| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种概述 | 第10-11页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种简介 | 第10页 |
| ·Xcc基因组研究概况 | 第10-11页 |
| ·植物病原细菌的Ⅲ型分泌系统与hrp基因 | 第11-13页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第11-12页 |
| ·hrp基因簇的组成及功能 | 第12-13页 |
| ·植物病原细菌Ⅲ型分泌系统调控机制的研究进展 | 第13-18页 |
| ·第Ⅰ类hrp基因簇的调控系统 | 第13-16页 |
| ·第Ⅱ类hrp基因簇的调控系统 | 第16-18页 |
| ·本课题研究的目的、内容和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| ·材料 | 第20-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第20-21页 |
| ·生化试剂与寄主材料 | 第21页 |
| ·抗生素和其它药剂 | 第21页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第21-22页 |
| ·本研究所用的引物 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·常规试验操作方法 | 第24-28页 |
| ·菌株培养条件及保存 | 第24页 |
| ·总DNA的提取 | 第24页 |
| ·DNA的纯化和DNA的沉淀 | 第24-25页 |
| ·快速碱裂解法少量提取质粒DNA | 第25页 |
| ·PCR反应 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第26页 |
| ·DNA片段试剂盒回收 | 第26页 |
| ·DNA连接 | 第26-27页 |
| ·电脉冲感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·电脉冲转化 | 第27-28页 |
| ·三亲本接合 | 第28页 |
| ·鉴定调节基因的方法 | 第28-31页 |
| ·利用sacB报告系统筛选候选调节基因 | 第28-29页 |
| ·利用GUS报告系统鉴定调节基因 | 第29-31页 |
| ·调节基因突变体互补菌株的构建方法 | 第31-32页 |
| ·调节基因对Xcc表型影响的检测方法 | 第32-35页 |
| ·调节基因与致病性的关系检测 | 第32页 |
| ·调节基因对过敏反应的影响检测 | 第32-33页 |
| ·调节基因对致病相关生化因子的影响检测 | 第33-34页 |
| ·调节基因对游动性的影响检测 | 第34页 |
| ·调节基因对生物膜形成的影响检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| ·获得候选调节基因 | 第35-36页 |
| ·获得含sacB报告质粒的三亲接合子 | 第35页 |
| ·候选调节基因的筛选结果 | 第35-36页 |
| ·调节基因的鉴定结果 | 第36-41页 |
| ·获得含GUS报告基因的重组质粒 | 第36-37页 |
| ·获得含GUS报告质粒的三亲接合子 | 第37-38页 |
| ·确定调节基因 | 第38-41页 |
| ·构建获得调节基因突变体的互补菌株 | 第41-44页 |
| ·PCR扩增获得互补基因片段 | 第41-42页 |
| ·获得互补菌株 | 第42-44页 |
| ·调节基因对Xcc表型的影响 | 第44-49页 |
| ·调节基因与致病性的关系 | 第44-45页 |
| ·调节基因对过敏反应的影响 | 第45页 |
| ·调节基因对致病相关生化因子的影响 | 第45-48页 |
| ·调节基因对游动性的影响 | 第48页 |
| ·调节基因对生物膜形成的影响 | 第48-49页 |
| 4 结论与讨论 | 第49-53页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| ·XC3799、XC2253、XC3056、XC1734和XC2251是目的调节基因 | 第49页 |
| ·调节基因XC2253和XC3056与Xcc的致病性有关 | 第49页 |
| ·调节基因XC2253和XC3056与过敏反应基本无关 | 第49页 |
| ·调节基因XC2253和XC3056与Xcc的胞外酶及胞外多糖的分泌无关 | 第49页 |
| ·调节基因XC2253与Xcc的游动性及生物膜形成有关 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| ·关于Xcc控制hrpG和hrpX表达的调节基因 | 第50页 |
| ·关于调节基因XC2253和XC3056在Xcc致病过程中的作用 | 第50-51页 |
| ·关于调节基因XC2253和XC3056与过敏反应的关系 | 第51页 |
| ·关于调节基因的调控机制 | 第51-52页 |
| ·本研究鉴定调节基因的范围 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-67页 |
| 附录A | 第60-67页 |
| 附录B | 第67页 |
