中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-28页 |
1.1 蛋白质芯片简介 | 第11-12页 |
1.2 几种主要的蛋白质芯片 | 第12-15页 |
1.2.1 蛋白质微阵列 | 第12-13页 |
1.2.2 微孔板蛋白质芯片 | 第13-14页 |
1.2.3 三维凝胶块芯片 | 第14页 |
1.2.4 芯片实验室 | 第14-15页 |
1.3 蛋白质芯片的主要用途 | 第15-18页 |
1.3.1 蛋白质芯片在医学研究与临床诊断中的应用 | 第15-16页 |
1.3.2 蛋白质芯片在药物筛选、测试及其作用机理研究中的应用 | 第16-17页 |
1.3.3 蛋白质芯片在食品卫生监督及分析中的应用 | 第17-18页 |
1.4 乙、丙型病毒性肝炎诊断现状和蛋白质芯片技术的应用 | 第18-19页 |
1.5 免疫胶体金技术 | 第19-27页 |
1.5.1 免疫胶体金技术简介 | 第19-20页 |
1.5.2 胶体金探针在蛋白质芯片检测中的应用 | 第20-21页 |
1.5.3 免疫胶体金的一般性状 | 第21-22页 |
1.5.4 胶体金的制备方法 | 第22-23页 |
1.5.5 胶体金标记蛋白质 | 第23-25页 |
1.5.5.1 胶体金探针的制备方法、条件和影响因素 | 第23-24页 |
1.5.5.2 胶体金探针的纯化 | 第24-25页 |
1.5.5.3 胶体金探针的保存 | 第25页 |
1.5.6 胶体金标记技术在免疫学中的应用 | 第25-27页 |
1.6 本实验的研究目的 | 第27-28页 |
第二章 蛋白质芯片片基的制备 | 第28-39页 |
2.1 引言 | 第28-29页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第29-31页 |
2.3 方法 | 第31-33页 |
2.3.1 玻璃片基的表面处理 | 第31页 |
2.3.1.1 清洗玻片 | 第31页 |
2.3.1.2 玻璃片基的戊二醛修饰 | 第31页 |
2.3.1.3 玻璃片基的GOPTS活化 | 第31页 |
2.3.2 蛋白质固定能力比较的芯片制备 | 第31-32页 |
2.3.3 检测乙、丙型肝炎病毒抗体蛋白质芯片的制备 | 第32页 |
2.3.4 玻片的封闭 | 第32-33页 |
2.4 结果 | 第33-35页 |
2.4.1 蛋白质的固定能力比较 | 第33-34页 |
2.4.2 固定蛋白浓度的优化 | 第34页 |
2.4.3 封闭剂的选择 | 第34-35页 |
2.5 讨论 | 第35-39页 |
第三章 蛋白质芯片检测探针的制备 | 第39-48页 |
3.1 引言 | 第39页 |
3.2 主要试剂和仪器 | 第39-40页 |
3.3 方法 | 第40-43页 |
3.3.1 胶体金的制备 | 第40-42页 |
3.3.1.1 玻璃器皿的清洁 | 第41页 |
3.3.1.2 试剂的配制要求 | 第41-42页 |
3.3.1.3 制备胶体金的方法和步骤 | 第42页 |
3.3.2 胶体金与SPA用量比的确定 | 第42页 |
3.3.3 胶体金-SPA探针(Au-SPA)的制备 | 第42页 |
3.3.4 胶体金-SPA探针的纯化 | 第42-43页 |
3.3.5 胶体金及胶体金-SPA探针的质量鉴定 | 第43页 |
3.3.5.1 胶体金及胶体金-SPA探针的电镜鉴定 | 第43页 |
3.3.5.2 胶体金及胶体金-SPA探针的UV-Vis光谱 | 第43页 |
3.4 结果 | 第43-47页 |
3.4.1 胶体金的大小及形态 | 第43-44页 |
3.4.2 胶体金-SPA探针 | 第44-45页 |
3.4.3 胶体金和胶体金-SPA探针的UV-Vis光谱比较 | 第45-46页 |
3.4.3.1 胶体金的UV-Vis光谱 | 第45页 |
3.4.3.2 胶体金和胶体金-SPA探针的UV-Vis紫外可见光谱比较 | 第45-46页 |
3.4.4 胶体金与SPA用量比的确定 | 第46-47页 |
3.5 讨论 | 第47-48页 |
第四章 蛋白质芯片检测结果的信号输出及芯片的临床验证 | 第48-59页 |
4.1 引言 | 第48-49页 |
4.2 主要试剂和仪器 | 第49页 |
4.3 方法 | 第49-51页 |
4.3.1 杂交液的配置 | 第49页 |
4.3.2 杂交 | 第49-50页 |
4.3.3 显色 | 第50页 |
4.3.4 蛋白质芯片实验检测下限的评估 | 第50页 |
4.3.5 蛋白质芯片实验与ELISA方法的比较 | 第50-51页 |
4.4 结果 | 第51-56页 |
4.4.1 不同银染时间对实验结果的影响 | 第51-52页 |
4.4.2 蛋白质芯片实验的检测下限 | 第52-53页 |
4.4.3 蛋白质芯片实验与ELISA方法的比较 | 第53-56页 |
4.5 讨论 | 第56-58页 |
小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
研究生期间发表的论文和申报的发明专利 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |