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水稻ABA受体OsPYLs基因家族的鉴定和功能研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 绪论第13-37页
    第一节 脱落酸概述第13-17页
        一、脱落酸的发现第13页
        二、脱落酸的化学结构和存在形式第13-14页
        三、脱落酸的分布及生物合成第14-15页
        四、脱落酸的生物功能第15-17页
            (一)促进休眠并控制种子萌发第15-16页
            (二)促进气孔关闭第16页
            (三)促进器官脱落第16页
            (四)抑制植物生长第16页
            (五)促进果实成熟第16-17页
            (六)响应外界非生物胁迫第17页
    第二节ABA受体研究进展第17-23页
        一、FCA研究进展第18页
        二、ABAR/CHLH研究进展第18-19页
        三、GCR2研究进展第19-20页
        四、GTG1/2 研究进展第20页
        五、PYR/PYL/RCARs研究进展第20-23页
    第三节ABA信号转导通路相关调控因子研究进展第23-31页
        一、负调控因子PP2Cs(serine-threonine phosphatase 2Cs)第24-26页
        二、正调控因子SnRK2(SNF1-related protein kinase 2)第26-29页
        三、ABA信号相关转录因子第29-31页
    第四节ABA受体PYR/PYL/RCARs基因家族介导的ABA信号转导通路第31-33页
    第五节 水稻ABA受体PYLs基因家族相关功能研究第33-35页
    第六节 本研究的目的与意义第35-37页
第二章 材料与方法第37-59页
    第一节 实验材料第37-39页
        一、植物材料第37页
        二、菌株与载体第37-38页
        三、实验仪器第38页
        四、实验用分子生物学试剂第38-39页
        五、实验常用抗生素的配制第39页
    第二节 实验方法第39-59页
        一、载体构建第39-41页
            (一)入门载体pENTR-OsPYLs和pENTR-OsPP2Cs的构建第39-41页
            (二)Gateway系统表达载体的构建第41页
        二、实时荧光定量PCR (Real time Quantitative PCR)第41-43页
            (一) 水稻的培养第41-42页
            (二)水稻总RNA的提取第42-43页
            (三)总RNA反转录成cDNA第43页
            (四)实时荧光定量PCR (Real time Quantitative PCR)第43页
        三、酵母双杂交第43-47页
            (一)制备Y2H gold酵母感受态第43-45页
            (二)酵母转化第45-46页
            (三)蛋白互作鉴定第46-47页
        四、OsPYLs的亚细胞定位和双分子荧光互补实验第47-49页
            (一)OsPYLs和OsPP2Cs亚细胞定位第47-48页
            (二)双分子荧光互补第48-49页
        五、OsPYL3和OsPYL9过表达转基因水稻的获得第49-55页
            (一)目的质粒转化农杆菌第49页
            (二)水稻愈伤组织的培养第49-50页
            (三)农杆菌侵染水稻愈伤组织第50-51页
            (四)被侵染水稻愈伤组织的恢复培养第51-52页
            (五)被侵染水稻愈伤组织的筛选培养第52页
            (六)抗性水稻愈伤组织的分化培养第52-53页
            (七)转基因苗的鉴定第53-55页
        六、过表达转基因水稻萌发阶段对ABA的敏感性实验第55页
        七、过表达转基因水稻干旱胁迫实验第55-57页
            (一)过表达转基因水稻苗期干旱处理实验第55-56页
            (二)离体叶片的失水率分析第56页
            (三)相对水分含量测定第56-57页
        八、过表达转基因水稻冷胁迫实验第57-59页
            (一)过表达转基因水稻苗期低温处理实验第57页
            (二)相对电导率测定第57-59页
第三章 结果与分析第59-101页
    第一节OsPYLs基因家族表达模式分析第59-63页
        一、OsPYLs基因家族在不同组织中的表达模式分析第59-60页
        二、OsPYLs基因家族对ABA响应的表达模式分析第60-61页
        三、OsPYLs基因家族对干旱胁迫的表达模式分析第61-62页
        四、OsPYLs基因家族对低温胁迫的表达模式分析第62-63页
    第二节OsPYLs基因家族亚细胞定位研究第63-65页
    第三节OsPYLs基因家族与OsPP2Cs基因家族互作网络研究第65-87页
        一、OsPYLs与OsPP2Cs体外互作模式分析第66-78页
        二、OsPYLs与OsPP2Cs体内互作模式分析第78-83页
        三、OsPYLs-OsPP2Cs复合物及OsPP2Cs的亚细胞定位分析第83-87页
    第四节 水稻OsPYLs基因家族生物功能研究第87-97页
        一、过表达转基因水稻萌发阶段对ABA的敏感性分析第87-90页
        二、过表达转基因水稻干旱胁迫分析第90-93页
        三、过表达转基因水稻冷胁迫分析第93-95页
        四、ABA响应基因的表达模式分析第95-97页
    第五节 讨论第97-101页
        一、OsPYLs家族基因具有多样化的表达模式第97-98页
        二、OsPYLs是具有功能的水稻ABA受体第98页
        三、OsPYLs能够正向调控ABA信号第98-101页
第四章 结论与展望第101-105页
    第一节 结论第101-102页
        一、OsPYLs基因家族具有不同的表达模式第101页
        二、OsPYLs选择性的与OsPP2Cs家族成员互作第101页
        三、OsPYLs蛋白定位在细胞质和细胞核内第101-102页
        四、OsPP2Cs决定OsPYLs-OsPP2Cs互作复合物的亚细胞定位第102页
        五、OsPYLs基因过表达转基因水稻正向调控ABA信号第102页
    第二节 展望第102-105页
参考文献第105-115页
附录第115-118页
发表文章目录第118-119页
致谢第119页

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