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乙酰胆碱酯酶抑制法快速检测蔬菜农药残留技术的研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
英文缩略词表第11-12页
1 引言第12-16页
 1.1 我国蔬菜农药残留污染现状第12-13页
 1.2 蔬菜中农药残留酶抑制速测技术研究现状第13-15页
  1.2.1 乙酰胆碱酯酶抑制法检测的原理第13-14页
  1.2.2 乙酰胆碱酯酶抑制法研究现状第14-15页
 1.3 研究目的第15-16页
2 材料与方法第16-27页
 2.1 试虫及材料:第16-18页
  2.1.1 供试药剂:第16-17页
  2.1.2 主要化学试剂第17页
  2.1.3 试验用主要仪器第17-18页
  2.1.4 试虫及饲养第18页
   2.1.4.1 敏感种群(S种群)第18页
   2.1.4.2 抗性种群(R种群)第18页
 2.2 毒力测定方法第18页
 2.3 乙酰胆碱酯酶(AChE)活性测定第18-19页
  2.3.1 试剂的配制第18-19页
  2.3.2 标准曲线的制备第19页
  2.3.3 酶源制备第19页
  2.3.4 AChE比活力测定第19页
  2.3.5 结果计算第19页
 2.4 酶源蛋白质含量测定第19-20页
  2.4.1 试剂配制第20页
  2.4.2 标准曲线的制备第20页
  2.4.3 酶源的制备第20页
  2.4.4 酶源蛋白质含量的测定第20页
 2.5 杀虫剂对AChE抑制中浓度(I_50)的测定第20-21页
  2.5.1 试剂配制第20页
  2.5.2 酶源的制备第20页
  2.5.3 测定步骤第20-21页
  2.5.4 结果计算第21页
 2.6 AChE抑制法测定蔬菜中农药残留第21-25页
  2.6.1 AChE抑制法对几种农药灵敏度的际准曲线的制备第21-22页
   2.6.1.1 试剂配制第21页
   2.6.1.2 酶源的制备第21页
   2.6.1.3 测定步骤第21-22页
   2.6.1.4 标准曲线的绘制第22页
  2.6.2 AChE灵敏度和最小检出浓度的测定第22页
  2.6.3 AChE抑制法对几种农药回收率的测定第22-23页
   2.6.3.1 蔬菜样本提取液的制备第22页
   2.6.3.2 测定步骤第22-23页
   2.6.3.3 结果计算第23页
  2.6.4 AChE抑制法监测农药在甘蓝上的消解动态第23-24页
   2.6.4.1 田间施药后的残留动态l第23页
   2.6.4.2 蔬菜样本提取液的制备第23-24页
   2.6.4.3 测定步骤第24页
   2.6.4.4 结果计算第24页
  2.6.5 AChE抑制法检测蔬菜样品中农药残留流程图第24-25页
 2.7 用色谱法验证AChE抑制法测定蔬菜农药残留的准确性第25-27页
  2.7.1 样本的提取第25页
  2.7.2 样品的净化第25页
  2.7.1 甲基对硫磷的气相色谱法检测条件第25页
  2.7.2 水胺硫磷的气相色谱法检测条件第25-26页
  2.7.3 氧乐果的气相色谱法检测条件第26页
  2.7.4 灭多威的气相色谱法检测条件第26-27页
3 结果与分析第27-51页
 3.1 家蝇敏感种群与抗性种群对有机磷和氨基甲酸酯类药剂的敏感度比较第27-31页
  3.1.1 两种代表药剂对家蝇敏感种群的毒力测定第27页
  3.1.2 两种代表药剂对家蝇抗性种群的毒力测定第27-28页
  3.1.3 家蝇敏感种群与抗性种群对两种代表药剂的敏感度比较第28页
  3.1.4 敌敌畏、丁硫克百威对家蝇不同种群AChE的抑制中浓度第28-29页
  3.1.5 家蝇的蛋白质标准曲线第29-30页
  3.1.6 家蝇敏感种群和抗性种群蛋白质含量的测定第30页
  3.1.7 家蝇AChE标准曲线第30页
  3.1.8 家蝇敏感种群和抗性种群AChE活性测定结果第30-31页
 3.2 从家蝇体内制备AChE的条件优选第31-37页
  3.2.1 家蝇成虫AChE的体躯分布第31-32页
  3.2.2 家蝇不同虫态AChE的活性比较第32-33页
  3.2.3 家蝇羽化后不同天数其头部AchE的比活力及酶源蛋白质含量的变化第33-35页
  3.2.4 家蝇羽化后不同天数其头部AChE对DDVP的敏感度变化第35-36页
  3.2.5 缓冲液pH值对AChE比活力的影响第36-37页
 3.3 AChE抑制法测定农药残留探索第37-44页
  3.3.1 蔬菜病虫害防治违规用药事例调查第37页
  3.3.2 AChE抑制法对几种农药灵敏度的曲线方程及相关系数第37-39页
  3.3.3 AChE抑制法测定几种农药的灵敏度第39-40页
  3.3.4 AChE抑制法检测几种农药的回收率第40-41页
  3.3.5部分 有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的允许残留量第41-42页
  3.3.6 AChE抑制法监测几种农药在甘蓝上的消解情况第42-44页
 3.4 AChE抑制法测定蔬菜农药残留的色谱法验证第44-51页
  3.4.1 甲基对硫磷第44-46页
   3.4.1.1 甲基对硫磷标准曲线的绘制第44-45页
   3.4.1.2 方法的准确度和精密度第45-46页
  3.4.2 水胺硫磷第46-47页
   3.4.2.1 水胺硫磷标准曲线的绘制第46-47页
   3.4.2.2 方法的准确度和精密度第47页
  3.4.3 氧乐果第47-48页
   3.4.3.1 氧乐果标准曲线的绘制第47-48页
   3.4.3.2 方法的准确度和精密度第48页
  3.4.4 灭多威第48-50页
   3.4.4.1 灭多威标准曲线的绘制第48-49页
   3.4.4.2 方法的准确度和精密度第49-50页
  3.4.5 AChE抑制法测定农药残留与经典方法(色谱法)的比较第50-51页
4 讨论第51-54页
 4.1 用敏感家蝇制备酶源检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的可能性第51页
 4.2 利用家蝇制备残留检测用的AChE的条件选择第51-53页
  4.2.1 体躯部位选择第51-52页
  4.2.2 成虫发育阶段选择第52页
  4.2.3 缓冲液pH值选择第52页
  4.2.4 酶源固化与应用第52-53页
 4.3 AChE抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留存在的局限性第53页
 4.4 利用AChE抑制法测定蔬菜农药残留的影响因子第53页
 4.5 AChE测定蔬菜农药残留的色谱法验证第53-54页
5 结论第54-57页
6 参考文献第57-66页
7 附录第66-68页
8 致谢第68-69页
9 攻读学位期间发表论文情况第69页

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