| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 英文缩写词表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-20页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展 | 第11-16页 |
| 1. PRRSV的基因组结构及相关蛋白 | 第11-14页 |
| ·PRRSV基因组结构 | 第11-12页 |
| ·PRRSV基因组编码的蛋白质 | 第12-14页 |
| 2 PRRSV免疫学特性 | 第14-16页 |
| ·体液免疫 | 第14-15页 |
| ·细胞免疫 | 第15-16页 |
| 第二章 真核表达系统及在病毒研究中的应用 | 第16-20页 |
| 1 各种真核表达系统的特点 | 第16-18页 |
| ·酵母表达系统 | 第16-17页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统 | 第17页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第17-18页 |
| 2 真核细胞表达系统的应用与前景 | 第18-20页 |
| ·酵母表达系统的应用与前景 | 第18-19页 |
| ·杆状病毒表达系统的应用前景 | 第19页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统的发展趋势 | 第19-20页 |
| 第二部分 研究内容 | 第20-53页 |
| 第一章 PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因的克隆与分析 | 第20-33页 |
| 1 材料 | 第20-22页 |
| ·病毒、菌种、细胞和克隆载体 | 第20页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·溶液配制 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-26页 |
| ·PRRSV的培养增殖 | 第22页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·PRRSV GP5基因的扩增 | 第23-26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| ·电镜结果 | 第26页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第26-27页 |
| ·GP5基因的测序结果 | 第27-28页 |
| ·PRRSV JL/07/SW分离株GP5基因与核苷酸及氨基酸序列同源性比较 | 第28-29页 |
| ·PRRSV JL/07/SW分离株GP5基因遗传进化分析 | 第29-30页 |
| ·GP5蛋白抗原表位预测分析 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 5. 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因的真核表达 | 第33-44页 |
| 1. 材料 | 第33-35页 |
| ·质粒与菌体 | 第33页 |
| ·酶与试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·溶液及培养基 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-39页 |
| ·PRRSV ORF5片段基因重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·序列测定 | 第36-38页 |
| ·蛋白印迹(Western-blot) | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-42页 |
| ·GP5基因重组真核表达载体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组质粒pCI-GP5转染Marc-145细胞 | 第40-41页 |
| ·SDS-PAGE结果 | 第41页 |
| ·Western-blot结果 | 第41-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 PRRSV JL/07/SW毒株GP5重组蛋白间接ELISA方法的建立 | 第44-53页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·血清、蛋白 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验用溶液配制 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-47页 |
| ·PRRSV JL/07/SW株GP5重组蛋白的间接ELISA方法建立 | 第45-47页 |
| 3 结果 | 第47-51页 |
| ·ELISA方阵试验及抗原最佳包被条件的测定 | 第47-49页 |
| ·间接ELISA特异性检测结果 | 第49页 |
| ·重复性实验 | 第49-50页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA方法的应用 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51页 |
| 5. 小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 导师评阅表 | 第62页 |
