中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第13-37页 |
第一节 脱落酸概述 | 第13-17页 |
一、脱落酸的发现 | 第13页 |
二、脱落酸的化学结构和存在形式 | 第13-14页 |
三、脱落酸的分布及生物合成 | 第14-15页 |
四、脱落酸的生物功能 | 第15-17页 |
(一)促进休眠并控制种子萌发 | 第15-16页 |
(二)促进气孔关闭 | 第16页 |
(三)促进器官脱落 | 第16页 |
(四)抑制植物生长 | 第16页 |
(五)促进果实成熟 | 第16-17页 |
(六)响应外界非生物胁迫 | 第17页 |
第二节ABA受体研究进展 | 第17-23页 |
一、FCA研究进展 | 第18页 |
二、ABAR/CHLH研究进展 | 第18-19页 |
三、GCR2研究进展 | 第19-20页 |
四、GTG1/2 研究进展 | 第20页 |
五、PYR/PYL/RCARs研究进展 | 第20-23页 |
第三节ABA信号转导通路相关调控因子研究进展 | 第23-31页 |
一、负调控因子PP2Cs(serine-threonine phosphatase 2Cs) | 第24-26页 |
二、正调控因子SnRK2(SNF1-related protein kinase 2) | 第26-29页 |
三、ABA信号相关转录因子 | 第29-31页 |
第四节ABA受体PYR/PYL/RCARs基因家族介导的ABA信号转导通路 | 第31-33页 |
第五节 水稻ABA受体PYLs基因家族相关功能研究 | 第33-35页 |
第六节 本研究的目的与意义 | 第35-37页 |
第二章 材料与方法 | 第37-59页 |
第一节 实验材料 | 第37-39页 |
一、植物材料 | 第37页 |
二、菌株与载体 | 第37-38页 |
三、实验仪器 | 第38页 |
四、实验用分子生物学试剂 | 第38-39页 |
五、实验常用抗生素的配制 | 第39页 |
第二节 实验方法 | 第39-59页 |
一、载体构建 | 第39-41页 |
(一)入门载体pENTR-OsPYLs和pENTR-OsPP2Cs的构建 | 第39-41页 |
(二)Gateway系统表达载体的构建 | 第41页 |
二、实时荧光定量PCR (Real time Quantitative PCR) | 第41-43页 |
(一) 水稻的培养 | 第41-42页 |
(二)水稻总RNA的提取 | 第42-43页 |
(三)总RNA反转录成cDNA | 第43页 |
(四)实时荧光定量PCR (Real time Quantitative PCR) | 第43页 |
三、酵母双杂交 | 第43-47页 |
(一)制备Y2H gold酵母感受态 | 第43-45页 |
(二)酵母转化 | 第45-46页 |
(三)蛋白互作鉴定 | 第46-47页 |
四、OsPYLs的亚细胞定位和双分子荧光互补实验 | 第47-49页 |
(一)OsPYLs和OsPP2Cs亚细胞定位 | 第47-48页 |
(二)双分子荧光互补 | 第48-49页 |
五、OsPYL3和OsPYL9过表达转基因水稻的获得 | 第49-55页 |
(一)目的质粒转化农杆菌 | 第49页 |
(二)水稻愈伤组织的培养 | 第49-50页 |
(三)农杆菌侵染水稻愈伤组织 | 第50-51页 |
(四)被侵染水稻愈伤组织的恢复培养 | 第51-52页 |
(五)被侵染水稻愈伤组织的筛选培养 | 第52页 |
(六)抗性水稻愈伤组织的分化培养 | 第52-53页 |
(七)转基因苗的鉴定 | 第53-55页 |
六、过表达转基因水稻萌发阶段对ABA的敏感性实验 | 第55页 |
七、过表达转基因水稻干旱胁迫实验 | 第55-57页 |
(一)过表达转基因水稻苗期干旱处理实验 | 第55-56页 |
(二)离体叶片的失水率分析 | 第56页 |
(三)相对水分含量测定 | 第56-57页 |
八、过表达转基因水稻冷胁迫实验 | 第57-59页 |
(一)过表达转基因水稻苗期低温处理实验 | 第57页 |
(二)相对电导率测定 | 第57-59页 |
第三章 结果与分析 | 第59-101页 |
第一节OsPYLs基因家族表达模式分析 | 第59-63页 |
一、OsPYLs基因家族在不同组织中的表达模式分析 | 第59-60页 |
二、OsPYLs基因家族对ABA响应的表达模式分析 | 第60-61页 |
三、OsPYLs基因家族对干旱胁迫的表达模式分析 | 第61-62页 |
四、OsPYLs基因家族对低温胁迫的表达模式分析 | 第62-63页 |
第二节OsPYLs基因家族亚细胞定位研究 | 第63-65页 |
第三节OsPYLs基因家族与OsPP2Cs基因家族互作网络研究 | 第65-87页 |
一、OsPYLs与OsPP2Cs体外互作模式分析 | 第66-78页 |
二、OsPYLs与OsPP2Cs体内互作模式分析 | 第78-83页 |
三、OsPYLs-OsPP2Cs复合物及OsPP2Cs的亚细胞定位分析 | 第83-87页 |
第四节 水稻OsPYLs基因家族生物功能研究 | 第87-97页 |
一、过表达转基因水稻萌发阶段对ABA的敏感性分析 | 第87-90页 |
二、过表达转基因水稻干旱胁迫分析 | 第90-93页 |
三、过表达转基因水稻冷胁迫分析 | 第93-95页 |
四、ABA响应基因的表达模式分析 | 第95-97页 |
第五节 讨论 | 第97-101页 |
一、OsPYLs家族基因具有多样化的表达模式 | 第97-98页 |
二、OsPYLs是具有功能的水稻ABA受体 | 第98页 |
三、OsPYLs能够正向调控ABA信号 | 第98-101页 |
第四章 结论与展望 | 第101-105页 |
第一节 结论 | 第101-102页 |
一、OsPYLs基因家族具有不同的表达模式 | 第101页 |
二、OsPYLs选择性的与OsPP2Cs家族成员互作 | 第101页 |
三、OsPYLs蛋白定位在细胞质和细胞核内 | 第101-102页 |
四、OsPP2Cs决定OsPYLs-OsPP2Cs互作复合物的亚细胞定位 | 第102页 |
五、OsPYLs基因过表达转基因水稻正向调控ABA信号 | 第102页 |
第二节 展望 | 第102-105页 |
参考文献 | 第105-115页 |
附录 | 第115-118页 |
发表文章目录 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |