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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)内蒙株的建立及致瘤机理的研究

文献综述第1-25页
 1 病原学第11-18页
  1.1 ALV-J病毒结构及特性第11-12页
  1.2 ALV-J的基因组第12-13页
  1.3 ALV-J蛋白及其抗原性第13-14页
  1.4 ALV-J抗原变动第14页
  1.5 ALV-J的组织嗜性第14-15页
  1.6 ALV-J急性转化型病毒第15-17页
  1.7 ev/J内源性病毒第17-18页
 2 流行病学第18-20页
  2.1 ALV-J的宿主范围第18-19页
  2.2 ALV-J的传播第19-20页
 3 病理学第20-21页
  3.1 眼观病变第20页
  3.2 病理组织学变化第20-21页
 4 诊断第21-22页
 5 防制第22-23页
 6 今后的工作第23-25页
实验研究第25-98页
 第一部分 :禽骨髓细胞瘤病的病理学研究第25-34页
  中文摘要第25-27页
  引言第27页
  1 材料和方法第27-28页
   1.1 病历史第27-28页
   1.2 被检鸡第28页
   1.3 病理学观察第28页
   1.4 血清学检验第28页
   1.5 病毒学检测第28页
  2 结果第28-31页
   2.1 ML症状明显病例观察结果第28-30页
   2.2 ALV-J抗体阳性病例观察结果第30页
   2.3 ALV-J抗体阴性鸡(正常对照)观察结果第30-31页
   2.4 ELISA和PCR结果第31页
  3 讨论第31-34页
 第一部分 附图第34-39页
 第二部分 :禽白血病病毒J亚群内蒙株的建立及其分子生物学特性的研究第39-74页
  摘要第39-43页
  引言第43-44页
  1 材料和方法第44-53页
   1.1 应用ELISA方法调查ALV-J感染第44-46页
    1.1.1 被检血清第44页
    1.1.2 ALV-JELISA抗体检测试剂盒第44-45页
    1.1.3 常规药品及器材第45页
    1.1.4 样品制备第45页
    1.1.5 TMB底物稀释液的制备第45页
    1.1.6 冲洗液的制备第45页
    1.1.7 酶联免疫吸附试验(ELISA)第45页
    1.1.8 结果计算第45-46页
   1.2 ALV-J内蒙株病毒的细胞培养及PCR扩增第46-48页
    1.2.1 细胞第46页
    1.2.2 病毒样品第46页
    1.2.3 病毒的细胞培养第46页
    1.2.4 电镜观察第46-47页
    1.2.5 ELISA检测第47页
    1.2.6 PCR检测组织样品第47页
    1.2.7 ALV-Jgp85基因引物设计与合成第47页
    1.2.8 模板DNA的制备第47-48页
    1.2.9 PCR第48页
   1.3 ALV-J内蒙株NM8761分子生物学特性的研究--gp85基因的分子克隆及序列测定第48-51页
    1.3.1 PCR产物纯化第48-49页
    1.3.2 载体与宿主菌第49页
    1.3.3 酶切第49页
    1.3.4 连接反应第49-50页
    1.3.5 连接产物转化DH5α大肠杆菌第50页
    1.3.6 质粒DNA的制备第50-51页
    1.3.7 质粒DNA的鉴定第51页
    1.3.8 重组质粒gp85基因测序第51页
   1.4 ALV-J内蒙株的人工致病研究第51-53页
    1.4.1 实验设计第51-52页
    1.4.2 病毒第52页
    1.4.3 实验鸡第52页
    1.4.4 ELISA检测第52页
    1.4.5 PCR反应第52-53页
    1.4.6 病理学观察第53页
  2 结果第53-65页
   2.1 应用ELISA方法调查ALV-J感染结果第53页
   2.2 ALV-J内蒙株病毒的细胞培养及PCR扩增结果第53-55页
    2.2.1 电镜观察结果第53页
    2.2.2 ELISA检测结果第53-54页
    2.2.3 PCR检测结果第54-55页
   2.3 ALV-J内蒙株NM8761gp85基因的分子克隆及序列测定结果第55-57页
    2.3.1 重组质粒鉴定结果第55-56页
    2.3.2 gp85基因序列测定结果第56-57页
    2.3.3 gp85蛋白预期氨基酸序列比较结果第57页
   2.4 ALV-J内蒙株的人工致病研究结果第57-65页
    2.4.1 固定采血鸡只的ELISA检测结果第57-61页
    2.4.2 剖检鸡只ELISA检测结果第61页
    2.4.3 剖检鸡只肝脏PCR检测结果第61-63页
    2.4.4 临床观察及病理学变化第63-65页
    2.4.5 各组剖检鸡抗体阳性率、病毒阳性率和发病率比较第65页
  3 讨论第65-74页
   3.1 应用ELISA方法调查ALV-J感染第65-66页
   3.2 ALV-J内蒙株病毒的细胞培养及PCR扩增第66-67页
   3.3 ALV-J内蒙株NM8761gp85基因的分子克隆及序列测定第67-68页
   3.4 ALV-J内蒙株的人工致病研究第68-72页
   3.5 小结第72-74页
 第二部分 附图第74-77页
 第三部分 :禽白血病病毒J亚群致瘤机理的研究--原位杂交检测病毒组织嗜性和基因表达定位以及应用免疫组化进行抗原定位第77-89页
  摘要第77-79页
  引言第79页
  1 材料和方法第79-83页
   1.1 原位杂交第79-82页
    1.1.1 实验分组第79页
    1.1.2 组织第79-80页
    1.1.3 地高辛(DIG)标记及检测试剂盒第80页
    1.1.4 PCR产物纯化试剂盒第80页
    1.1.5 DIG标记DNA探针的制备第80-81页
    1.1.6 杂交第81-82页
   1.2 免疫组化第82-83页
    1.2.1 ALV-J单克隆抗体等第82页
    1.2.2 载玻片的预处理第82页
    1.2.3 组织及切片第82页
    1.2.4 免疫组化操作步骤第82-83页
  2 结果第83-86页
   2.1 探针的灵敏度及浓度第83页
   2.2 原位杂交检测结果第83-85页
   2.3 免疫组化检测结果第85-86页
  3 讨论第86-89页
 第三部分 附图第89-95页
 第四部分 :总结及本课题取得的主要成果第95-98页
致谢第98-99页
参考文献第99-111页
作者简介第111-112页

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