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好氧反硝化细菌应用研究及nosZ基因克隆表达

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 前言第10-21页
   ·生物脱氮研究进展第10-17页
     ·细菌好氧反硝化作用机制第10-15页
     ·真菌反硝化作用机制第15-16页
     ·生物脱氮技术新进展第16-17页
   ·固定化微生物技术第17-21页
     ·固定化的概念第17页
     ·常用的固定化微生物载体第17-18页
     ·固定化细胞的制备方法第18-19页
     ·固定化细胞的应用第19-20页
     ·固定化细胞的展望第20-21页
第二章 好氧反硝化细菌分离鉴定及在废水处理中的应用第21-34页
   ·实验材料第21-22页
     ·菌种第21页
     ·培养基第21页
     ·包埋剂及溶液第21-22页
   ·实验方法第22-24页
     ·好氧反硝化细菌的筛选分离第22页
     ·好氧反硝化能力的检测第22页
     ·细菌基因组DNA的提取第22-23页
     ·16SrDNA基因的PCR扩增第23页
     ·16SrDNA的全序列测定和分析第23页
     ·形态结构观察及生理生化性质的测定第23页
     ·包埋小球的制作第23-24页
     ·低温下包埋及未包埋反硝化菌脱氮效果的比较试验第24页
     ·固定化小球处理含酚废水试验第24页
   ·结果及分析第24-32页
     ·好氧反硝化细菌的筛选分离和反硝化能力的研究第24-25页
     ·细菌降解含氮废水能力的研究第25-27页
     ·四株好氧反硝化细菌的鉴定第27-32页
     ·固定化小球废水脱氮结果第32页
   ·小结第32-33页
   ·讨论第33-34页
第三章 一氧化二氮还原酶nosZ基因的克隆表达第34-43页
   ·实验材料第34-35页
     ·菌株和质粒第34页
     ·化学试剂及抗菌素第34页
     ·常用贮存液第34页
     ·常用缓冲液第34-35页
     ·限制性内切酶及其它工具酶第35页
   ·实验方法第35-38页
     ·目的基因的克隆以及重组表达质粒的构建策略(图3-1)第35页
     ·细菌基因组DNA的提取(参照2.2.3)第35页
     ·一氧化二氮还原酶nosZ基因的扩增第35-36页
     ·PCR产物回收和限制性内切酶消化后DNA片段的回收第36页
     ·质粒DNA的提取第36页
     ·DNA限制性内切酶消化第36页
     ·DNA片段的连接第36-37页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第37页
     ·蛋白质原核表达第37页
     ·表达产物的SDS-PAGE分析第37-38页
   ·实验结果第38-41页
     ·一氧化二氮nosZ基因的获得第38页
     ·重组质粒pMD-nosZ的构建及鉴定第38-39页
     ·重组表达质粒pET-nosZ的构建及鉴定第39-40页
     ·nosZ基因在E.coli BL21中的表达与鉴定第40页
     ·nosZ基因序列的测定第40-41页
   ·小结第41-42页
   ·讨论第42-43页
参考文献第43-49页
硕士期间发表的论文第49-50页
致谢第50页

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