前言 | 第1-9页 |
第1章 概述 | 第9-26页 |
1.1 粪便对近岸海域的污染 | 第9-12页 |
1.1.1 粪便污染的分类 | 第9页 |
1.1.2 粪便污染对近岸海域的危害 | 第9-11页 |
1.1.3 准确示踪和控制污染源是解决粪便污染危害的关键 | 第11-12页 |
1.2 粪便污染源示踪技术研究现状 | 第12-15页 |
1.2.1 污染源示踪技术的分类 | 第12-13页 |
1.2.2 微生物源示踪简介 | 第13-15页 |
1.3 粪便污染源示踪相关技术 | 第15-26页 |
1.3.1 示踪微生物(示踪因子)的筛选 | 第15-16页 |
1.3.2 微生物源示踪的微生物技术 | 第16-17页 |
1.3.3 微生物源示踪的生物化学(表型)技术 | 第17-18页 |
1.3.4 微生物源示踪中的化学方法 | 第18页 |
1.3.5 微生物源示踪的分子学(基因型)技术-DNA“指纹”技术 | 第18-21页 |
1.3.6 聚合酶链式反应技术 | 第21-22页 |
1.3.7 DNA电泳技术 | 第22-24页 |
1.3.8 本论文的设计思想 | 第24-26页 |
第2章 示踪因子(E.coli)的分离纯化 | 第26-39页 |
2.1 材料 | 第26-28页 |
2.1.1 粪便标本 | 第26-27页 |
2.1.2 培养基 | 第27页 |
2.1.3 试剂 | 第27页 |
2.1.4 对照标准菌株 | 第27页 |
2.1.5 设备 | 第27-28页 |
2.2 方法 | 第28-31页 |
2.2.1 真空冷冻干燥菌种 ATCC25922的恢复培养 | 第28页 |
2.2.2 E.coli的分离 | 第28-29页 |
2.2.3 E.coli的镜检(革兰氏染色) | 第29页 |
2.2.4 E.coli的生化试验 | 第29-30页 |
2.2.5 E.coli纯化保存 | 第30-31页 |
2.2.6 E.coli冻存检测 | 第31页 |
2.3 结果与讨论 | 第31-38页 |
2.3.1 ATCC25922的活化 | 第31页 |
2.3.2 E.coli的镜检结果 | 第31页 |
2.3.3 E.coli的分离结果 | 第31-37页 |
2.3.4 E.coli冻存检测结果 | 第37-38页 |
2.4 小结 | 第38-39页 |
第3章 E.coli的16S-23S ISR“指纹”图谱分析 | 第39-64页 |
3.1 材料 | 第39-42页 |
3.1.1 菌株 | 第39页 |
3.1.2 培养基 | 第39页 |
3.1.3 试剂 | 第39页 |
3.1.4 引物 | 第39-40页 |
3.1.5 溶液配制~[73] | 第40-41页 |
3.1.6 电泳凝胶的制备 | 第41-42页 |
3.1.7 主要仪器 | 第42页 |
3.2 方法 | 第42-50页 |
3.2.1 E.coli基因组 DNA提取 | 第42-46页 |
3.2.2 16S-23S ISR PCR条件摸索 | 第46-48页 |
3.2.3 聚丙烯酰胺(PAGE)凝胶电泳 | 第48-49页 |
3.2.4 E.coli“指纹”图谱构建 | 第49-50页 |
3.3 结果与讨论 | 第50-63页 |
3.3.1 E.coli基因组DNA提取方法比较 | 第50-51页 |
3.3.2 16S-23S ISR PCR条件摸索 | 第51-53页 |
3.3.3 聚丙烯酰胺(PAGE)凝胶电泳 | 第53-57页 |
3.3.4 E.coli 16S-23S ISR“指纹”图谱分析 | 第57-63页 |
3.4 小结 | 第63-64页 |
结语 | 第64-65页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
研究生履历 | 第75页 |