白菜核雄性不育两用系花蕾cDNA文库的构建及雄性不育相关基因的初步筛选
| 缩写词(ABBREVIATION) | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-30页 |
| ·植物核雄性不育研究概况 | 第16-19页 |
| ·植物雄性不育的表现 | 第16页 |
| ·植物雄性不育的类型 | 第16-17页 |
| ·植物核雄性不育的细胞学研究 | 第17-19页 |
| ·植物核雄性不育的分子机理研究 | 第19页 |
| ·cDNA文库构建方法的研究进展 | 第19-30页 |
| ·普通cDNA文库的构建 | 第20-26页 |
| ·构建cDNA文库的载体系统 | 第26-27页 |
| ·新型cDNA文库 | 第27-28页 |
| ·cDNA文库技术在功能基因组学研究中的应用 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-42页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·菌株和载体 | 第30页 |
| ·培养基和常用溶液 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-42页 |
| ·植株性状观察和花器形态的比较 | 第32页 |
| ·白菜花蕾总RNA的提取和mRNA的分离 | 第32-33页 |
| ·RNA的浓度测定及质量鉴定 | 第33页 |
| ·第一链cDNA合成: | 第33-34页 |
| ·LD-PCR合成ds cDNA | 第34-35页 |
| ·蛋白酶K消化和ds cDNA纯化 | 第35页 |
| ·Sfi Ⅰ消化 | 第35页 |
| ·cDNA片段的分级分离 | 第35-36页 |
| ·连接反应 | 第36页 |
| ·包装反应 | 第36-37页 |
| ·受体菌培养 | 第37页 |
| ·原初文库滴度的测定 | 第37-38页 |
| ·确定重组克隆子的百分率 | 第38页 |
| ·PCR检测文库插入片段大小 | 第38页 |
| ·文库扩增 | 第38-39页 |
| ·测定扩增文库的滴度 | 第39页 |
| ·雄性不育相关基因cDNA的初步筛选 | 第39-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-48页 |
| ·植株性状和花器形态的比较 | 第42-43页 |
| ·白菜花蕾RNA的紫外吸收测定与凝胶电泳鉴定 | 第43页 |
| ·DS cDNA的合成与扩增 | 第43-44页 |
| ·DS cDNA片段的酶切和分级分离 | 第44-45页 |
| ·原初文库的滴度 | 第45页 |
| ·文库的重组率 | 第45-46页 |
| ·文库的PCR检测 | 第46-47页 |
| ·扩增文库的滴度 | 第47页 |
| ·雄性不育相关基因cDNA的初步筛选结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-54页 |
| ·白菜核雄性不育两用系的不育性状 | 第48页 |
| ·提高RNA质量的措施 | 第48-49页 |
| ·严格防止RNase污染，并设法抑制其活性 | 第48-49页 |
| ·保证RNA的产量和纯度 | 第49页 |
| ·全长cDNA文库的构建 | 第49-51页 |
| ·5’帽的利用 | 第49-50页 |
| ·SMART~(TM)全长cDNA文库的构建 | 第50-51页 |
| ·SMART~(TM)技术在白菜上的应用 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 硕士期间发表的论文及论著 | 第59页 |
