摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略语说明 | 第14-16页 |
第一章 绪论 | 第16-33页 |
·细胞凋亡与肿瘤 | 第16-18页 |
·细胞凋亡的特征 | 第16-17页 |
·细胞凋亡异常与肿瘤发生 | 第17-18页 |
·DNA复制过程和一些复制蛋白的抑制作用 | 第18-21页 |
·细胞周期调控因子与癌变机制 | 第21-23页 |
·倍半萜内酯类化合物的研究进展 | 第23-24页 |
·倍半萜内酯类化合物的结构类型 | 第23页 |
·倍半萜内酯类化合物的药理活性 | 第23-24页 |
·倍半萜类化合物生物合成途径与相关的酶 | 第24-33页 |
·植物中倍半萜类化合物的生源途径 | 第25-27页 |
·萜类环化酶基因克隆的进展 | 第27-29页 |
·生物信息学应用:DNA序列分析简介 | 第29-33页 |
第二章 抱茎苦荬菜中倍半萜内酯苷及其苷元的抗癌活性研究 | 第33-52页 |
·实验材料 | 第33-35页 |
·药材 | 第33页 |
·细胞 | 第33-34页 |
·药品 | 第34页 |
·实验试剂 | 第34页 |
·实验仪器 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-38页 |
·倍半萜内酯苷及其苷元的制备 | 第35-36页 |
·倍半萜内酯苷及其苷元的细胞毒作用 | 第36-37页 |
·苷元的细胞毒机制 | 第37-38页 |
·实验结果 | 第38-48页 |
·倍半萜内酯及其苷元的制备 | 第38-41页 |
·内酯苷和苷元对三种肿瘤细胞的细胞毒作用即IC_(50)值 | 第41-42页 |
·内酯苷元诱导多种细胞死亡呈明显剂量依赖关系 | 第42-43页 |
·倒置显微镜观察苷元对细胞的作用 | 第43-44页 |
·SV40 DNA体外复制反应 | 第44-45页 |
·RPA的单链DNA结合活性 | 第45-46页 |
·细胞周期阻滞作用 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
·小结 | 第50-52页 |
第三章 抱茎苦荬菜中吉玛烷A合成酶的基因克隆与体外表达 | 第52-86页 |
·实验材料 | 第52-54页 |
·植物材料 | 第52页 |
·菌株和质粒 | 第52页 |
·酶与试剂 | 第52-53页 |
·培养基 | 第53页 |
·引物 | 第53-54页 |
·实验仪器 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-68页 |
·异硫氰酸胍法提取植物总RNA | 第54-55页 |
·抱茎苦荬菜中吉玛烷A合成酶的基因克隆 | 第55-64页 |
·抱茎苦荬菜中吉玛烷A合成酶在大肠杆菌中的表达 | 第64-68页 |
·实验结果 | 第68-82页 |
·兼并引物的设计 | 第68-70页 |
·从抱茎苦卖菜中提取了总RNA | 第70页 |
·紫外检测RNA的纯度和浓度 | 第70页 |
·RT-PCR扩增Cs-GAS-1 | 第70-71页 |
·酶切鉴定重组质粒CsGAS-P-1 | 第71页 |
·PCR鉴定重组质粒CsGAS-P-1 | 第71-72页 |
·RT-PCR扩增Cs-GAS-2 | 第72页 |
·酶切鉴定重组质粒CsGAS-P-2 | 第72-73页 |
·PCR鉴定重组质粒CsGAS-P-2 | 第73页 |
·3’RACE扩增Cs-GAS-3 | 第73-74页 |
·酶切鉴定重组质粒CsGAS-P-3 | 第74页 |
·PCR鉴定重组质粒CsGAS-P-3 | 第74页 |
·5’RACE扩增Cs-GAS-5 | 第74-75页 |
·酶切鉴定重组质粒CsGAS-P-5 | 第75页 |
·PCR鉴定重组质粒CsGAS-P-5 | 第75页 |
·吉玛烷A合成酶基因cDNA序列及其开放阅读框架 | 第75-77页 |
·RT-PCR扩增Cs-GAS | 第77页 |
·酶切鉴定重组质粒CsGAS-P | 第77页 |
·PCR鉴定重组质粒CsGAS-P | 第77-78页 |
·序列分析 | 第78-81页 |
·抱茎苦荬菜中吉玛烷A合成酶基因的提交 | 第81页 |
·抱茎苦荬菜中吉玛烷A合成酶在大肠杆菌中的表达 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-84页 |
·小结 | 第84-86页 |
结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-93页 |
附图 | 第93-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
附录 | 第108页 |