中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
1 引言 | 第12-16页 |
1.1 我国蔬菜农药残留污染现状 | 第12-13页 |
1.2 蔬菜中农药残留酶抑制速测技术研究现状 | 第13-15页 |
1.2.1 乙酰胆碱酯酶抑制法检测的原理 | 第13-14页 |
1.2.2 乙酰胆碱酯酶抑制法研究现状 | 第14-15页 |
1.3 研究目的 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-27页 |
2.1 试虫及材料: | 第16-18页 |
2.1.1 供试药剂: | 第16-17页 |
2.1.2 主要化学试剂 | 第17页 |
2.1.3 试验用主要仪器 | 第17-18页 |
2.1.4 试虫及饲养 | 第18页 |
2.1.4.1 敏感种群(S种群) | 第18页 |
2.1.4.2 抗性种群(R种群) | 第18页 |
2.2 毒力测定方法 | 第18页 |
2.3 乙酰胆碱酯酶(AChE)活性测定 | 第18-19页 |
2.3.1 试剂的配制 | 第18-19页 |
2.3.2 标准曲线的制备 | 第19页 |
2.3.3 酶源制备 | 第19页 |
2.3.4 AChE比活力测定 | 第19页 |
2.3.5 结果计算 | 第19页 |
2.4 酶源蛋白质含量测定 | 第19-20页 |
2.4.1 试剂配制 | 第20页 |
2.4.2 标准曲线的制备 | 第20页 |
2.4.3 酶源的制备 | 第20页 |
2.4.4 酶源蛋白质含量的测定 | 第20页 |
2.5 杀虫剂对AChE抑制中浓度(I_50)的测定 | 第20-21页 |
2.5.1 试剂配制 | 第20页 |
2.5.2 酶源的制备 | 第20页 |
2.5.3 测定步骤 | 第20-21页 |
2.5.4 结果计算 | 第21页 |
2.6 AChE抑制法测定蔬菜中农药残留 | 第21-25页 |
2.6.1 AChE抑制法对几种农药灵敏度的际准曲线的制备 | 第21-22页 |
2.6.1.1 试剂配制 | 第21页 |
2.6.1.2 酶源的制备 | 第21页 |
2.6.1.3 测定步骤 | 第21-22页 |
2.6.1.4 标准曲线的绘制 | 第22页 |
2.6.2 AChE灵敏度和最小检出浓度的测定 | 第22页 |
2.6.3 AChE抑制法对几种农药回收率的测定 | 第22-23页 |
2.6.3.1 蔬菜样本提取液的制备 | 第22页 |
2.6.3.2 测定步骤 | 第22-23页 |
2.6.3.3 结果计算 | 第23页 |
2.6.4 AChE抑制法监测农药在甘蓝上的消解动态 | 第23-24页 |
2.6.4.1 田间施药后的残留动态l | 第23页 |
2.6.4.2 蔬菜样本提取液的制备 | 第23-24页 |
2.6.4.3 测定步骤 | 第24页 |
2.6.4.4 结果计算 | 第24页 |
2.6.5 AChE抑制法检测蔬菜样品中农药残留流程图 | 第24-25页 |
2.7 用色谱法验证AChE抑制法测定蔬菜农药残留的准确性 | 第25-27页 |
2.7.1 样本的提取 | 第25页 |
2.7.2 样品的净化 | 第25页 |
2.7.1 甲基对硫磷的气相色谱法检测条件 | 第25页 |
2.7.2 水胺硫磷的气相色谱法检测条件 | 第25-26页 |
2.7.3 氧乐果的气相色谱法检测条件 | 第26页 |
2.7.4 灭多威的气相色谱法检测条件 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-51页 |
3.1 家蝇敏感种群与抗性种群对有机磷和氨基甲酸酯类药剂的敏感度比较 | 第27-31页 |
3.1.1 两种代表药剂对家蝇敏感种群的毒力测定 | 第27页 |
3.1.2 两种代表药剂对家蝇抗性种群的毒力测定 | 第27-28页 |
3.1.3 家蝇敏感种群与抗性种群对两种代表药剂的敏感度比较 | 第28页 |
3.1.4 敌敌畏、丁硫克百威对家蝇不同种群AChE的抑制中浓度 | 第28-29页 |
3.1.5 家蝇的蛋白质标准曲线 | 第29-30页 |
3.1.6 家蝇敏感种群和抗性种群蛋白质含量的测定 | 第30页 |
3.1.7 家蝇AChE标准曲线 | 第30页 |
3.1.8 家蝇敏感种群和抗性种群AChE活性测定结果 | 第30-31页 |
3.2 从家蝇体内制备AChE的条件优选 | 第31-37页 |
3.2.1 家蝇成虫AChE的体躯分布 | 第31-32页 |
3.2.2 家蝇不同虫态AChE的活性比较 | 第32-33页 |
3.2.3 家蝇羽化后不同天数其头部AchE的比活力及酶源蛋白质含量的变化 | 第33-35页 |
3.2.4 家蝇羽化后不同天数其头部AChE对DDVP的敏感度变化 | 第35-36页 |
3.2.5 缓冲液pH值对AChE比活力的影响 | 第36-37页 |
3.3 AChE抑制法测定农药残留探索 | 第37-44页 |
3.3.1 蔬菜病虫害防治违规用药事例调查 | 第37页 |
3.3.2 AChE抑制法对几种农药灵敏度的曲线方程及相关系数 | 第37-39页 |
3.3.3 AChE抑制法测定几种农药的灵敏度 | 第39-40页 |
3.3.4 AChE抑制法检测几种农药的回收率 | 第40-41页 |
3.3.5部分 有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的允许残留量 | 第41-42页 |
3.3.6 AChE抑制法监测几种农药在甘蓝上的消解情况 | 第42-44页 |
3.4 AChE抑制法测定蔬菜农药残留的色谱法验证 | 第44-51页 |
3.4.1 甲基对硫磷 | 第44-46页 |
3.4.1.1 甲基对硫磷标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
3.4.1.2 方法的准确度和精密度 | 第45-46页 |
3.4.2 水胺硫磷 | 第46-47页 |
3.4.2.1 水胺硫磷标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
3.4.2.2 方法的准确度和精密度 | 第47页 |
3.4.3 氧乐果 | 第47-48页 |
3.4.3.1 氧乐果标准曲线的绘制 | 第47-48页 |
3.4.3.2 方法的准确度和精密度 | 第48页 |
3.4.4 灭多威 | 第48-50页 |
3.4.4.1 灭多威标准曲线的绘制 | 第48-49页 |
3.4.4.2 方法的准确度和精密度 | 第49-50页 |
3.4.5 AChE抑制法测定农药残留与经典方法(色谱法)的比较 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
4.1 用敏感家蝇制备酶源检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的可能性 | 第51页 |
4.2 利用家蝇制备残留检测用的AChE的条件选择 | 第51-53页 |
4.2.1 体躯部位选择 | 第51-52页 |
4.2.2 成虫发育阶段选择 | 第52页 |
4.2.3 缓冲液pH值选择 | 第52页 |
4.2.4 酶源固化与应用 | 第52-53页 |
4.3 AChE抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留存在的局限性 | 第53页 |
4.4 利用AChE抑制法测定蔬菜农药残留的影响因子 | 第53页 |
4.5 AChE测定蔬菜农药残留的色谱法验证 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-57页 |
6 参考文献 | 第57-66页 |
7 附录 | 第66-68页 |
8 致谢 | 第68-69页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |