| 致谢 | 第1-4页 |
| 目录 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述-同翅目昆虫及其共生细菌系统发育关系及功能研究进展 | 第12-25页 |
| 1 内共生体的概念 | 第12-13页 |
| 2 同翅目昆虫的共生细菌 | 第13页 |
| ·昆虫共生细菌的类型 | 第13页 |
| ·同翅目昆虫共生细菌垂直卵传的机制 | 第13页 |
| 3 同翅目昆虫的原生共生细菌 | 第13-16页 |
| ·同翅目昆虫的原生共生细菌概况 | 第13-15页 |
| ·原生共生细菌的功能 | 第15页 |
| ·原生共生细菌对共生的适应 | 第15-16页 |
| 4 同翅目昆虫的次生共生细菌 | 第16-17页 |
| ·同翅目昆虫的次生共生细菌概况 | 第16页 |
| ·次生共生细菌的功能 | 第16-17页 |
| 5 共生细菌功能的研究方法 | 第17页 |
| 6 烟粉虱共生细菌研究 | 第17-23页 |
| ·烟粉虱概述 | 第17-19页 |
| ·烟粉虱原生共生细菌Candidatus Portiera aleyrodidarum | 第19页 |
| ·烟粉虱次生共生细菌 | 第19-23页 |
| ·肠杆菌科次生共生细菌Candidatus Hamiltonella defensa | 第19-20页 |
| ·Arsenophonus | 第20页 |
| ·Wolbachia | 第20-22页 |
| ·Candidatus Fritschea bemisiae | 第22页 |
| ·Candidatus Cardinium hertigii | 第22页 |
| ·Rickettsia | 第22-23页 |
| ·烟粉虱共生细菌功能研究现状 | 第23页 |
| 7 本研究的目的、内容和技术路线 | 第23-25页 |
| ·目的 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23页 |
| ·技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 基本材料和方法 | 第25-30页 |
| 1 养虫设备 | 第25-26页 |
| ·人工气候养虫室 | 第25页 |
| ·光照培养箱 | 第25页 |
| ·养虫笼 | 第25页 |
| ·微虫笼 | 第25-26页 |
| 2 寄主植物 | 第26页 |
| ·棉花品种 | 第26页 |
| ·无虫棉花的栽培 | 第26页 |
| 3 供试昆虫 | 第26-28页 |
| ·烟粉虱种群 | 第27页 |
| ·烟粉虱种群的纯化 | 第27页 |
| ·烟粉虱种群的建立和维持 | 第27-28页 |
| ·种群建立 | 第27页 |
| ·种群转接和维持 | 第27-28页 |
| 4 主要仪器和试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| 5 常用分子生物学方法 | 第28-30页 |
| ·烟粉虱DNA的提取 | 第28页 |
| ·烟粉虱生物型的鉴定 | 第28页 |
| ·标准PCR反应体系 | 第28-30页 |
| 第三章 16S rDNA通用引物鉴定烟粉虱体内共生细菌 | 第30-38页 |
| 1 方法 | 第30-32页 |
| ·通用引物及反应条件 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第31页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第31-32页 |
| ·连接 | 第31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·培养 | 第31页 |
| ·筛选 | 第31-32页 |
| ·初步筛选 | 第31页 |
| ·提取质粒DNA | 第31-32页 |
| ·双酶切鉴定 | 第32页 |
| ·测序 | 第32页 |
| 2 结果 | 第32-36页 |
| ·通用引物扩增 | 第32-33页 |
| ·共生细菌的序列及鉴定 | 第33-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 烟粉虱体内共生细菌的分子探测 | 第38-48页 |
| 1 方法 | 第38-40页 |
| ·共生细菌的分子探测 | 第38-39页 |
| ·Portiera aleyrodidarum的探测 | 第38页 |
| ·Hamiltonella defensa的探测 | 第38页 |
| ·Wolbachia的探测 | 第38-39页 |
| ·Arsenophonus的探测 | 第39页 |
| ·Fritschea bemisiae的探测 | 第39页 |
| ·Cardinium hertigii的探测 | 第39页 |
| ·Rickettsia的探测 | 第39页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第39页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第39页 |
| ·测序 | 第39页 |
| ·序列分析及系统发育分析 | 第39-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-41页 |
| ·原生共生细菌Portiera aleyrodidarum | 第40页 |
| ·肠杆菌科次生共生细菌Hamiltonella defensa | 第40-41页 |
| ·Wolbachia | 第41页 |
| ·Arsenophonus | 第41页 |
| ·衣原体Fritschea bemisiae | 第41页 |
| ·Cardinium hertigii | 第41页 |
| ·Rickettsia | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-48页 |
| 第五章 抗生素对烟粉虱生长发育的影响 | 第48-55页 |
| 1.材料和方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·共生细菌的分子鉴定 | 第49页 |
| ·抗生素饲喂烟粉虱的方法 | 第49页 |
| ·适合度指标 | 第49-50页 |
| ·统计分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-51页 |
| ·抗生素处理后共生细菌的变化 | 第50页 |
| ·抗生素处理后烟粉虱适合度的变化 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-55页 |
| ·抗生素对共生细菌的影响 | 第51-53页 |
| ·抗生素对烟粉虱的影响 | 第53-55页 |
| 第六章 总讨论 | 第55-57页 |
| 1 本研究的特色与创新之处 | 第55页 |
| 2 值得继续研究的几个问题 | 第55-57页 |
| 附录一 试验试剂的配制方法 | 第57-60页 |
| 1.DNA提取时所用试剂 | 第57页 |
| ·1M Tris-HCl(pH=8.0) | 第57页 |
| ·5M NaCl | 第57页 |
| ·0.5M EDTA(pH=8.0) | 第57页 |
| ·10%(W/V)SDS(pH=7.2) | 第57页 |
| ·DNA提取缓冲液 | 第57页 |
| ·ProK(蛋白酶K) | 第57页 |
| 2.电泳所用试剂 | 第57页 |
| ·5×TBE Buffer | 第57页 |
| ·10%琼脂糖凝胶 | 第57页 |
| 3.克隆所用试剂 | 第57-59页 |
| ·Ampicillin(100mg/ml) | 第58页 |
| ·IPTG(200mg/ml) | 第58页 |
| ·X-Gal(20mg/ml) | 第58页 |
| ·LB液体培养基(Luria-Bertani培养基) | 第58页 |
| ·LB固体培养基 | 第58页 |
| ·麦康凯琼脂培养基 | 第58页 |
| ·1M CaCl2 | 第58页 |
| ·氯化钙法制备新鲜的大肠杆菌TG_1感受态细胞 | 第58-59页 |
| 4.抗生素处理所用试剂 | 第59-60页 |
| ·磷酸缓冲液(phosphate buffer,PB) | 第59页 |
| ·1.54%铁(EDTA)的水溶液 | 第59页 |
| ·Hoagland—Snyder植物营养液 | 第59-60页 |
| 附录二 革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构的比较 | 第60-61页 |
| 附录三 博士研究生期间的研究成果及发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
