摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
·口蹄疫概述 | 第12-16页 |
·口蹄疫病毒形态结构 | 第13-14页 |
·口蹄疫病毒分类 | 第14-15页 |
·口蹄疫病毒抗原位点 | 第15-16页 |
·口蹄疫疫苗研究概况 | 第16-19页 |
·口蹄疫传统疫苗 | 第16-17页 |
·口蹄疫新型疫苗 | 第17-19页 |
·家蚕转基因研究 | 第19-22页 |
第二章 引言 | 第22-24页 |
·研究背景及意义 | 第22页 |
·研究内容和技术路线 | 第22-24页 |
第三章 口蹄疫病毒PVI蛋白基因的克隆及转基因表达载体构 建 | 第24-36页 |
·材料及试剂 | 第24-26页 |
·材料 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·主要试剂和配方 | 第24-26页 |
·方法 | 第26-30页 |
·FMDV-VP1基因克隆 | 第26-27页 |
·转基因表达载体的构建 | 第27-30页 |
·结果 | 第30-34页 |
·口蹄疫病毒VP1蛋白基因的克隆 | 第30-33页 |
·转基因表达载体构建 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第四章 转基因家蚕的获得及分子生物学鉴定 | 第36-48页 |
·材料及试剂 | 第36-38页 |
·实验材料 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·主要试剂及配方 | 第36-38页 |
·实验方法 | 第38-42页 |
·蚕卵显微注射 | 第38页 |
·转基因阳性个体的筛选 | 第38页 |
·家蚕基因组提取 | 第38-39页 |
·反向PCR | 第39-40页 |
·家蚕脂肪体RNA提取 | 第40页 |
·反转录 | 第40-41页 |
·RT-PCR | 第41页 |
·Southern Blot | 第41-42页 |
·实验结果 | 第42-45页 |
·口蹄疫VP1基因转基因家蚕的获得 | 第42-43页 |
·插入位点的鉴定 | 第43-44页 |
·基因拷贝数鉴定 | 第44-45页 |
·mRNA表达水平检测 | 第45页 |
·讨论 | 第45-48页 |
第五章 重组口蹄疫VP1蛋白检测 | 第48-54页 |
·材料及试剂 | 第48-50页 |
·材料 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·试剂 | 第48页 |
·溶液配方 | 第48-50页 |
·方法 | 第50-53页 |
·蛋白样品处理 | 第50-51页 |
·聚丙烯酸胺凝胶(SDS-PAGE)的制备 | 第51页 |
·蛋白质电泳 | 第51页 |
·凝胶染色 | 第51页 |
·Western blot | 第51-53页 |
·结果 | 第53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
第六章 总结 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-66页 |
参加过的研究课题及发表论文目录一览表 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |