中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一章 前言 | 第10-23页 |
·木聚糖酶研究进展 | 第10-20页 |
·立题依据与研究目的 | 第20-23页 |
第二章 木聚糖酶基因的克隆 | 第23-41页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-29页 |
·Penicillum sp.F63产木聚糖酶能力验证 | 第24页 |
·Penicillium sp.F63基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
·木聚糖酶基因同源克隆简并引物的设计 | 第25页 |
·木聚糖酶基因片段的克隆 | 第25页 |
·木聚糖酶完整基因的克隆与分析 | 第25-28页 |
·Penicillium sp.F63总RNA的提取 | 第28页 |
·木聚糖酶基因cDNA的克隆 | 第28-29页 |
·木聚糖酶基因cDNA序列分析 | 第29页 |
·实验结果 | 第29-39页 |
·Penicillum sp.F63产木聚糖酶能力验证 | 第30页 |
·同源克隆简并引物的设计 | 第30-31页 |
·木聚糖酶基因片段的克隆 | 第31-32页 |
·木聚糖酶完整基因的克隆与分析 | 第32-34页 |
·木聚糖酶基因cDNA的克隆 | 第34-35页 |
·木聚糖酶基因序列的分析 | 第35-39页 |
·讨论与小结 | 第39-41页 |
第三章 基因XYN11F63在毕赤酵母中的表达与重组酶纯化 | 第41-54页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-48页 |
·重组载体pPIC9-xyn11F63的构建 | 第42-44页 |
·重组载体电击转化毕赤酵母 | 第44-45页 |
·木聚糖酶活力的测定 | 第45-46页 |
·木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第46-47页 |
·rXYN11F63的纯化与鉴定 | 第47-48页 |
·结果与分析 | 第48-52页 |
·重组载体的构建 | 第48-49页 |
·线性化重组载体电击转化毕赤酵母 | 第49-50页 |
·木聚糖酶活性测定中木糖标准曲线的绘制 | 第50页 |
·木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第50-51页 |
·目的蛋白rXYN11F63的纯化与鉴定 | 第51-52页 |
·讨论与小结 | 第52-54页 |
第四章 重组木聚糖酶酶学性质研究 | 第54-65页 |
·材料 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-57页 |
·最适pH与pH稳定性 | 第54-55页 |
·最适温度与热稳定性 | 第55页 |
·不同金属离子及相关化学试剂对酶活的影响 | 第55页 |
·蛋白酶抗性 | 第55-56页 |
·木聚糖酶比活的测定 | 第56页 |
·底物特异性及动力学常数的测定 | 第56-57页 |
·燕麦与桦木木聚糖酶解产物分析 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-63页 |
·最适pH | 第57页 |
·pH稳定性 | 第57-58页 |
·最适反应温度 | 第58页 |
·热稳定性 | 第58-59页 |
·不同金属离子和化学试剂对酶活力的影响 | 第59-60页 |
·蛋白酶抵抗能力 | 第60页 |
·比活力的测定 | 第60-61页 |
·底物特异性与催化反应动力学常数 | 第61-62页 |
·木聚糖酶解产物分析 | 第62-63页 |
·讨论与小结 | 第63-65页 |
第五章 全文结论 | 第65-66页 |
第六章 参考文献 | 第66-76页 |
硕士在读期间发表论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |