| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-26页 |
| 1.植物过敏反应(hypersensitive response，HR) | 第10-13页 |
| ·电解质流失 | 第11页 |
| ·磷脂酶活性 | 第11页 |
| ·钙流动 | 第11页 |
| ·蛋白质磷酸化 | 第11-12页 |
| ·脂氧合酶活性 | 第12页 |
| ·活性氧产生 | 第12-13页 |
| ·防卫基因活化 | 第13页 |
| 2.hrp基因 | 第13-20页 |
| ·hrp基因的遗传组成 | 第13-14页 |
| ·基因结构与同源性分析 | 第14-17页 |
| ·hrp基因的表达和调控 | 第17-18页 |
| ·hrp基因产物及其功能 | 第18-20页 |
| ·基因调控功能 | 第18页 |
| ·蛋白质转位泌出功能 | 第18-19页 |
| ·hrp基因与avr基因的关系 | 第19-20页 |
| ·编码HR反应激发子 | 第20页 |
| 3.Harpin蛋白 | 第20-24页 |
| ·Harpin蛋白的结构与特点 | 第20页 |
| ·Harpin蛋白作用机理 | 第20-22页 |
| ·Harpin蛋白的应用 | 第22-24页 |
| 4.展望 | 第24页 |
| 5.本研究的背景、目的与意义 | 第24-26页 |
| 材料与方法 | 第26-39页 |
| 1 材料 | 第26-30页 |
| ·菌种和质粒 | 第26页 |
| ·常用工具酶及试剂盒 | 第26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·常用溶液 | 第27-30页 |
| ·小量碱法制备质粒所用溶液 | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第27-28页 |
| ·丙烯酰胺凝胶电泳所用溶液 | 第28-29页 |
| ·其它溶液的配制 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-39页 |
| ·克隆载体T-hrpZ的构建 | 第30-34页 |
| ·含hrpZ基因质粒的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR | 第31-33页 |
| ·hrpZ基因片段的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第32-33页 |
| ·连接 | 第33页 |
| ·转化 | 第33-34页 |
| ·冷氯化钙法制备感受态细胞 | 第33页 |
| ·质粒转化大肠杆菌JM109感受态细胞 | 第33-34页 |
| ·阳性重组子的检测 | 第34页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第34页 |
| ·pGEM-T-hrpZ质粒的双酶切鉴定 | 第34页 |
| ·hrpZ序列测定 | 第34页 |
| ·原核表达工程菌BL21 (DE3) -pET-hrpZ的构建 | 第34-37页 |
| ·用Xho I和EcoR I双酶切pGEM-T-hrpZ质粒和表达载体pET32(b)+ | 第34-35页 |
| ·连接反应 | 第35页 |
| ·含重组pET-hrpZ质粒的阳性菌落的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组表达载体pET-hrpZ的构建 | 第36-37页 |
| ·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第37-38页 |
| ·E.coli BL21(DE3)-pET-hrpZ的诱导表达 | 第37页 |
| ·基因工程蛋白的粗提取 | 第37页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第37页 |
| ·诱导条件优化 | 第37-38页 |
| ·表达产物生物活性测定 | 第38-39页 |
| ·样品处理 | 第38页 |
| ·生物测定 | 第38-39页 |
| 实验结果 | 第39-43页 |
| 1 PCR扩增hrpZ基因 | 第39页 |
| 2 hrpZ基因的阳性克隆子的PCR与酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 3 hrpZ基因的重组质粒鉴定 | 第40-41页 |
| 4 外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第41-42页 |
| 5 HrpZ蛋白诱导植物过敏反应活性检测 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 硕士期间发表和待发表的文章 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
