提要 | 第1-8页 |
英文缩略词 | 第8-10页 |
第1章 前言 | 第10-23页 |
·载脂蛋白A概述 | 第10-12页 |
·apoA-Ⅳ概述 | 第12-18页 |
·apoA-Ⅳ的分子结构 | 第12-13页 |
·apoA-Ⅳ的合成与分泌的调控 | 第13-15页 |
·apoA-Ⅳ的生理作用 | 第15-17页 |
·apoA-Ⅳ与一些疾病的关系 | 第17-18页 |
·表达系统的选择 | 第18-21页 |
·原核表达系统 | 第19页 |
·昆虫细胞表达系统 | 第19-20页 |
·哺乳动物细胞表达系统 | 第20页 |
·酵母表达系统 | 第20-21页 |
·立题依据 | 第21-23页 |
第2章 重组人apoA-Ⅳ表达载体的构建 | 第23-37页 |
·实验材料 | 第23-25页 |
·器材及设备 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·引物 | 第24页 |
·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-32页 |
·人小肠组织总RNA的提取 | 第25-26页 |
·RT-PCR扩增人apoA-Ⅳ基因 | 第26-27页 |
·pMD18-T-apoA-Ⅳ克隆载体的构建 | 第27-29页 |
·pPICZαC-apoA-Ⅳ表达载体的构建 | 第29-32页 |
·结果 | 第32-35页 |
·人小肠组织总RNA的提取 | 第32页 |
·RT-PCR扩增人apoA-Ⅳ基因 | 第32-33页 |
·重组质粒pMD18-T-apoA-Ⅳ的酶切鉴定结果 | 第33页 |
·PCR方法扩增apoA-Ⅳ基因的成熟肽序列 | 第33-34页 |
·重组质粒的构建 | 第34页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
·质粒的DNA测序 | 第35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第3章 重组人apoA-Ⅳ在毕赤酵母中表达的研究 | 第37-48页 |
·实验材料 | 第37-39页 |
·器材及设备 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37-38页 |
·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-43页 |
·重组人apoA-Ⅳ毕赤酵母表达体系的建立 | 第39-40页 |
·阳性菌株的筛选 | 第40-42页 |
·重组人apoA-Ⅳ工程菌发酵条件的优化 | 第42页 |
·毕赤酵母表达重组人apoA-Ⅳ的最佳pH的确定 | 第42-43页 |
·结果 | 第43-45页 |
·PCR方法鉴定重组人apoA-Ⅳ转化阳性菌株 | 第43页 |
·高表达重组apoA-Ⅳ工程菌的筛选 | 第43-44页 |
·重组人apoA-Ⅳ不同时间点表达量的变化 | 第44-45页 |
·毕赤酵母表达重组人apoA-Ⅳ最佳pH值的确定 | 第45页 |
·讨论 | 第45-48页 |
第4章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
中文摘要 | 第58-60页 |
Abstract | 第60-62页 |