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尼崎青霉菌葡萄糖氧化酶的分离纯化及性质研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-17页
第一章 前言第17-35页
   ·葡萄糖氧化酶简介第17-20页
     ·葡萄糖氧化酶催化反应第17-18页
     ·葡萄糖氧化酶分子组成及作用机理第18-20页
   ·葡萄糖氧化酶的生产第20-25页
     ·葡萄糖氧化酶的生产菌第20-21页
     ·葡萄糖氧化酶生产营养要求第21-23页
     ·控制条件第23-25页
   ·葡萄糖氧化酶在生产中的应用第25-31页
     ·食品工业第25-27页
     ·医药工业第27-28页
     ·生物方面第28-30页
     ·其他方面第30页
     ·葡萄糖酸的应用第30-31页
   ·国内外研究现状及进展第31-33页
     ·关于葡萄糖氧化酶活力测定的研究第31-33页
     ·酶制剂研究进展第33页
     ·酶固定化及分子水平的研究第33页
   ·本课题的研究意义及研究内容第33-35页
第二章 实验材料、仪器与方法第35-43页
   ·实验材料第35-36页
   ·仪器第36页
   ·试剂处理第36-37页
   ·方法第37-43页
     ·蛋白质浓度的测定第37页
     ·酶活力和比活力的测定第37页
     ·尼崎青霉菌的培养第37-38页
       ·培养基第37页
       ·培养方法第37页
       ·转速对尼崎青霉菌GOD的影响第37-38页
       ·时间对尼崎青霉菌GOD的影响第38页
       ·温度对尼崎青霉菌GOD的影响第38页
       ·Ca~(2+)、吐温80对尼崎青霉菌GOD的影响第38页
     ·尼崎青霉菌GOD的分离纯化第38-39页
       ·尼崎青霉菌发酵液中GOD的分离纯化第38-39页
       ·尼崎青霉菌菌丝体中GOD的分离纯化第39页
     ·尼崎青霉菌发酵液中GOD纯度的鉴定第39页
     ·酶理化性质的测定第39-40页
       ·酶分子的亚基数及亚基分子量的测定第39-40页
       ·酶分子的紫外吸收光谱测定第40页
       ·酶分子的内源荧光光谱测定第40页
     ·酶催化反应的动力学性质研究第40-41页
       ·酶催化葡萄糖的动力学参数测定第40页
       ·酶催化葡萄糖反应的活化能测定第40页
       ·酶催化反应最适pH的测定第40页
       ·酶催化反应最适温度的测定第40页
       ·酶的pH稳定性测定第40-41页
       ·酶的热稳定性测定第41页
     ·酶的底物特异性研究第41页
     ·酶活性中心必需基团的研究第41-42页
       ·酶的化学修饰第41-42页
       ·修饰剂对酶活力影响及动力学研究第42页
     ·金属离子对酶活力的影响第42页
     ·有机污染物对酶活力的影响第42页
     ·变性剂对酶活力的影响第42-43页
第三章 实验结果第43-89页
   ·尼崎青霉菌菌丝体葡萄糖氧化酶的提取第43-44页
   ·尼崎青霉菌发酵液与菌丝体酶活力比较第44-45页
     ·发酵培养不同时间对发酵液酶活力的影响第44页
     ·发酵培养不同时间对菌丝体酶活力的影响第44-45页
     ·发酵培养不同时间对发酵液和菌丝体总酶活力的影响第45页
   ·尼崎青霉菌培养条件的优化第45-47页
     ·转速对发酵液酶活力的影响第45-46页
     ·温度对发酵液酶活力的影响第46页
     ·Ca~(2+)对发酵液酶活力的影响第46-47页
     ·吐温80对发酵液酶活力的影响第47页
   ·尼崎青霉葡萄糖氧化酶的分离纯化第47-49页
   ·尼崎青霉葡萄糖氧化酶纯度鉴定第49页
   ·酶分子的理化性质第49-51页
     ·酶分子亚基的分子量测定第49-50页
     ·酶分子的紫外特征吸收光谱测定第50页
     ·酶的内源荧光特征第50页
     ·酶的催化特异性研究第50-51页
   ·该酶催化葡萄糖的动力学参数的测定第51-55页
     ·酶催化反应的动力学性质研究第51页
     ·酶催化葡萄糖反应的活化能测定第51-53页
     ·酶催化反应最适pH及pH稳定性测定第53-54页
     ·酶催化反应最适温度及温度稳定性的测定第54-55页
   ·酶活性中心必需基团的研究第55-59页
     ·MT对酶的化学修饰第55-56页
     ·组氨酸咪唑基的化学修饰第56页
     ·pCMB对酶的化学修饰第56页
     ·酶活性中心色氨酸残基的化学修饰第56-57页
     ·氨基的化学修饰第57-58页
     ·精氨酸残基的化学修饰第58-59页
     ·丝氨酸轻基与酶活力的关系第59页
   ·修饰剂对酶的效应动力学第59-65页
     ·溴乙酸对酶活力影响及动力学研究第59-61页
       ·溴乙酸对酶活力的影响第59-60页
       ·溴乙酸对酶的抑制类型及抑制常数第60-61页
     ·NBS对酶活力影响及动力学研究第61-63页
       ·NBS对酶活力的影响第61-62页
       ·NBS对酶的抑制类型及抑制常数第62-63页
     ·乙酰丙酮对酶活力影响及动力学研究第63-65页
       ·乙酰丙酮对酶活力的影响第63-64页
       ·乙酰丙酮对酶的抑制类型及抑制常数第64-65页
   ·几种离子对尼崎青霉菌GOD活力的影响第65-78页
     ·卤素阴离子对尼崎青霉菌GOD活力的影响第65-66页
     ·几种金属离子对尼崎青霉菌GOD活力的影响第66-72页
       ·碱金属离子对尼崎青霉菌GOD活力的影响第66-68页
       ·正二价碱土金属离子Mg~(2+)、Ba~(2+)、Ca~(2+)对GOD活力的影响第68-69页
       ·过渡金属离子对尼崎青霉菌GOD活力的影响第69-71页
       ·主族金属离子对尼崎青霉菌GOD活力的影响第71-72页
     ·几种金属离子对尼崎青霉菌GOD的抑制作用类型第72-78页
       ·Cu~(2+)对尼崎青霉菌GOD活力的影响及抑制作用类型第72-74页
       ·Hg~(2+)对尼崎青霉菌GOD活力的影响及抑制作用类型第74-76页
       ·Ag~+对尼崎青霉菌GOD活力的影响及抑制作用类型第76-78页
   ·几种有机溶剂对酶活力影响及动力学研究第78-83页
     ·醇对酶活力影响第78-81页
     ·甲醛对尼崎青霉菌GOD活力的影响第81-83页
   ·几种变性剂对酶活力影响及动力学研究第83-89页
     ·EDTA对尼崎青霉菌GOD活力的影响第83-84页
     ·脲对尼崎青霉菌GOD活力的影响第84页
     ·盐酸胍对尼崎青霉菌GOD活力的影响第84-86页
     ·SDS对尼崎青霉菌GOD活力的影响第86-89页
第四章 讨论第89-94页
   ·尼崎青霉菌培养条件的优化第89页
   ·尼崎青霉菌葡萄糖氧化酶(GOD)的粗酶液的制备第89页
   ·尼崎青霉菌葡萄糖氧化酶(GOD)的纯化第89-90页
   ·尼崎青霉菌葡萄糖氧化酶(GOD)酶学性质和动力学性质第90页
   ·尼崎青霉菌GOD的紫外特征光谱及内源荧光特征第90页
   ·尼崎青霉菌葡萄糖氧化酶(GOD)的底物特异性第90-91页
   ·尼崎青霉菌葡萄糖氧化酶(GOD)的化学修饰第91页
   ·修饰剂对EGase的抑制动力学研究第91页
   ·效应物对GOD活力的影响第91-94页
五、 结论第94-96页
参考文献第96-106页
已发表文章第106-107页
致谢第107页

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