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逆转录病毒的逆转录过程--DNA多聚酶和核酸酶H的作用关系

ABSTRACT第1-6页
DEDICATION第6-7页
ACKNOWLEDGMENTS第7-8页
TABL OF CONTENTS第8-12页
LIST OF TABLES第12-13页
LIST OF ILLUSTRATIONS第13-15页
CHAPTER 1: GENERAL INTRODUCTION第15-30页
 1,1. Replication of retroviruses第16-17页
 1,2. Discovery of reverse transcriptase (RT)第17-18页
 1,3. Processing of reverse transcription第18-20页
 1,4. The structure and function of RT第20-23页
  Avian sarcoma leukosis virus第20-21页
  Murine leukemia virus第21-22页
  Human immunodeficiency virus type-1第22-23页
 1,5. Inhibition of HIV-1 RT第23-24页
 1,6. Research objectives第24-30页
CHAPTER 2: COORDINATION OF DNA POLYMERASE AND RIBONUCLEASE H第30-64页
 2,1. Introduction第30-31页
 2,2. Materials and Methods第31-42页
  Enzymes第31-32页
  Plasmids第32页
  Preparation of templates第32-34页
  Oligonucleotides第34-37页
  5'-labeling of RNA and oligonucleotides:第37页
  Reverse transcription and RNase H digestion第37-38页
  RNA sequencing第38-39页
  Gel electrophoresis第39-42页
 2,3. Results第42-64页
  2,3,1. Stability of the 5'-terminal RNA fragment第42-46页
  2,3,2. The variables affected RT, especially RNase H cleavage第46-59页
  2,3,3. The residual RNA fragment remains in association with the DNA product第59-64页
CHAPTER 3: RNA PRIMING FOR THE SECOND STRAND DNA SYNTHESIS第64-81页
 3,1. Introduction第64-69页
 3,2. Materials and Methods第69-71页
  Template and oligonucleotides第69页
  Reverse transcription第69页
  Restriction enzyme digestion第69页
  Primer extension第69-70页
  Dideoxynucleotide sequencing第70页
  Gel electrophoresis第70-71页
 3,3. Results第71-81页
  3,3,1. Evidence of the second strand DNA synthesis第71-77页
  3,3,2. Initiation of the second strand DNA synthesis第77-81页
CHAPTER 4: STRUCTURE AND FUNCTION OF HIV-1 RT第81-96页
 4,1. Introduction第81-83页
 4,2. Materials and Methods第83-88页
  Expression of clone for HIV-1 RT第83页
  Constructs of various forms of HIV-1 RT第83-84页
  Templates and oligonucleotides第84页
  Primer extension第84-85页
  Activity gel electrophoresis第85-88页
 4,3. Results第88-96页
  4,3,1. p51 subunits alone is also enable to copy both RNA and DNA templates第88-89页
  4,3,2. Within a heterodimer, p51 could be active while p66 is inactive第89-96页
CHAPTER 5: Tetrahydroimidazo Benzodiazepin-One and-Thione, A SPECIAL INHIBITOR OF HIV-1 RT第96-107页
 5,1. Introduction第96-99页
 5,2. Materials and Methods第99-100页
  Templates and oligonucleotides第99页
  TIBO derivative第99页
  Actinomycin-D第99页
  Reverse transcription reaction第99-100页
 5,3. Results第100-107页
  5,3,1. TIBO only inhibited the RNA-directed DNA synthesis on wild-type of HIV-1 RT第100-103页
  5,3,2. p51 is sensitive to TIBO on both templates第103-107页
CHAPTER 6: DISCUSSION第107-113页
BIBLIOGRAPHY第113-122页

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