中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-25页 |
1 植物功能基因组学的研究进展 | 第10-14页 |
·概述 | 第10页 |
·功能基因研究 | 第10-14页 |
·基于DNA 序列的基因功能分析 | 第11页 |
·应用 DNA 芯片技术筛选相关基因 | 第11页 |
·基于诱导产生突变体的基因功能分析 | 第11-14页 |
·自发突变 | 第12页 |
·人工诱变 | 第12-13页 |
·插入突变 | 第13-14页 |
2 T-DNA 标签技术 | 第14-18页 |
·T-DNA | 第14页 |
·基本原理 | 第14-15页 |
·T-DNA 的插入特点 | 第15-16页 |
·T-DNA 标签对宿主基因组稳定性的影响 | 第15-16页 |
·T-DNA 插入的偏好性 | 第16页 |
·对宿主基因表达区域的偏好性 | 第16页 |
·对T-DNA 插入的序列偏好性 | 第16页 |
·T-DNA 整合是否需要基因组中的同源序列 | 第16页 |
·T-DNA 整合的完整性 | 第16页 |
·T-DNA 标签技术在拟南芥功能基因组学研究中的应用 | 第16-18页 |
·T-DNA 标签技术的优缺点 | 第18页 |
3 T-DNA 标签技术在水稻基因组学研究中的应用 | 第18-23页 |
·水稻功能基因组学的研究 | 第18-20页 |
·水稻是单子叶植物功能基因组学研究的模式作物 | 第18-19页 |
·水稻突变体库的构建 | 第19-20页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第20-22页 |
·发展 | 第20-21页 |
·农杆菌转化植物的优缺点 | 第21-22页 |
·T-DNA 标签技术在水稻中的应用 | 第22-23页 |
4 T-DNA 插入位点侧翼序列的扩增方法 | 第23-25页 |
·质粒拯救法 | 第23页 |
·Tail-PCR 分离侧翼序列 | 第23-25页 |
第二部分 水稻T-DNA 插入突变体库的筛选 | 第25-49页 |
1 材料与方法 | 第25-31页 |
·材料 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-31页 |
·材料种植 | 第25-26页 |
·突变体筛选 | 第26-29页 |
·突变体的表型筛选 | 第26-27页 |
·基于T-DNA 插入序列的特异PCR 检测 | 第27-28页 |
·T1 代标签系的共分离分析 | 第28页 |
·T-DNA 插入突变体的T2 代验证 | 第28-29页 |
·TAIL-PCR 分离T-DNA 标签系的侧翼序列 | 第29-31页 |
·引物 | 第29-30页 |
·反应体系 | 第30页 |
·扩增条件 | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-42页 |
·突变表型的鉴定筛选 | 第31-36页 |
·标签系突变表型的分离类型 | 第31页 |
·突变表型的类型 | 第31-33页 |
·同一突变性状在不同标签系中的变异程度不同 | 第33-34页 |
·不同突变标签系中突变性状 | 第34页 |
·各类突变性状在品种与批次间的发生频率变化 | 第34-36页 |
·突变体的遗传分析 | 第36-37页 |
·T1 代标签系的共分离分析 | 第36页 |
·T-DNA 插入突变体的T2 代验证 | 第36-37页 |
·几类突变性状的研究实例 | 第37-42页 |
·单拷贝 T-DNA 插入突变——颖壳退化突变体(974) | 第37-39页 |
·突变体的获得 | 第37-38页 |
·侧翼序列的获得与共分离分析 | 第38-39页 |
·多拷贝 T-DNA 插入突变——无颖花突变体(1302) | 第39-42页 |
·单拷贝 T-DNA 插入突变——多重颖壳突变体(1707) | 第42页 |
3 讨论 | 第42-49页 |
·突变体库的效率 | 第42-43页 |
·提高 T-DNA 插入突变的筛选效率 | 第43-44页 |
·尽可能排除非可遗传变异的干扰 | 第43页 |
·在可遗传变异中区分组培变异和T-DNA 插入突变 | 第43-44页 |
·突变体库的筛选程序 | 第44-45页 |
·非串联多拷贝 T-DNA 插入突变体的筛选 | 第45-46页 |
·数量性状的筛选 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |