第一章 前言 | 第1-23页 |
1. CTL-2 的生物学功能与衰老的自由基学说研究进展 | 第8-11页 |
·CTL-2 的生物学功能 | 第8-9页 |
·衰老的自由基学说 | 第9-11页 |
2. 模型生物秀丽线虫 | 第11-14页 |
·线虫的解剖学结构 | 第12页 |
·线虫的发育特征 | 第12-14页 |
3. RNA 干扰的研究进展 | 第14-21页 |
·RNA 干扰研究的发展历史 | 第14-16页 |
·RNA 干扰机制 | 第16-18页 |
·RNA 干扰的应用 | 第18-20页 |
·线虫dsRNA 的导入 | 第20-21页 |
4. 选题的设想及意义 | 第21-23页 |
·研究的目标 | 第21页 |
·选题意义 | 第21-23页 |
第二章 ctl-2 基因的克隆及dsRNA 的表达 | 第23-38页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第23-26页 |
·实验材料 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·培养基和培养条件 | 第24-25页 |
·主要试剂及Buffer 的配制 | 第25-26页 |
2. 实验方法 | 第26-34页 |
·基本分子生物学实验方法 | 第27-28页 |
·实验设计 | 第28页 |
·提取C.elegans 总RNA | 第28-29页 |
·目的片段的反转录和扩增 | 第29-30页 |
·克隆载体的构建和测定 | 第30-31页 |
·表达载体的构建 | 第31-33页 |
·ctl-2 基因dsRNA 的表达 | 第33-34页 |
3. 结果与讨论 | 第34-37页 |
·目的片段的扩增 | 第34页 |
·克隆载体的构建 | 第34-36页 |
·表达载体的构建 | 第36-37页 |
·ctl-2 基因dsRNA 的表达 | 第37页 |
4. 小结 | 第37-38页 |
第三章 RNA 干扰效果的检测及线虫亚型的变化 | 第38-53页 |
1. 实验材料、试剂和仪器 | 第38页 |
·实验材料 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
2. 实验方法 | 第38-43页 |
·半定量RT-PCR 与real-time RT-PCR | 第38-42页 |
·RNAi 线虫ctl-2 基因mRNA 表达量的检测 | 第42页 |
·CTL-2 对线虫生命周期(Life-span)的影响 | 第42-43页 |
·CTL-2 对线虫产卵数目(Egg-laying)的影响 | 第43页 |
3. 结果与讨论 | 第43-52页 |
·IPTG 浓度对 ctl-2 基因 mRNA 表达量的影响 | 第43-46页 |
·培养温度对 ctl-2 基因 mRNA 表达量的影响 | 第46-48页 |
·RNAi 线虫生命周期的观察 | 第48-50页 |
·RNAi 线虫产卵数目的观察 | 第50-52页 |
4. 小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
中文摘要 | 第60-63页 |
英文摘要 | 第63-65页 |
英文缩写表 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |