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重组人载脂蛋白A-Ⅳ基因的克隆及在毕赤酵母中表达的研究

提要第1-8页
英文缩略词第8-10页
第1章 前言第10-23页
   ·载脂蛋白A概述第10-12页
   ·apoA-Ⅳ概述第12-18页
     ·apoA-Ⅳ的分子结构第12-13页
     ·apoA-Ⅳ的合成与分泌的调控第13-15页
     ·apoA-Ⅳ的生理作用第15-17页
     ·apoA-Ⅳ与一些疾病的关系第17-18页
   ·表达系统的选择第18-21页
     ·原核表达系统第19页
     ·昆虫细胞表达系统第19-20页
     ·哺乳动物细胞表达系统第20页
     ·酵母表达系统第20-21页
   ·立题依据第21-23页
第2章 重组人apoA-Ⅳ表达载体的构建第23-37页
   ·实验材料第23-25页
     ·器材及设备第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·引物第24页
     ·主要试剂的配制第24-25页
   ·方法第25-32页
     ·人小肠组织总RNA的提取第25-26页
     ·RT-PCR扩增人apoA-Ⅳ基因第26-27页
     ·pMD18-T-apoA-Ⅳ克隆载体的构建第27-29页
     ·pPICZαC-apoA-Ⅳ表达载体的构建第29-32页
   ·结果第32-35页
     ·人小肠组织总RNA的提取第32页
     ·RT-PCR扩增人apoA-Ⅳ基因第32-33页
     ·重组质粒pMD18-T-apoA-Ⅳ的酶切鉴定结果第33页
     ·PCR方法扩增apoA-Ⅳ基因的成熟肽序列第33-34页
     ·重组质粒的构建第34页
     ·重组质粒的酶切鉴定第34-35页
     ·质粒的DNA测序第35页
   ·讨论第35-37页
第3章 重组人apoA-Ⅳ在毕赤酵母中表达的研究第37-48页
   ·实验材料第37-39页
     ·器材及设备第37页
     ·主要试剂第37-38页
     ·主要试剂的配制第38-39页
   ·方法第39-43页
     ·重组人apoA-Ⅳ毕赤酵母表达体系的建立第39-40页
     ·阳性菌株的筛选第40-42页
     ·重组人apoA-Ⅳ工程菌发酵条件的优化第42页
     ·毕赤酵母表达重组人apoA-Ⅳ的最佳pH的确定第42-43页
   ·结果第43-45页
     ·PCR方法鉴定重组人apoA-Ⅳ转化阳性菌株第43页
     ·高表达重组apoA-Ⅳ工程菌的筛选第43-44页
     ·重组人apoA-Ⅳ不同时间点表达量的变化第44-45页
     ·毕赤酵母表达重组人apoA-Ⅳ最佳pH值的确定第45页
   ·讨论第45-48页
第4章 结论第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-57页
致谢第57-58页
中文摘要第58-60页
Abstract第60-62页

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