摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1 植物内生菌的概述 | 第10-11页 |
2 内生细菌的种类和寄主范围 | 第11页 |
3 植物内生细菌的生物学作用及其机制 | 第11-16页 |
·促生作用 | 第11-12页 |
·生防作用 | 第12-15页 |
·抗菌物质的产生 | 第13-14页 |
·生态位和营养竞争 | 第14页 |
·诱导系统抗性 | 第14-15页 |
·在非豆科植物中内生固氮作用 | 第15页 |
·可作为外源基因的载体 | 第15-16页 |
4 植物内生细菌应用前景及存在的问题 | 第16-17页 |
5 植物细菌分类鉴定的方法 | 第17-20页 |
·植物细菌常规鉴定方法 | 第17-18页 |
·植物细菌的数值分类方法(自动化鉴定) | 第18-19页 |
·植物细菌化学分类鉴定法 | 第19页 |
·植物细菌分子生物学鉴定方法 | 第19-20页 |
6 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 西瓜内生细菌JK-3 菌株的常规方法鉴定 | 第21-31页 |
1 材料与方法 | 第21-26页 |
·试验菌株 | 第21页 |
·试验仪器 | 第21页 |
·JK-3 菌株的形态观察 | 第21-22页 |
·菌落形态的观察及革兰氏染色 | 第21页 |
·JK-3 菌体的电镜观察 | 第21-22页 |
·JK-3 菌株生长条件的测定 | 第22-23页 |
·最适生长温度的测定 | 第22页 |
·最适pH 值的测定 | 第22页 |
·生长曲线的测定 | 第22页 |
·耐盐性的测定 | 第22-23页 |
·好氧性和厌氧性的测定 | 第23页 |
·抗生素敏感性的测定 | 第23页 |
·JK-3 菌株生化性状的测定 | 第23-26页 |
·碳素化合物的利用和分解 | 第23-24页 |
·氮素化合物的利用和分解 | 第24-25页 |
·大分子化合物的分解 | 第25页 |
·其他反应测定 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-30页 |
·菌落形态特征 | 第26页 |
·JK-3 菌株的电镜观察 | 第26页 |
·JK-3 菌株的生长特性 | 第26-29页 |
·最适生长温度 | 第26-27页 |
·最适pH 值 | 第27-28页 |
·生长曲线 | 第28页 |
·耐盐性 | 第28-29页 |
·对抗生素的敏感性 | 第29页 |
·JK-3 菌株的生理生化性状 | 第29-30页 |
3 小结与讨论 | 第30-31页 |
第三章 JK-3 菌株的分子鉴定 | 第31-37页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
·酶和试剂 | 第31页 |
·通用引物 | 第31页 |
·JK-3 菌株基因组DNA 的小量制备 | 第31-32页 |
·16SrDNA 基因序列的PCR 扩增 | 第32-33页 |
·DNA 序列测定和序列同源性比较 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-36页 |
·JK-3 菌株16SrDNA 的PCR 扩增 | 第33-34页 |
·16SrDNA 序列测定结果 | 第34页 |
·用BLAST 程序组进行序列相似性搜索 | 第34-35页 |
·JK-3 菌株系统进化树的构建 | 第35-36页 |
3 小结与讨论 | 第36-37页 |
第四章 JK-3 菌株的BIOLOG 自动化鉴定 | 第37-42页 |
1 材料与方法 | 第37-40页 |
·培养基及接种液 | 第37页 |
·主要仪器及耗材 | 第37页 |
·选择合适的鉴定流程 | 第37-38页 |
·平板扩大培养 | 第38-39页 |
·制备悬浊液及接种培养 | 第39-40页 |
·悬浊液的制备 | 第39页 |
·悬浊液的调整 | 第39-40页 |
·接种培养 | 第40页 |
·读数仪读取结果 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-41页 |
3 小结与讨论 | 第41-42页 |
第五章 JK-3 菌株拮抗作用的测定 | 第42-48页 |
1 材料与方法 | 第42-46页 |
·供试菌株 | 第42页 |
·抗菌谱的测定 | 第42页 |
·JK-3 菌株对西瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制作用 | 第42-43页 |
·JK-3 菌株对西瓜枯萎病的盆栽防效试验 | 第43-44页 |
·西瓜苗的培育 | 第43页 |
·温室栽培防效试验 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44页 |
·拮抗谱的测定 | 第44-45页 |
·对西瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制作用 | 第45页 |
·对西瓜枯萎病的盆栽防效试验 | 第45-46页 |
3 小结与讨论 | 第46-48页 |
第六章 JK-3 菌株抗菌蛋白粗提及其理化性质测定 | 第48-56页 |
1 材料与方法 | 第48-51页 |
·试剂与仪器 | 第48页 |
·无菌滤液的制备 | 第48页 |
·硫酸铵盐析 | 第48-49页 |
·浓缩和脱盐 | 第49页 |
·抗菌蛋白稳定性测定 | 第49-50页 |
·热稳定性测定 | 第49页 |
·对紫外线稳定性测定 | 第49页 |
·对氯仿稳定性测定 | 第49页 |
·对蛋白酶K 稳定性测定 | 第49-50页 |
·抗菌蛋白组成测定 | 第50-51页 |
·油红-O 染色液显色反应 | 第50页 |
·蒽酮反应 | 第50页 |
·茚三酮反应 | 第50页 |
·硝酸反应 | 第50页 |
·双缩脲反应 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-56页 |
·抗菌蛋白的粗提 | 第51-53页 |
·抗菌蛋白稳定性的测定 | 第53-54页 |
·抗菌蛋白的热稳定性 | 第53页 |
·抗菌蛋白对紫外线的稳定性 | 第53页 |
·抗菌蛋白对氯仿的稳定性 | 第53页 |
·抗菌蛋白对蛋白酶K 的稳定性 | 第53-54页 |
·抗菌蛋白组分的测定 | 第54-55页 |
·脂类物质的测定 | 第54页 |
·糖类物质的测定 | 第54页 |
·α-氨基酸的测定 | 第54页 |
·芳香族氨基酸的测定 | 第54-55页 |
·肽键的测定 | 第55页 |
3 小结与讨论 | 第55-56页 |
第七章 后续工作的设想和展望 | 第56-58页 |
1 内生菌的定殖研究 | 第56-57页 |
2 抗菌蛋白的进一步研究 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
附录 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68页 |