| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-48页 |
| 第一节 慢病毒潜伏感染以及相关病毒介绍 | 第14-23页 |
| ·慢病毒及其生活周期 | 第14-17页 |
| ·慢病毒潜伏感染及影响潜伏感染的因素 | 第17-18页 |
| ·本文所涉及的相关病毒 | 第18-23页 |
| 第二节 干扰素诱导的抗病毒效应因子 | 第23-32页 |
| ·干扰素系统概述 | 第23-25页 |
| ·Mx GTPase系统 | 第25-27页 |
| ·OAS和RNaseL通路 | 第27-29页 |
| ·RNA依赖的蛋白激酶PKR | 第29-31页 |
| ·类泛素修饰蛋白ISG15 | 第31-32页 |
| 第三节 类泛素修饰蛋白ISG15 | 第32-45页 |
| ·类泛素修饰蛋白 | 第32-33页 |
| ·ISG15的发现历史 | 第33页 |
| ·细胞外的ISG15 | 第33-34页 |
| ·ISG15表达的调节 | 第34-36页 |
| ·ISG15修饰酶系统 | 第36-39页 |
| ·ISG15修饰的靶蛋白 | 第39-41页 |
| ·ISG15及其修饰在免疫过程中的作用 | 第41-43页 |
| ·牛ISG15(bISG15)及其生物学功能 | 第43-45页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第45-48页 |
| ·本研究的前期基础 | 第45-46页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第46-48页 |
| 第二章 材料与方法 | 第48-62页 |
| 第一节 实验材料 | 第48-50页 |
| ·细胞与病毒 | 第48页 |
| ·菌株 | 第48-49页 |
| ·质粒 | 第49-50页 |
| ·酶类 | 第50页 |
| ·其他试剂 | 第50页 |
| 第二节 实验方法 | 第50-62页 |
| ·基因操作 | 第50-52页 |
| ·质粒DNA提取 | 第50页 |
| ·细胞基因组DNA提取 | 第50页 |
| ·细胞RNA提取以及反转录 | 第50页 |
| ·DNA的酶切和连接 | 第50-51页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备和转化 | 第51页 |
| ·引物设计及合成 | 第51-52页 |
| ·蛋白的表达与纯化 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白质表达 | 第52页 |
| ·金属螯合层析 | 第52-53页 |
| ·蛋白质的浓缩 | 第53页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第53页 |
| ·细胞相关实验 | 第53-57页 |
| ·胎牛肺细胞分离培养 | 第53-54页 |
| ·细胞培养 | 第54页 |
| ·病毒培养以及滴度的测定 | 第54页 |
| ·质粒转染 | 第54-55页 |
| ·荧光素酶活性测定(Luciferase) | 第55页 |
| ·内对照系统 | 第55-56页 |
| ·siRNA干扰 | 第56页 |
| ·BIVL指示细胞病毒测定 | 第56-57页 |
| ·Western Blot | 第57页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第57页 |
| ·转膜 | 第57页 |
| ·杂交 | 第57页 |
| ·RT-PCR | 第57-58页 |
| ·细胞RNA提取与反转录 | 第57-58页 |
| ·Real-time PCR | 第58页 |
| ·免疫荧光 | 第58-59页 |
| ·染色体免疫共沉淀 | 第59-60页 |
| ·bISG15体外修饰系统的建立 | 第60页 |
| ·内毒素测定 | 第60-61页 |
| ·数据及生物信息学分析 | 第61-62页 |
| 第三章 结果与分析 | 第62-90页 |
| 第一节 bISG15检测的系统建立 | 第62-69页 |
| ·bISG15的RT-PCR检测系统优化 | 第62-64页 |
| ·bISG15启动子报告系统的建立 | 第64-66页 |
| ·bISG15抗体的制备以及Western blot检测系统建立 | 第66-69页 |
| 第二节 胎牛肺细胞(FBLs)中bISG15的表达研究 | 第69-77页 |
| ·LPS/polyI:C诱导bISG15的转录和表达 | 第70-74页 |
| ·IRF3参与激活bISG15的表达 | 第74-77页 |
| 第三节 BIV与bISG15的相互影响 | 第77-86页 |
| ·BIV感染可以诱导bISG15的表达 | 第77-80页 |
| ·bISG15可以抑制BIV复制 | 第80-83页 |
| ·BIV的Tat蛋白可以抑制IRF-3对bISG15启动子的激活 | 第83-86页 |
| 第四节 BHV-1、BVDV感染抑制bISG15表达 | 第86-90页 |
| ·BHV-1、BVDV感染抑制bISG15表达 | 第86-88页 |
| ·BHV-1的即早期蛋白bICP0抑制IRF-3对bISG15启动子的激活作用 | 第88-90页 |
| 第四章 讨论 | 第90-96页 |
| 第一节 bISG15在先天免疫中的作用 | 第90-92页 |
| 第二节 bISG15与BIV的相互"对抗" | 第92-94页 |
| 第三节 BHV-1、BVDV超感染对BIV的影响 | 第94-95页 |
| 第四节 有待进一步研究的科学问题 | 第95-96页 |
| 第五章 结论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 附录 | 第113-122页 |
| A.利用蛋白质组学分析与BIV的MA相互作用蛋白 | 第113-116页 |
| B.个人简历 | 第116-117页 |
| C.在学期间发表的学术论文 | 第117-118页 |
| D.英文缩写 | 第118-120页 |
| E.图表索引 | 第120-122页 |
