| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第1章 酿酒酵母谷氧还蛋白单巯基家族 Grx5 结构生物学研究 | 第10-42页 |
| ·引言 | 第10-19页 |
| ·概述 | 第10-11页 |
| ·酿酒酵母和氧化应激反应 | 第11-12页 |
| ·酵母硫氧还蛋白系统和谷氧还蛋白系统 | 第12-13页 |
| ·酵母谷氧还蛋白家族的生理功能和催化活性机制 | 第13-18页 |
| ·酵母谷氧还蛋白单巯基家族研究的重要意义 | 第18-19页 |
| ·实验材料与方法 | 第19-27页 |
| ·基因克隆及表达质粒构建 | 第19-22页 |
| ·蛋白质表达与纯化 | 第22-23页 |
| ·制备结合Fe-S cluster 的Grx5 的表达与纯化 | 第23-24页 |
| ·晶体生长，优化及衍射数据收集 | 第24-26页 |
| ·结构的修正 | 第26-27页 |
| ·实验结果与讨论 | 第27-31页 |
| ·酿酒酵母Grx5 分子克隆及突变体克隆质粒构建 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白Grx5 的表达与纯化 | 第28-31页 |
| ·晶体生长，优化及衍射数据收集 | 第31-34页 |
| ·Grx5 及其突变体 Cys117Ser,Cys60Ser 晶体筛选,生长与优化 | 第31-32页 |
| ·Grx5 接合含 Fe-S cluster 的晶体筛选,生长与优化 | 第32页 |
| ·Grx5 及其突变体 Cys117Ser,Cys60Ser 以及接合含 Fe-S cluster 的晶体的衍射数据收集 | 第32-34页 |
| ·Grx5 结构解析与模型质量分析 | 第34-36页 |
| ·Grx5 的结构分析 | 第36-41页 |
| ·Grx5 结构的总体分析 | 第36-38页 |
| ·Grx5 的活性位点，以及C 端重要的Cy5117 | 第38页 |
| ·推测的Grx5 的GSH 结合区域 | 第38-41页 |
| ·结论与展望 | 第41-42页 |
| 第2章 酿酒酵母谷氧还蛋白单巯基家族 Grx5 的生化研究 | 第42-59页 |
| ·引言 | 第42-43页 |
| ·Grx5 的生物化学性质以及研究进展 | 第43-45页 |
| ·铁硫中心（[Fe-S]center）的功能 | 第45-48页 |
| ·谷氧还蛋白单巯基家族在铁离子的代谢中的作用 | 第48-51页 |
| ·实验材料以及方法 | 第51-53页 |
| ·基因克隆及表达质粒构建,表达和纯化 | 第51-52页 |
| ·氧化态Grx5 蛋白的制备 | 第52页 |
| ·LC-MS/MS 的样品准备和分析 | 第52-53页 |
| ·氧化态Grx5 的氧化还原活性测定 | 第53页 |
| ·氧化态Grx5 的氧化还原活性测定 | 第53页 |
| ·实验结果与讨论 | 第53-58页 |
| ·氧化态Grx5 以及C 端的半胱氨酸 Cy5117 | 第53-54页 |
| ·Grx5 作为底物的催化机制 | 第54-58页 |
| ·结论与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 各大写字母所表示的生物试剂及术语的全称以及 DNA 测序结果 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
