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应用RNAi技术干扰线虫ctl-2基因表达及早衰模型的建立

第一章 前言第1-23页
 1. CTL-2 的生物学功能与衰老的自由基学说研究进展第8-11页
   ·CTL-2 的生物学功能第8-9页
   ·衰老的自由基学说第9-11页
 2. 模型生物秀丽线虫第11-14页
   ·线虫的解剖学结构第12页
   ·线虫的发育特征第12-14页
 3. RNA 干扰的研究进展第14-21页
   ·RNA 干扰研究的发展历史第14-16页
   ·RNA 干扰机制第16-18页
   ·RNA 干扰的应用第18-20页
   ·线虫dsRNA 的导入第20-21页
 4. 选题的设想及意义第21-23页
   ·研究的目标第21页
   ·选题意义第21-23页
第二章 ctl-2 基因的克隆及dsRNA 的表达第23-38页
 1 实验材料、试剂和仪器第23-26页
   ·实验材料第23页
   ·主要试剂第23-24页
   ·主要仪器第24页
   ·培养基和培养条件第24-25页
   ·主要试剂及Buffer 的配制第25-26页
 2. 实验方法第26-34页
   ·基本分子生物学实验方法第27-28页
   ·实验设计第28页
   ·提取C.elegans 总RNA第28-29页
   ·目的片段的反转录和扩增第29-30页
   ·克隆载体的构建和测定第30-31页
   ·表达载体的构建第31-33页
   ·ctl-2 基因dsRNA 的表达第33-34页
 3. 结果与讨论第34-37页
   ·目的片段的扩增第34页
   ·克隆载体的构建第34-36页
   ·表达载体的构建第36-37页
   ·ctl-2 基因dsRNA 的表达第37页
 4. 小结第37-38页
第三章 RNA 干扰效果的检测及线虫亚型的变化第38-53页
 1. 实验材料、试剂和仪器第38页
   ·实验材料第38页
   ·主要试剂第38页
   ·主要仪器第38页
 2. 实验方法第38-43页
   ·半定量RT-PCR 与real-time RT-PCR第38-42页
   ·RNAi 线虫ctl-2 基因mRNA 表达量的检测第42页
   ·CTL-2 对线虫生命周期(Life-span)的影响第42-43页
   ·CTL-2 对线虫产卵数目(Egg-laying)的影响第43页
 3. 结果与讨论第43-52页
   ·IPTG 浓度对 ctl-2 基因 mRNA 表达量的影响第43-46页
   ·培养温度对 ctl-2 基因 mRNA 表达量的影响第46-48页
   ·RNAi 线虫生命周期的观察第48-50页
   ·RNAi 线虫产卵数目的观察第50-52页
 4. 小结第52-53页
结论第53-55页
参考文献第55-60页
中文摘要第60-63页
英文摘要第63-65页
英文缩写表第65-66页
致谢第66页

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