构建 | 第32-35页 |
5.质粒的提取 | 第35-37页 |
6.RT-PCR | 第37-40页 |
7.红系分化的检测 | 第40页 |
8.巨核系分化的检测 | 第40-41页 |
9.重组蛋白的表达纯化及抗体的制备 | 第41-44页 |
10.Western blot | 第44-46页 |
11.双萤光检测蛋白的转录激活作用 | 第46页 |
12.蛋白双向电泳 | 第46-50页 |
结果 | 第50-83页 |
一.HZF1基因结构及表达分析 | 第50-61页 |
1.三个HZF1转录物的发现 | 第50-55页 |
2.生物信息学分析 | 第55-56页 |
3.K562细胞的诱导 | 第56-58页 |
4.HZF1的表达谱 | 第58-61页 |
5.HZF1的亚细胞定位 | 第61页 |
二.HZF1多克隆抗体的制备 | 第61-65页 |
1.融合蛋白表达载体的构建和鉴定 | 第61-62页 |
2.HZF1融合蛋白的诱导表达 | 第62-63页 |
3.HZF1融合蛋白的表达纯化 | 第63-64页 |
4.兔抗HZF1血清的制备 | 第64-65页 |
三.HZF1基因的功能 | 第65-78页 |
1.反义抑制HZF1影响K562细胞的分化 | 第65-71页 |
2.RNA干扰抑制HZF1表达影响K562细胞的分化 | 第71-78页 |
四.HZF1基因功能的分子机制 | 第78-83页 |
1.双萤光检测分析HZF1蛋白的激活结构域 | 第78-80页 |
2.HZF1与ERK信号通路的关系 | 第80-82页 |
3.RNA干扰抑制HZF1表达的K562细胞中的蛋白表达变化 | 第82-83页 |
讨论 | 第83-90页 |
一.HZF1基因结构及表达分析 | 第84-85页 |
二.HZF1基因的功能 | 第85-88页 |
三.HZF1行使功能的分子机制 | 第88-90页 |
展望 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-96页 |
小结 | 第96-99页 |
文献综述1 | 第99-122页 |
文献综述2 | 第122-129页 |
研究生期间发表论文和专利申请 | 第129-130页 |
致谢 | 第130页 |