| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第9-14页 |
| 1 开展NPR1 参与SAR 分子机制的重要意义 | 第9页 |
| 2 植物系统获得性抗性及NPR1 的相关研究进展 | 第9-13页 |
| ·植物系统获得性抗性 | 第9-10页 |
| ·SAR 传导途径 | 第10页 |
| ·NPR1 基因研究进展 | 第10-13页 |
| ·NPR1 基因的发现 | 第10-11页 |
| ·NPR1 基因的结构 | 第11页 |
| ·NPR1 基因的作用机制 | 第11-12页 |
| ·NPR1 基因的生物学功能 | 第12-13页 |
| 3 本文研究的内容和目标 | 第13-14页 |
| 二、材料与方法 | 第14-19页 |
| 1 实验材料 | 第14-15页 |
| ·植株品种 | 第14页 |
| ·cDNA 文库 | 第14页 |
| ·菌种与质粒载体 | 第14页 |
| ·主要培养基 | 第14页 |
| ·主要仪器设备和主要试剂 | 第14-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-19页 |
| ·载体构建 | 第15-16页 |
| ·引物设计 | 第15页 |
| ·Gateway?技术载体构建 | 第15-16页 |
| ·BP 反应－创建入门载体 | 第15-16页 |
| ·LR 反应－构建目的载体 | 第16页 |
| ·烟草转化 | 第16-19页 |
| ·目的载体转化农杆菌及PCR 鉴定 | 第16-17页 |
| ·烟草无菌苗的准备及培养基配制 | 第17页 |
| ·无菌苗的准备 | 第17页 |
| ·相关培养基配制 | 第17页 |
| ·转基因苗的获得 | 第17-18页 |
| ·农杆菌的活化 | 第17页 |
| ·预培养 | 第17页 |
| ·侵染 | 第17页 |
| ·续代培养 | 第17-18页 |
| ·转基因阳性苗的鉴定 | 第18-19页 |
| ·CTAB 法提取DNA 鉴定 | 第18页 |
| ·TRIzol 法提取烟草幼叶RNA 鉴定 | 第18-19页 |
| 三、结果与分析 | 第19-31页 |
| 1 辣椒 NPR1 基因全长 cDNA 的获得及其序列分析 | 第19-22页 |
| 2 载体构建 | 第22-27页 |
| ·RNA 干扰片段引物的设计及获得 | 第22-23页 |
| ·BP 反应获得入门载体 | 第23-26页 |
| ·LR 反应获得表达载体 | 第26-27页 |
| 3 烟草转化 | 第27-31页 |
| ·目的载体转化农杆菌 | 第27页 |
| ·烟草转化 | 第27-29页 |
| ·转基因烟草PCR 检测 | 第29-30页 |
| ·转基因烟草阳性植株RNA 水平检测 | 第30-31页 |
| 四、讨论 | 第31-33页 |
| 1 NPR1 基因及其抗病性 | 第31页 |
| 2 烟草遗传转化 | 第31页 |
| 3 辣椒NPR1 基因在抗病防御中的后续研究 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 附录 | 第36-45页 |
| 附录1 缩略词及英汉对照 | 第36-37页 |
| 附录2 主要仪器 | 第37页 |
| 附录3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 附录4 转基因烟草MS 培养基配方 | 第38-39页 |
| 附录5 NPR1 基因生物学基本信息 | 第39-42页 |
| 附录6 论文所用到的载体图 | 第42-44页 |
| 附录7 论文中所用的 DNA Marker 对照图 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45页 |