| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-38页 |
| 第一章 轮状病毒疫苗设计策略与提高疫苗免疫效果新方法研究进展 | 第13-38页 |
| ·轮状病毒疫苗设计的新思路与策略 | 第15-21页 |
| ·理想疫苗的要求 | 第15-16页 |
| ·新型疫苗技术与免疫策略 | 第16-19页 |
| ·T细胞两条通路的激活与新型疫苗设计 | 第19页 |
| ·DNA芯片技术与新型疫苗设计 | 第19-20页 |
| ·目前的疫苗种类 | 第20-21页 |
| ·轮状病毒疫苗研发重点与增强疫苗免疫效果的途径 | 第21-38页 |
| ·新型免疫方式的研发 | 第21页 |
| ·新型传送方式的研发 | 第21-22页 |
| ·核酸疫苗的研发 | 第22-23页 |
| ·基因工程疫苗的研发 | 第23-25页 |
| ·新型疫苗载体释放系统的选择 | 第25-27页 |
| ·新型疫苗佐剂的选择 | 第27-30页 |
| ·APC佐剂 | 第27页 |
| ·T细胞佐剂 | 第27-28页 |
| ·黏膜佐剂 | 第28-29页 |
| ·结合物型佐剂 | 第29-30页 |
| ·疫苗抗原的选择 | 第30-32页 |
| ·免疫接种途径、启动子和制剂剂型的选择 | 第32-34页 |
| ·免疫接种途径的选择 | 第32页 |
| ·启动子的选择 | 第32-33页 |
| ·制剂剂型的选择 | 第33-34页 |
| ·建立能客观评价疫苗免疫效果的理想动物模型 | 第34-38页 |
| 试验研究 | 第38-69页 |
| 第二章 表达人A组轮状病毒VP6基因的重组腺病毒疫苗免疫效果的研究 | 第38-48页 |
| ·材料和方法 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·细胞和病毒 | 第38-39页 |
| ·免疫学试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·其他主要器材和试剂 | 第39页 |
| ·主要试剂溶液的配方 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·腺病毒的制备和滴度测定 | 第40-41页 |
| ·轮状病毒扩增及滴度测定 | 第41页 |
| ·动物免疫 | 第41-42页 |
| ·小鼠血清中RV特异性IgG抗体的测定 | 第42页 |
| ·小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ含量的测定 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-46页 |
| ·重组腺病毒滴度的测定 | 第43-44页 |
| ·轮状病毒的滴度测定 | 第44页 |
| ·重组腺病毒rvAdVP6免疫小鼠后可诱导产生RV特异性IgG | 第44-45页 |
| ·重组腺病毒rvAdVP6免疫小鼠后诱导机体产生全面的免疫应答但主导免疫反应与免疫途径有关 | 第45-46页 |
| ·小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4的测定 | 第45页 |
| ·小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ的测定 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 A组轮状病毒VP6基因优化改造的方法研究 | 第48-69页 |
| ·材料与方法 | 第48-61页 |
| ·材料 | 第48-51页 |
| ·菌种和质粒 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要试剂溶液配方 | 第49页 |
| ·合成引物 | 第49-51页 |
| ·方法 | 第51-61页 |
| ·逐步拼接法合成RVVP6基因 | 第51-60页 |
| ·两步法合成RVVP6基因 | 第60-61页 |
| ·优化改造前后RVVP6基因的序列对比分析 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-67页 |
| ·逐步拼接法合成RVVP6基因 | 第61-66页 |
| ·获得优化的RVVP6基因重组cDNA序列 | 第61页 |
| ·RVVP6基因的优化合成策略 | 第61-62页 |
| ·获得RVVP6基因S1片段和S2片段 | 第62-64页 |
| ·获得优化的RVVP6基因 | 第64-66页 |
| ·两步法合成RVVP6基因 | 第66-67页 |
| ·RVVP6基因优化改造前后的序列对比分析 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-82页 |
| 英文缩略词表 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简介 | 第84页 |
