| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 核盘菌的研究进展 | 第11-13页 |
| ·核盘菌及其危害 | 第11页 |
| ·作物菌核病的防治 | 第11-13页 |
| ·抗病育种 | 第12页 |
| ·农业栽培措施 | 第12页 |
| ·化学防治 | 第12页 |
| ·生物防治 | 第12-13页 |
| 2 盾壳霉的研究进展 | 第13-16页 |
| ·盾壳霉的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·盾壳霉的生物防治作用研究 | 第14-15页 |
| ·盾壳霉的分生孢子研究进展 | 第15-16页 |
| 3 农杆菌介导的真菌遗传转化研究 | 第16-18页 |
| 4 反向PCR的研究进展 | 第18-19页 |
| 5 腺苷脱氨酶的研究进展 | 第19-20页 |
| 6 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 盾壳霉T-DNA插入体库的建立及突变体相关基因的克隆 | 第21-38页 |
| 1 材料与方法 | 第21-27页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·抗生素及其他试剂 | 第22-23页 |
| ·酶、试剂盒及其它试剂 | 第23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| ·农杆菌介导转化盾壳霉 | 第23-24页 |
| ·突变体的保存、筛选及分类 | 第24页 |
| ·5株突变体DNA的提取 | 第24页 |
| ·反向PCR克隆T-DNA两侧翼序列 | 第24-25页 |
| ·目的片段的回收及纯化 | 第25页 |
| ·回收产物与克隆载体连接 | 第25页 |
| ·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的筛选及PCR鉴定 | 第26页 |
| ·克隆序列分析 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-33页 |
| ·突变体的保存、筛选及分类 | 第27-28页 |
| ·5株产孢异常突变体的表型 | 第28-29页 |
| ·反向PCR克隆T-DNA插入位点侧端DNA | 第29-30页 |
| ·相关基因的生物信息学分析 | 第30-33页 |
| 3 结论和讨论 | 第33-38页 |
| 第三章 盾壳霉突变体ZS-1TN250菌株的研究 | 第38-57页 |
| 1 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试验菌株 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·质粒抽提用溶液 | 第38-39页 |
| ·Southern杂交用溶液及试剂 | 第39页 |
| ·其它溶液及试剂 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-45页 |
| ·突变体菌株ZS-1TN250的形态特征观察和生长速度测定 | 第39-40页 |
| ·ZS-1TN250生物产量测定 | 第40页 |
| ·突变体菌株ZS-1TN250寄生致腐核盘菌菌核能力测定 | 第40页 |
| ·ZS-1TN250产抗生物质能力测定 | 第40-41页 |
| ·Southern杂交验证突变体中T-DNA的插入拷贝数 | 第41-42页 |
| ·反向PCR克隆T-DNA插入位点侧端DNA | 第42页 |
| ·在cDNA文库中扩增3'末端 | 第42-43页 |
| ·ZS-1TN250相关基因的生物学信息分析 | 第43页 |
| ·ZS-1和ZS-1TN250菌株总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR验证表达情况 | 第44页 |
| ·酶比色法测定腺苷脱氨酶活性 | 第44页 |
| ·数据统计分析 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-55页 |
| ·ZS-1TN250菌株的形态特征 | 第45-47页 |
| ·ZS-1TN250菌丝生长速度的测定 | 第47页 |
| ·ZS-1TN250的生物产量测定 | 第47-48页 |
| ·ZS-1TN250寄生致腐核盘菌菌核能力的测定 | 第48-49页 |
| ·ZS-1TN250产抗生物质能力测定 | 第49-50页 |
| ·ZS-1TN250在PDA和MCD培养基上均没有产抗真菌物质能力 | 第49页 |
| ·ZS-1TN250具有有产抗细菌物质能力 | 第49-50页 |
| ·Southern杂交分析ZS-1TN250中T-DNA插入为单拷贝 | 第50-51页 |
| ·反向PCR克隆T-DNA插入位点侧端DNA | 第51-52页 |
| ·CMADA全长序列分析 | 第52-53页 |
| ·在cDNA文库中扩增3'末端 | 第53-54页 |
| ·CMADA基因在ZS-1TN250和ZS-1中的表达 | 第54-55页 |
| ·酶比色法测定腺苷脱氨酶活性 | 第55页 |
| 3 结论和讨论 | 第55-57页 |
| 结论与展望 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
