文献综述 | 第1-25页 |
1 病原学 | 第11-18页 |
1.1 ALV-J病毒结构及特性 | 第11-12页 |
1.2 ALV-J的基因组 | 第12-13页 |
1.3 ALV-J蛋白及其抗原性 | 第13-14页 |
1.4 ALV-J抗原变动 | 第14页 |
1.5 ALV-J的组织嗜性 | 第14-15页 |
1.6 ALV-J急性转化型病毒 | 第15-17页 |
1.7 ev/J内源性病毒 | 第17-18页 |
2 流行病学 | 第18-20页 |
2.1 ALV-J的宿主范围 | 第18-19页 |
2.2 ALV-J的传播 | 第19-20页 |
3 病理学 | 第20-21页 |
3.1 眼观病变 | 第20页 |
3.2 病理组织学变化 | 第20-21页 |
4 诊断 | 第21-22页 |
5 防制 | 第22-23页 |
6 今后的工作 | 第23-25页 |
实验研究 | 第25-98页 |
第一部分 :禽骨髓细胞瘤病的病理学研究 | 第25-34页 |
中文摘要 | 第25-27页 |
引言 | 第27页 |
1 材料和方法 | 第27-28页 |
1.1 病历史 | 第27-28页 |
1.2 被检鸡 | 第28页 |
1.3 病理学观察 | 第28页 |
1.4 血清学检验 | 第28页 |
1.5 病毒学检测 | 第28页 |
2 结果 | 第28-31页 |
2.1 ML症状明显病例观察结果 | 第28-30页 |
2.2 ALV-J抗体阳性病例观察结果 | 第30页 |
2.3 ALV-J抗体阴性鸡(正常对照)观察结果 | 第30-31页 |
2.4 ELISA和PCR结果 | 第31页 |
3 讨论 | 第31-34页 |
第一部分 附图 | 第34-39页 |
第二部分 :禽白血病病毒J亚群内蒙株的建立及其分子生物学特性的研究 | 第39-74页 |
摘要 | 第39-43页 |
引言 | 第43-44页 |
1 材料和方法 | 第44-53页 |
1.1 应用ELISA方法调查ALV-J感染 | 第44-46页 |
1.1.1 被检血清 | 第44页 |
1.1.2 ALV-JELISA抗体检测试剂盒 | 第44-45页 |
1.1.3 常规药品及器材 | 第45页 |
1.1.4 样品制备 | 第45页 |
1.1.5 TMB底物稀释液的制备 | 第45页 |
1.1.6 冲洗液的制备 | 第45页 |
1.1.7 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第45页 |
1.1.8 结果计算 | 第45-46页 |
1.2 ALV-J内蒙株病毒的细胞培养及PCR扩增 | 第46-48页 |
1.2.1 细胞 | 第46页 |
1.2.2 病毒样品 | 第46页 |
1.2.3 病毒的细胞培养 | 第46页 |
1.2.4 电镜观察 | 第46-47页 |
1.2.5 ELISA检测 | 第47页 |
1.2.6 PCR检测组织样品 | 第47页 |
1.2.7 ALV-Jgp85基因引物设计与合成 | 第47页 |
1.2.8 模板DNA的制备 | 第47-48页 |
1.2.9 PCR | 第48页 |
1.3 ALV-J内蒙株NM8761分子生物学特性的研究--gp85基因的分子克隆及序列测定 | 第48-51页 |
1.3.1 PCR产物纯化 | 第48-49页 |
1.3.2 载体与宿主菌 | 第49页 |
1.3.3 酶切 | 第49页 |
1.3.4 连接反应 | 第49-50页 |
1.3.5 连接产物转化DH5α大肠杆菌 | 第50页 |
1.3.6 质粒DNA的制备 | 第50-51页 |
1.3.7 质粒DNA的鉴定 | 第51页 |
1.3.8 重组质粒gp85基因测序 | 第51页 |
1.4 ALV-J内蒙株的人工致病研究 | 第51-53页 |
1.4.1 实验设计 | 第51-52页 |
1.4.2 病毒 | 第52页 |
1.4.3 实验鸡 | 第52页 |
1.4.4 ELISA检测 | 第52页 |
1.4.5 PCR反应 | 第52-53页 |
1.4.6 病理学观察 | 第53页 |
2 结果 | 第53-65页 |
2.1 应用ELISA方法调查ALV-J感染结果 | 第53页 |
2.2 ALV-J内蒙株病毒的细胞培养及PCR扩增结果 | 第53-55页 |
2.2.1 电镜观察结果 | 第53页 |
2.2.2 ELISA检测结果 | 第53-54页 |
2.2.3 PCR检测结果 | 第54-55页 |
2.3 ALV-J内蒙株NM8761gp85基因的分子克隆及序列测定结果 | 第55-57页 |
2.3.1 重组质粒鉴定结果 | 第55-56页 |
2.3.2 gp85基因序列测定结果 | 第56-57页 |
2.3.3 gp85蛋白预期氨基酸序列比较结果 | 第57页 |
2.4 ALV-J内蒙株的人工致病研究结果 | 第57-65页 |
2.4.1 固定采血鸡只的ELISA检测结果 | 第57-61页 |
2.4.2 剖检鸡只ELISA检测结果 | 第61页 |
2.4.3 剖检鸡只肝脏PCR检测结果 | 第61-63页 |
2.4.4 临床观察及病理学变化 | 第63-65页 |
2.4.5 各组剖检鸡抗体阳性率、病毒阳性率和发病率比较 | 第65页 |
3 讨论 | 第65-74页 |
3.1 应用ELISA方法调查ALV-J感染 | 第65-66页 |
3.2 ALV-J内蒙株病毒的细胞培养及PCR扩增 | 第66-67页 |
3.3 ALV-J内蒙株NM8761gp85基因的分子克隆及序列测定 | 第67-68页 |
3.4 ALV-J内蒙株的人工致病研究 | 第68-72页 |
3.5 小结 | 第72-74页 |
第二部分 附图 | 第74-77页 |
第三部分 :禽白血病病毒J亚群致瘤机理的研究--原位杂交检测病毒组织嗜性和基因表达定位以及应用免疫组化进行抗原定位 | 第77-89页 |
摘要 | 第77-79页 |
引言 | 第79页 |
1 材料和方法 | 第79-83页 |
1.1 原位杂交 | 第79-82页 |
1.1.1 实验分组 | 第79页 |
1.1.2 组织 | 第79-80页 |
1.1.3 地高辛(DIG)标记及检测试剂盒 | 第80页 |
1.1.4 PCR产物纯化试剂盒 | 第80页 |
1.1.5 DIG标记DNA探针的制备 | 第80-81页 |
1.1.6 杂交 | 第81-82页 |
1.2 免疫组化 | 第82-83页 |
1.2.1 ALV-J单克隆抗体等 | 第82页 |
1.2.2 载玻片的预处理 | 第82页 |
1.2.3 组织及切片 | 第82页 |
1.2.4 免疫组化操作步骤 | 第82-83页 |
2 结果 | 第83-86页 |
2.1 探针的灵敏度及浓度 | 第83页 |
2.2 原位杂交检测结果 | 第83-85页 |
2.3 免疫组化检测结果 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-89页 |
第三部分 附图 | 第89-95页 |
第四部分 :总结及本课题取得的主要成果 | 第95-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-111页 |
作者简介 | 第111-112页 |