白内障疾病模型小鼠胚胎干细胞建系研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-22页 |
| 1 白内障疾病概述 | 第15-16页 |
| ·先天性白内障 | 第15-16页 |
| ·遗传性白内障动物模型 | 第16页 |
| 2 胚胎干细胞概述 | 第16-21页 |
| ·胚胎干细胞的定义及特性 | 第16-17页 |
| ·胚胎干细胞自我更新机制 | 第17-20页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的培养体系 | 第20-21页 |
| 3 本课题研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 白内障小鼠囊胚的获得及培养 | 第22-26页 |
| ·材料与主要试剂、仪器设备 | 第22-23页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-24页 |
| ·白内障小鼠超数排卵 | 第23-24页 |
| ·白内障小鼠囊胚的采集 | 第24页 |
| ·胚胎培养 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 白内障小鼠胚胎干细胞的获得及培养 | 第26-35页 |
| ·主要试剂及仪器设备 | 第26-28页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-32页 |
| ·129 小鼠滋养层细胞制备 | 第28-30页 |
| ·白内障小鼠胚胎干细胞获得 | 第30-31页 |
| ·白内障小鼠胚胎干细胞的培养 | 第31页 |
| ·白内障小鼠胚胎干细胞的冻存 | 第31页 |
| ·白内障小鼠胚胎干细胞的复苏 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-33页 |
| ·饲养层细胞 | 第32页 |
| ·白内障小鼠胚胎干细胞 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 白内障小鼠胚胎干细胞的鉴定 | 第35-59页 |
| ·主要试剂及仪器设备 | 第35-38页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·仪器设备 | 第35-36页 |
| ·主要试剂配制 | 第36-38页 |
| ·方法 | 第38-51页 |
| ·生长曲线测定 | 第38-39页 |
| ·核型鉴定 | 第39页 |
| ·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第39-40页 |
| ·多潜能因子表达检测 | 第40-44页 |
| ·体外分化能力观察 | 第44-46页 |
| ·体内分化能力观察 | 第46-47页 |
| ·嵌合能力的测定 | 第47-51页 |
| ·结果 | 第51-58页 |
| ·BALB/cCat/CatES 生长曲线 | 第51页 |
| ·BALB/cCat/CatES 核型 | 第51-52页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第52页 |
| ·免疫荧光检测 | 第52-53页 |
| ·Western Blot | 第53页 |
| ·反转录 PCR 检测 | 第53-54页 |
| ·Real-Time qPCR 检测 | 第54-55页 |
| ·拟胚体实验 | 第55-56页 |
| ·畸胎瘤实验 | 第56-57页 |
| ·嵌合体实验 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65页 |