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胰岛素对牛脂肪细胞中脂联素及其受体mRNA表达的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-24页
 第一章 脂肪细胞分化的研究现状第12-20页
   ·前脂肪细胞的增殖及分化过程第12页
   ·脂肪细胞分化的研究模型第12-13页
   ·脂肪细胞分化调节第13-16页
     ·前脂肪细胞的克隆性增殖第13-14页
     ·前脂肪细胞分化过程中基因表达第14-15页
     ·糖皮质激素、胰岛素和胰岛素样生长因子对脂肪细胞分化的调节第15-16页
     ·肾上腺素受体信号的调节第16页
   ·脂肪细胞因子的研究进展第16-19页
     ·瘦素(Leptin)第16-17页
     ·脂联素(Adiponectin)第17页
     ·抵抗素(Resistin)第17页
     ·内脏脂肪素(Visfatin)第17-18页
     ·肿瘤坏死因子(TNF-α)第18页
     ·白介素-6(IL-6)第18页
     ·补体D(Adipsin)第18-19页
     ·纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)第19页
   ·脂滴在脂肪细胞中的角色第19-20页
 第二章 脂联素及其受体的研究现状第20-24页
   ·脂联素及受体的结构第20-22页
     ·脂联素结构及特征第20-21页
     ·脂联素受体的结构和特征第21-22页
   ·脂联素及受体基因的表达调控第22页
     ·脂联素基因的表达调控第22页
     ·脂联素受体基因的表达调控第22页
   ·脂联素及受体对脂肪代谢的调节第22-24页
试验研究第24-53页
 前言第24-25页
 第三章 牛前体脂肪细胞的分离培养第25-34页
   ·材料与方法第25-28页
     ·材料第25-26页
       ·实验动物第25页
       ·主要试剂第25页
       ·实验仪器及器械第25-26页
     ·方法第26-28页
       ·主要溶液配制第26页
       ·酶消化法分离培养前脂肪细胞第26-27页
       ·组织块法培养前脂肪细胞第27页
       ·细胞生长曲线测定第27页
       ·细胞诱导分化第27页
       ·油红O 染色及细胞脂肪含量检测第27-28页
       ·检测标志基因的表达第28页
     ·数据统计第28页
   ·结果第28-31页
     ·酶消化分离前脂肪细胞第28-29页
     ·组织块法培养前脂肪细胞第29页
     ·牛前脂肪细胞生长曲线第29-30页
     ·油红O 染色及细胞脂肪含量检测第30-31页
     ·检测Pref-1 和PPAR-γ的表达第31页
   ·讨论第31-34页
     ·脂肪细胞体外培养是研究脂肪沉积有效模型第31页
     ·组织块法和酶消化法的比较第31-32页
     ·牛脂肪细胞的鉴定第32-34页
 第四章 脂联素及其受体在牛脂肪细胞分化过程中的表达第34-44页
   ·材料和方法第34-37页
     ·材料第34页
       ·实验动物第34页
       ·主要试剂第34页
     ·方法第34-37页
       ·琼脂糖电泳有关试剂配制第34-35页
       ·实验设计第35页
       ·细胞总RNA 的提取第35页
       ·反转录第35-36页
       ·PCR 扩增第36-37页
     ·数据统计第37页
   ·结果第37-41页
     ·脂肪细胞中提取RNA 的完整性第37-38页
     ·循环数对平台期影响第38页
     ·脂联素在牛前脂肪细胞分化中的表达第38-39页
     ·AdipoR1 在牛前脂肪细胞分化中的表达第39-40页
     ·AdipoR2 在牛前脂肪细胞分化中的表达第40页
     ·Pref-1 在牛前脂肪细胞分化中的表达第40-41页
     ·PPAR-γ在牛前脂肪细胞分化中的表达第41页
   ·讨论第41-44页
     ·扩增循环数对基因表达定量的影响第41页
     ·adiponectin 和AdipoRs 在牛脂肪细胞分化过程中的表达第41-42页
     ·Pref-1 和PPAR-γ在牛脂肪细胞分化过程中的表达第42-44页
 第五章 胰岛素对牛脂肪细胞脂联素及受体m RNA 表达的影响第44-53页
   ·材料和方法第44-45页
     ·材料第44-45页
       ·实验动物第44页
       ·主要试剂第44-45页
     ·方法第45页
       ·相关试剂的配置第45页
       ·实验设计第45页
       ·细胞总RNA 的提取第45页
       ·半定量RT-PCR 分析第45页
     ·统计分析第45页
   ·结果第45-50页
     ·不同浓度胰岛素对adiponectin 和AdipoRs mRNA 表达的影响第45-46页
     ·胰岛素处理时间对adiponectin 和AdipoRs mRNA 表达的影响第46-47页
     ·抑制P13K 和MAPK 通路对adiponectin 和AdipoR2 m RNA 表达的影响第47-50页
     ·胰岛素可逆性抑制adiponectin 和AdipoR2 m RNA 的表达第50页
   ·讨论第50-53页
     ·胰岛素浓度和处理时间对adiponectin 和AdipoRs mRNA 表达的影响第51-52页
     ·P13K 和MAPK 信号在adiponectin 和AdipoRs mRNA 表达中的作用第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-61页
缩略词表第61-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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