第一章 文献综述 | 第1-29页 |
1 植物遗传转化研究进展 | 第13-18页 |
·植物转基因的基本方法及其特点 | 第13-15页 |
·基因枪转化法 | 第13-14页 |
·电击法 | 第14页 |
·PEG 介导法 | 第14页 |
·激光微束法 | 第14-15页 |
·农杆菌介导法 | 第15页 |
·农杆菌介导植物转基因研究进展 | 第15-18页 |
·农杆菌介导植物转基因机理及特点 | 第15-18页 |
2 草坪草生物技术研究进展及热点 | 第18-26页 |
·转基因草坪草研究进展 | 第19-24页 |
·结缕草遗传转化研究进展 | 第19-20页 |
·结缕草的离体再生 | 第19-20页 |
·结缕草的遗传转化 | 第20页 |
·高羊茅遗传转化研究进展 | 第20-21页 |
·再生体系的建立 | 第21页 |
·羊茅属的遗传转化 | 第21页 |
·其他草坪草转基因研究进展 | 第21-24页 |
·外植体的选用 | 第21-22页 |
·转化方法 | 第22-23页 |
·选择标记及其浓度 | 第23-24页 |
·草坪草的蛋白质和分子标记研究 | 第24-25页 |
·蛋白质标记 | 第24页 |
·DNA 分子标记 | 第24-25页 |
·体细胞无性系变异技术在草坪草育种中的应用 | 第25-26页 |
3 草坪草的研究热点及展望 | 第26-29页 |
·优质抗逆草坪草 | 第26-27页 |
·抗病虫与环保型草坪草 | 第27-28页 |
·纯天然彩色草坪草 | 第28页 |
·核技术在草坪草改良中的潜在应用价值 | 第28-29页 |
引言 | 第29-31页 |
第二章 日本结缕草与高羊茅高效再生体系的建立 | 第31-38页 |
1 材料与方法 | 第31-32页 |
·试验材料 | 第31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·日本结缕草种子休眠的破除 | 第31页 |
·种子发芽实验 | 第31页 |
·日本结缕草愈伤组织的诱导、继代及分化 | 第31页 |
·高羊茅愈伤组织的诱导及分化 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-36页 |
·日本结缕草种子休眠的解除 | 第32-33页 |
·不同激素及其组合对日本结缕草愈伤组织诱导的影响 | 第33-34页 |
·激素6-BA 与 KT 对日本结缕草愈伤组织分化的影响 | 第34-35页 |
·高羊茅再生体系条件的优化 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
第三章 日本结缕草和高羊茅优质突变体的研究 | 第38-43页 |
1 材料与方法 | 第38-39页 |
·材料 | 第38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·日本结缕草及高羊茅愈伤诱导、辐照及再生 | 第38页 |
·空间处理 | 第38-39页 |
·SP1生物学效应和 SP2的早熟和变异分析 | 第39页 |
·突变深入鉴定及坪用性状评价 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-42页 |
·体细胞无性系变异结合γ射线辐照获得不同性状突变体 | 第39页 |
·空间技术处理黄叶高羊茅的 SP1生物学效应 | 第39-40页 |
·SP2突变 | 第40-42页 |
·叶绿素缺失突变 | 第40页 |
·株、叶形态和熟期突变 | 第40-41页 |
·耐热性变异 | 第41页 |
·突变性状的遗传稳定性 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
第四章 农杆菌介导日本结缕草高效转化体系的建立 | 第43-56页 |
1 材料与方法 | 第43-46页 |
·试验材料 | 第43页 |
·日本结缕草种子休眠的破除,胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第43-44页 |
·抗生素、选择试剂及其浓度设置 | 第44页 |
·抗生素的抑菌试验 | 第44页 |
·植物组织对选择标记的本底耐受性试验 | 第44页 |
·转化方法的比较试验 | 第44-45页 |
·辐照对转化的影响 | 第45页 |
·负压处理对转化的影响 | 第45页 |
·GUS 组织化学染色 | 第45-46页 |
·培养基 | 第46页 |
·农杆菌培养基 | 第46页 |
·植物转化用培养基 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-52页 |
·抗生素的抑菌效果 | 第46-47页 |
·植物材料对抗生素的本底耐受性 | 第47页 |
·转化方法对转化频率的影响 | 第47-50页 |
·添加 AS 对转化频率的影响 | 第48页 |
·感染时间对gus 基因瞬时表达频率的影响 | 第48页 |
·共培养温度对gus 基因瞬时表达频率的影响 | 第48页 |
·共培养天数对gus 基因瞬时表达频率的影响 | 第48页 |
·菌液浓度对转化频率的影响 | 第48-49页 |
·光照条件对转化频率的影响 | 第49页 |
·预培养时间对转化频率的影响 | 第49-50页 |
·继代时间对转化频率的影响 | 第50页 |
·辐照处理对转化的影响 | 第50-51页 |
·辐照对愈伤组织转化的影响 | 第50页 |
·辐照对存活率的影响 | 第50-51页 |
·辐照后培养时间对愈伤组织转化的影响 | 第51页 |
·负压处理对转化的影响 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-56页 |
第五章 农杆菌介导日本结缕草转bt 基因植株的获得 | 第56-72页 |
1 材料与方法 | 第56-65页 |
·试验材料与准备 | 第56页 |
·农杆菌菌株与质粒 | 第56-57页 |
·方法 | 第57-65页 |
·农杆菌介导日本结缕草胚性愈伤的转化方法和转化体的筛选与再生 | 第57-59页 |
·GUS 组织化学染色法 | 第59页 |
·日本结缕草 DNA 提取 | 第59-60页 |
·PCR 检测 | 第60-61页 |
·Southern 杂交 | 第61-64页 |
·cry1A(b)基因表达产物的定量 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-70页 |
·转化体筛选体系的优化和抗性再生植株的获得 | 第65-67页 |
·共培养后的筛选策略对抗性愈伤率的影响 | 第65-66页 |
·分化培养基组分对植株再生的影响 | 第66-67页 |
·潮霉素抗性再生日本结缕草植株的获得 | 第67页 |
·潮霉素抗性日本结缕草植株的 GUS 组织化学染色 | 第67-68页 |
·PCR 分析 | 第68页 |
·转基因植株的Southern blot分析 | 第68-69页 |
·转基因植株中 Bt 蛋白含量测定结果 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-72页 |
结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
个人简介 | 第89-90页 |
在读期间发表的论文 | 第90页 |