| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| ·DES 的应用和危害 | 第10-15页 |
| ·DES 的应用及残留 | 第10-11页 |
| ·DES 与癌症 | 第11-12页 |
| ·DES 对人类生殖系统的影响 | 第12-13页 |
| ·DES 对免疫系统的影响 | 第13-15页 |
| ·DES 残留检测技术方法评定 | 第15-19页 |
| ·放射免疫测定法（RIA） | 第15页 |
| ·酶免疫检测法（EIA） | 第15-16页 |
| ·气相色谱法（GC） | 第16-17页 |
| ·高效液相色谱法（HPLC） | 第17页 |
| ·液相色谱/质谱（LC/MS）联用技术 | 第17页 |
| ·毛细管电泳法 | 第17-18页 |
| ·薄层色谱法（TLC） | 第18页 |
| ·荧光分析法 | 第18页 |
| ·其他检测方法 | 第18-19页 |
| ·小分子物质的免疫分析检测概述 | 第19-23页 |
| ·免疫半抗原的合成 | 第19-20页 |
| ·结合抗原的合成 | 第20-22页 |
| ·抗体制备 | 第22页 |
| ·免疫学检测方法 | 第22-23页 |
| ·本研究的研究背景、目的及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 己烯雌酚人工抗原的合成及鉴定 | 第25-33页 |
| ·材料与方法 | 第25-28页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·己烯雌酚单羧甲基醚（DES-1）的制备 | 第25-26页 |
| ·己烯雌酚人工抗原的合成 | 第26页 |
| ·DES 人工抗原的 SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-30页 |
| ·DES-1 的合成及鉴定 | 第28-29页 |
| ·DES-1 的核磁共振氢谱（1-HNMR）鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·DES-1 的质谱鉴定结果 | 第29页 |
| ·DES-1 的红外光谱鉴定结果 | 第29页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第29-30页 |
| ·SDS－PAGE 凝胶电泳结果 | 第30页 |
| ·紫外扫描结果 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 己烯雌酚多克隆抗体的制备及鉴定 | 第33-43页 |
| ·材料和方法 | 第33-36页 |
| ·试验动物 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要器材 | 第33页 |
| ·动物免疫试验 | 第33-34页 |
| ·兔子的免疫试验 | 第33-34页 |
| ·小鼠的免疫试验 | 第34页 |
| ·抗体的检测 | 第34-36页 |
| ·ELISA 检测部分相关试剂的配制 | 第34-35页 |
| ·间接ELISA 检测条件的选择 | 第35页 |
| ·包被抗原的选择 | 第35-36页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第36页 |
| ·间接阻断ELISA 法检测抗血清 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·包被原的选择 | 第36-38页 |
| ·间接ELISA 条件的选择结果 | 第38-39页 |
| ·DES 多克隆抗体效价测定结果 | 第39页 |
| ·多克隆抗体特异性的鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·半抗原与免疫 | 第40-41页 |
| ·动物免疫与抗血清的制备 | 第41页 |
| ·半抗原抗体的检测 | 第41-42页 |
| ·间接 ELISA 检测条件的优化 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 己烯雌酚单克隆抗体的制备及鉴定 | 第43-50页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·培养基及主要溶液 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·骨髓瘤细胞 | 第43页 |
| ·试验动物 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第43-44页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第44页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第44页 |
| ·脾细胞制备 | 第44页 |
| ·细胞融合及培养观察 | 第44-45页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第45页 |
| ·阳性杂交瘤细胞克隆化 | 第45-46页 |
| ·细胞的冻存 | 第46页 |
| ·单克隆抗体效价测定 | 第46页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·免疫小鼠的抗体测定结果 | 第46-47页 |
| ·细胞融合及阳性杂交瘤细胞的筛选、克隆 | 第47页 |
| ·杂交瘤细胞上清液抗体效价测定结果(OD450NM值) | 第47页 |
| ·杂交瘤细胞上清抗体特异性鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·单克隆抗体与半抗原的免疫分析 | 第48页 |
| ·免疫原、免疫程序对单抗制备的影响 | 第48-49页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第五章 DES 酶标抗原的合成与鉴定 | 第50-55页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-51页 |
| ·碳二亚胺法合成 HRP-DES | 第50页 |
| ·兔 DES 抗血清的纯化 | 第50页 |
| ·ELISA 法鉴定 HRP-DES | 第50-51页 |
| ·HRP-DES 工作浓度与DES 抗体最佳包被浓度的确定 | 第51页 |
| ·固相抗体竞争ELISA 法检测DES | 第51页 |
| ·标准曲线的制作 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-52页 |
| ·HRP-DES 的制备和鉴定 | 第51-52页 |
| ·HRP-DES 工作浓度与DES 抗体最佳包被浓度的确定 | 第52页 |
| ·反应曲线的制作 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·酶标抗原的合成 | 第52-53页 |
| ·关于固相竞争 ELISA | 第53页 |
| ·关于固相竞争 ELISA 实验条件的优化 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
