草甘膦氧化还原酶基因转化油菜的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 材料与方法 | 第10-17页 |
| 1 材料 | 第10-11页 |
| ·供试植物材料 | 第10页 |
| ·菌种与质粒 | 第10页 |
| ·试剂 | 第10页 |
| ·引物 | 第10-11页 |
| 2 方法 | 第11-17页 |
| ·油菜总DNA提取 | 第11-12页 |
| ·草甘膦氧化还原酶基因GOX的克隆 | 第12-13页 |
| ·表达载体构建 | 第13-14页 |
| ·花粉管通道法导入表达载体 | 第14-15页 |
| ·T_0代植株的PCR检测 | 第15页 |
| ·油菜选择压的确定 | 第15-16页 |
| ·T_0代植株的抗性鉴定 | 第16-17页 |
| 结果与分析 | 第17-31页 |
| 1 GOX基因克隆 | 第17-22页 |
| ·油菜总DNA提取 | 第17页 |
| ·PCR扩增获得GOX基因 | 第17-18页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第18-20页 |
| ·草甘膦氧化还原酶基因GOX序列分析 | 第20-22页 |
| 2 表达载体构建 | 第22-23页 |
| ·表达载体pPZP221-GOX的PCR鉴定 | 第22页 |
| ·表达载体pPZP221-GOX的酶切鉴定 | 第22-23页 |
| 3 T_0代植株的检测 | 第23-26页 |
| ·结角果率的统计 | 第23页 |
| ·转化时间对结角果率的影响 | 第23-24页 |
| ·T_0代植株的PCR检测 | 第24-26页 |
| 4 T_0代植株的抗性鉴定 | 第26-31页 |
| ·庆大霉素选择压的确定 | 第26-28页 |
| ·除草剂草甘膦选择压的确定 | 第28-30页 |
| ·T_0代植株的抗性鉴定 | 第30-31页 |
| 讨论 | 第31-33页 |
| 1 花粉管通道法转化效率的影响因素 | 第31-32页 |
| 2 油菜的抗性筛选浓度确定 | 第32页 |
| 3 抗草甘麟转基因油菜的分子检测和抗性检测 | 第32-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-36页 |
| 文献综述 | 第36-62页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
