致谢 | 第1-10页 |
术语和缩略语表 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-36页 |
1 农药残留仪器分析技术的发展动态 | 第15-17页 |
·色质联用技术 | 第16页 |
·超临界流体色谱技术 | 第16页 |
·直接光谱分析技术 | 第16页 |
·毛细管电泳分析 | 第16-17页 |
2 农药免疫分析技术原理 | 第17-20页 |
·免疫分析的基本原理 | 第17页 |
·小分子免疫机理 | 第17-20页 |
·免疫分析中的标记技术 | 第20页 |
3 农药免疫分析化学的研究方法 | 第20-29页 |
·半抗原的分子设计 | 第21-22页 |
·半抗原的合成途径 | 第22-23页 |
·半抗原与载体蛋白的偶联 | 第23页 |
·人工抗原纯化及鉴定 | 第23-24页 |
·农药人工抗原偶联比的测定 | 第24页 |
·紫外分光光度法 | 第24页 |
·标记抗原示踪法 | 第24页 |
·其它方法 | 第24页 |
·抗体的制备与纯化 | 第24-26页 |
·多克隆抗体的制备 | 第25-26页 |
·单克隆抗体的制备 | 第26页 |
·抗体的纯化与鉴定 | 第26页 |
·抗原或抗体的酶标记 | 第26-27页 |
·农药免疫分析的影响因素 | 第27-29页 |
·免疫原的制备 | 第27页 |
·交叉反应问题 | 第27-28页 |
·溶剂的影响 | 第28-29页 |
·样品基质的影响 | 第29页 |
4 农药免疫分析技术的发展动态 | 第29-33页 |
·农药免疫分析技术的发展史 | 第29-30页 |
·农药免疫分析的发展趋势 | 第30-33页 |
·生物传感器技术 | 第31页 |
·免疫亲和层析 | 第31-32页 |
·流动注射免疫分析 | 第32页 |
·免疫传感器 | 第32页 |
·多组分分析物免疫分析 | 第32-33页 |
5 本研究的立题依据及研究主要内容 | 第33-36页 |
·立题依据 | 第33-35页 |
·主要研究内容及预期目标 | 第35-36页 |
第二章 吡虫啉和氟虫腈人工半抗原与抗原的合成 | 第36-49页 |
1 材料与仪器 | 第37-38页 |
·实验材料 | 第37-38页 |
·试剂 | 第37-38页 |
·仪器设备 | 第38页 |
2 试验方法 | 第38-42页 |
·半抗原的合成与鉴定 | 第38-41页 |
·吡虫啉半抗原1-(6-丙酸巯基-3-吡啶基甲基)-N-硝基亚咪唑烷-2-基胺的合成 | 第38-39页 |
·氟虫腈半抗原5-氨基-1-(2,6-二氯-4,4,4,-三氟甲苯基)-4-三氟甲基亚硫酰基-3-羧基吡唑的合成 | 第39-40页 |
·氟虫腈半抗原5-氨基-1-(2,6-二氯-4,4,4,-三氟甲苯基)-4-三氟甲基亚硫酰基-3-(3-羧基-丙酰胺基)吡唑的合成 | 第40-41页 |
·人工抗原的制备与鉴定 | 第41-42页 |
·免疫原合成 | 第41-42页 |
·包被原合成 | 第42页 |
·人工抗原结合比的测定 | 第42页 |
3 结果与讨论 | 第42-49页 |
·吡虫啉半抗原合成与鉴定 | 第42-43页 |
·氟虫腈半抗原的合成与鉴定 | 第43-47页 |
·偶联物的紫外扫描图谱分析 | 第47页 |
·偶联物结合比的测定结果 | 第47-49页 |
第三章 吡虫啉和氟虫腈抗体的研制及酶联免疫吸附检测(ELISA)方法的建立 | 第49-73页 |
1 试验材料 | 第49-50页 |
·试剂 | 第49页 |
·仪器 | 第49-50页 |
2 试验方法 | 第50-60页 |
·抗体的制备 | 第50-51页 |
·实验动物的准备 | 第50页 |
·免疫原的乳化 | 第50-51页 |
·免疫方案 | 第51页 |
·采血与试血 | 第51页 |
·抗体的纯化与鉴定 | 第51-52页 |
·抗体的纯化 | 第51-52页 |
·抗体(IgG)含量的计算 | 第52页 |
·酶标物的制备与鉴定 | 第52-53页 |
·酶标抗体的制备 | 第52-53页 |
·酶标半抗原的制备 | 第53页 |
·抗原抗体亲和性与特异性的考察 | 第53-56页 |
·抗血清及纯化抗体的效价测定 | 第53-54页 |
·酶标抗体效价的测定 | 第54页 |
·抗血清与不同包被原及载体蛋白的结合反应特性 | 第54-55页 |
·抗体的亲和性 | 第55页 |
·酶标抗体与氟虫腈的亲和性 | 第55页 |
·抗体的特异性 | 第55-56页 |
·酶联免疫吸附检测(ELISA)方法试验 | 第56-58页 |
·吡虫啉间接ELISA法 | 第56-57页 |
·氟虫腈直接ELISA法 | 第57-58页 |
·酶联免疫分析方法条件的优化 | 第58-59页 |
·固相包被条件的选择 | 第58页 |
·影响酶联免疫分析的因素 | 第58-59页 |
·样本添加回收率试验及方法的验证 | 第59-60页 |
·吡虫啉的方法的验证 | 第59-60页 |
·氟虫腈方法的验证 | 第60页 |
3 结果与讨论 | 第60-73页 |
·抗血清效价的测定 | 第60-62页 |
·酶标物的制备试验 | 第62-63页 |
·酶标抗体效价测定 | 第62-63页 |
·酶标半抗原的制备试验 | 第63页 |
·酶标抗体的稳定性试验 | 第63页 |
·酶联免疫分析方法条件的优化 | 第63-68页 |
·抗原抗体最适工作浓度的选择 | 第63-64页 |
·包被原与抗体的包被条件 | 第64-66页 |
·固相包被条件的选择 | 第66页 |
·不同pH值的影响 | 第66-67页 |
·不同离子强度的影响 | 第67页 |
·有机溶剂对抗原抗体结合反应的影响 | 第67-68页 |
·ELISA法标准曲线 | 第68-70页 |
·抗体的特异性 | 第70-71页 |
·抗IM-BSA抗体特异性 | 第70-71页 |
·抗FH1-BSA抗体的特异性 | 第71页 |
·样本添加回收率试验及方法的验证 | 第71-73页 |
·土壤和水样本添加回收率 | 第71-72页 |
·样本基质对ELISA方法的影响 | 第72-73页 |
第四章 结论 | 第73-76页 |
参考文献 | 第76-84页 |
附录Ⅰ 常用试剂及缓冲溶液的配制 | 第84页 |