| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 A型禽流感病毒造成的流行威胁 | 第14-34页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 1. 流感的分类 | 第15-16页 |
| 2. 流感的历史及其特征 | 第16-21页 |
| ·历史 | 第16-18页 |
| ·生物学特征 | 第18-20页 |
| ·病毒蛋白 | 第18-19页 |
| ·生命周期 | 第19-20页 |
| ·抗原变异 | 第20页 |
| ·维持和进化途径 | 第20-21页 |
| 3. 发病机理 | 第21-27页 |
| ·自然宿主中的感染和传播 | 第21-22页 |
| ·病理学 | 第22-23页 |
| ·血凝素蛋白是毒力的决定因素 | 第23页 |
| ·高度裂解能力的血凝素蛋白和病毒毒力的基因序列特征 | 第23-25页 |
| ·负责HA裂解的宿主蛋白酶 | 第25-27页 |
| ·产生高毒力病毒的机制 | 第27页 |
| 4. 宿主范围限制的分子决定机制 | 第27-29页 |
| ·HA | 第28页 |
| ·NA | 第28-29页 |
| ·其他基因产物 | 第29页 |
| 5. 禽流感检测方法 | 第29-33页 |
| ·病原学检测 | 第29页 |
| ·血清学检测 | 第29-31页 |
| ·单链构型多态性(SSCP) | 第31页 |
| ·核酸扩增方法 | 第31-32页 |
| ·基因芯片 | 第32-33页 |
| 6 展望 | 第33-34页 |
| 第二章 量子点技术的研究进展 | 第34-48页 |
| 引言 | 第34-35页 |
| 1. 量子点特性 | 第35-37页 |
| ·量子点的组成 | 第35-36页 |
| ·量子点的结构 | 第36-37页 |
| 2. 量子点的优越性 | 第37-39页 |
| ·量子点具有广泛的激发光谱 | 第37页 |
| ·狭窄对称的量子点荧光谱峰 | 第37-38页 |
| ·量子点的颜色可控性 | 第38页 |
| ·量子点荧光稳定性 | 第38页 |
| ·量子点的生物相容性 | 第38-39页 |
| ·量子点高双光子吸收截面 | 第39页 |
| 3 量子点的合成 | 第39-41页 |
| ·量子点有机相中的合成 | 第39-40页 |
| ·量子点水溶液中的合成 | 第40-41页 |
| ·核-壳型量子点的制备 | 第41页 |
| 4 量子点的修饰 | 第41-43页 |
| 5 量子点的生物标记 | 第43-44页 |
| ·标记方法 | 第43页 |
| ·蛋白的量子点标记 | 第43-44页 |
| ·核酸的量子点标记 | 第44页 |
| 6 量子点的应用 | 第44-47页 |
| ·活细胞示踪应用 | 第44-45页 |
| ·活体动物的标记示踪 | 第45-46页 |
| ·核酸分子生物学、蛋白质分析方面的应用 | 第46页 |
| ·信号转导方面的应用 | 第46-47页 |
| ·微生物检测方面的应用 | 第47页 |
| 7 量子点技术的问题 | 第47-48页 |
| 第三章 基于量子点技术的禽流感病毒核酸检测 | 第48-66页 |
| 1. 前言 | 第48-49页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第49-56页 |
| ·材料与试剂 | 第49-52页 |
| ·禽流感病毒毒株及病毒培养载体 | 第49页 |
| ·血凝实验 | 第49-50页 |
| ·RNA提取 | 第50页 |
| ·分子杂交试剂及缓冲液 | 第50页 |
| ·核酸探针及寡核苷酸序列 | 第50-51页 |
| ·实验仪器设备 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·禽流感病毒的培养(鸡胚培养法) | 第52-53页 |
| ·血凝试验测定病毒效价 | 第53-54页 |
| ·提取禽流感病毒RNA | 第54页 |
| ·RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| ·杂交试验 | 第55-56页 |
| 3. 实验结果 | 第56-63页 |
| ·检测原理 | 第56-57页 |
| ·病毒RNA样品 | 第57页 |
| ·量子点与核酸探针偶联 | 第57-58页 |
| ·实验体系的初步验证 | 第58-60页 |
| ·荧光共聚焦显微镜验证检测体系 | 第60-61页 |
| ·荧光光谱检测 | 第61-63页 |
| ·病毒RNA的定量 | 第63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| 第四章 基于量子点技术的禽流感病毒免疫检测 | 第66-94页 |
| 1. 前言 | 第66页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第66-83页 |
| ·材料与试剂 | 第66-72页 |
| ·禽流感病毒毒株及病毒培养载体(同第三章2.1.1) | 第66页 |
| ·血凝实验(同第三章2.1.2) | 第66-67页 |
| ·质粒、菌株及基本培养基 | 第67-68页 |
| ·基因扩增 | 第68页 |
| ·质粒提取 | 第68页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第68页 |
| ·DNA片段回收 | 第68页 |
| ·外源片段与载体的连接 | 第68-69页 |
| ·酶切 | 第69页 |
| ·蛋白质纯化用试剂 | 第69页 |
| ·蛋白质浓缩 | 第69页 |
| ·SDS—PAGE电泳 | 第69-70页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第70-71页 |
| ·Western blot | 第71-72页 |
| ·实验仪器 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-83页 |
| ·禽流感病毒的培养(同第三章2.2.1) | 第72页 |
| ·血凝试验测定病毒效价(同第三章2.2.2) | 第72页 |
| ·设计引物 | 第72页 |
| ·PCR扩增HA及NA基因片段 | 第72-73页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第73页 |
| ·T载体的连接、转化与扩增 | 第73-74页 |
| ·质粒的提取 | 第74-75页 |
| ·酶切鉴定 | 第75页 |
| ·克隆测序 | 第75页 |
| ·目的片段与表达载体的连接、转化与扩增 | 第75-76页 |
| ·目的蛋白质的原核表达 | 第76页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第76-77页 |
| ·目的抗原蛋白的初步纯化 | 第77-78页 |
| ·目的抗原蛋白的进一步纯化与复性 | 第78-79页 |
| ·目的抗原蛋白的浓缩与定量 | 第79-80页 |
| ·HA、NA抗原多克隆抗体制备 | 第80-81页 |
| ·Western Blot | 第81-82页 |
| ·IgG纯化 | 第82页 |
| ·量子点标记IgG | 第82-83页 |
| ·病毒的检测 | 第83页 |
| 3. 实验结果 | 第83-92页 |
| ·检测原理 | 第83-84页 |
| ·抗原序列的确定 | 第84-87页 |
| ·抗原蛋白表达 | 第87-89页 |
| ·克隆鉴定 | 第87-88页 |
| ·蛋白的表达及纯化 | 第88-89页 |
| ·多克隆抗体的制备与IgG纯化 | 第89-90页 |
| ·量子点标记IgG | 第90-92页 |
| ·实际病毒样品的检测 | 第92页 |
| 4. 讨论 | 第92-94页 |
| 研究总结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-114页 |
| 博士期间发表的论文 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |