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新型分子探针的设计及其在甲基化酶和限制性内切酶实时分析及药物筛选中的应用

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
本文所用英文缩写词表第11-12页
第1章 绪论第12-25页
   ·传统核酸分子探针第12-14页
     ·基因组DNA 分子探针第13页
     ·cDNA 分子探针第13页
     ·RNA 分子探针第13-14页
   ·新型核酸分子探针第14-22页
   ·本论文开展的研究工作第22-25页
     ·基于双发夹分子信标分析核酸甲基化酶及药物筛选第23页
     ·新型发夹荧光探针用于DNA 甲基化过程的实时监测及药物筛选第23页
     ·利用分子信标对限制性内切酶切割单链DNA 过程的实时监测第23-25页
第2章 基于双发夹分子信标分析核酸甲基化酶及药物筛选第25-40页
   ·前言第25-26页
   ·实验部分第26-30页
     ·实验原理第26-28页
     ·试剂与仪器第28-29页
     ·实验方法第29-30页
   ·结果与讨论第30-39页
     ·双发夹分子信标性能考察第30页
     ·实验条件的优化第30-34页
     ·甲基化反应时间动力学研究第34-35页
     ·甲基给体(SAM)对甲基化反应的影响第35-36页
     ·M.Alu I 活性检测第36页
     ·亚精胺对M.Alu I 活性的影响第36-37页
     ·抗肿瘤药物对M.Alu I 活性的影响第37-38页
     ·凝胶电泳分析第38-39页
   ·结论第39-40页
第3章 新型发夹荧光探针用于DNA 甲基化过程的实时监测及药物筛选第40-52页
   ·前言第40页
   ·实验部分第40-43页
     ·实验原理第40-42页
     ·试剂与仪器第42页
     ·实验方法第42-43页
   ·结果与讨论第43-51页
     ·DNA 甲基化的实时监测第43-44页
     ·甲基化底物对甲基化速度的影响第44-45页
     ·金属离子对甲基化过程的影响第45页
     ·Dam 甲基化酶的定量分析第45-47页
     ·药物对DpnI 酶活性的影响第47-48页
     ·药物对Dam 甲基化酶活性的影响第48-49页
     ·凝胶电泳分析第49-50页
     ·线性探针与发夹探针的性能比较第50-51页
   ·结论第51-52页
第4章 利用分子信标对限制性内切酶切割单链DNA 过程的实时监测第52-61页
   ·前言第52-53页
   ·实验部分第53-55页
     ·实验原理第53页
     ·试剂与仪器第53-54页
     ·实验方法第54-55页
   ·结果与讨论第55-60页
     ·限制性内切酶对分子信标的切割第55-56页
     ·分子信标浓度对酶切速度的影响第56-57页
     ·限制性内切酶Xsp I 活性检测第57-58页
     ·凝胶电泳分析第58页
     ·限制性内切酶切割单链DNA 机制探讨第58-60页
   ·结论第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-70页
致谢第70-71页
附录A(攻读学位期间所发表的学术论文目录)第71页

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