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青霉Penicillium Sp. F63 CGMCC1669来源木聚糖酶的基因克隆、异源高效表达和性质研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
第一章 前言第10-23页
   ·木聚糖酶研究进展第10-20页
   ·立题依据与研究目的第20-23页
第二章 木聚糖酶基因的克隆第23-41页
   ·实验材料第23-24页
   ·实验方法第24-29页
     ·Penicillum sp.F63产木聚糖酶能力验证第24页
     ·Penicillium sp.F63基因组DNA的提取第24-25页
     ·木聚糖酶基因同源克隆简并引物的设计第25页
     ·木聚糖酶基因片段的克隆第25页
     ·木聚糖酶完整基因的克隆与分析第25-28页
     ·Penicillium sp.F63总RNA的提取第28页
     ·木聚糖酶基因cDNA的克隆第28-29页
     ·木聚糖酶基因cDNA序列分析第29页
   ·实验结果第29-39页
     ·Penicillum sp.F63产木聚糖酶能力验证第30页
     ·同源克隆简并引物的设计第30-31页
     ·木聚糖酶基因片段的克隆第31-32页
     ·木聚糖酶完整基因的克隆与分析第32-34页
     ·木聚糖酶基因cDNA的克隆第34-35页
     ·木聚糖酶基因序列的分析第35-39页
   ·讨论与小结第39-41页
第三章 基因XYN11F63在毕赤酵母中的表达与重组酶纯化第41-54页
   ·实验材料第41-42页
   ·实验方法第42-48页
     ·重组载体pPIC9-xyn11F63的构建第42-44页
     ·重组载体电击转化毕赤酵母第44-45页
     ·木聚糖酶活力的测定第45-46页
     ·木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达第46-47页
     ·rXYN11F63的纯化与鉴定第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·重组载体的构建第48-49页
     ·线性化重组载体电击转化毕赤酵母第49-50页
     ·木聚糖酶活性测定中木糖标准曲线的绘制第50页
     ·木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达第50-51页
     ·目的蛋白rXYN11F63的纯化与鉴定第51-52页
   ·讨论与小结第52-54页
第四章 重组木聚糖酶酶学性质研究第54-65页
   ·材料第54页
   ·实验方法第54-57页
     ·最适pH与pH稳定性第54-55页
     ·最适温度与热稳定性第55页
     ·不同金属离子及相关化学试剂对酶活的影响第55页
     ·蛋白酶抗性第55-56页
     ·木聚糖酶比活的测定第56页
     ·底物特异性及动力学常数的测定第56-57页
     ·燕麦与桦木木聚糖酶解产物分析第57页
   ·结果与分析第57-63页
     ·最适pH第57页
     ·pH稳定性第57-58页
     ·最适反应温度第58页
     ·热稳定性第58-59页
     ·不同金属离子和化学试剂对酶活力的影响第59-60页
     ·蛋白酶抵抗能力第60页
     ·比活力的测定第60-61页
     ·底物特异性与催化反应动力学常数第61-62页
     ·木聚糖酶解产物分析第62-63页
   ·讨论与小结第63-65页
第五章 全文结论第65-66页
第六章 参考文献第66-76页
硕士在读期间发表论文第76-77页
致谢第77页

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