摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
上篇 文献综述 水稻黄单胞菌中tal基因的研究进展 | 第10-25页 |
1 tal基因的发现与分布 | 第11-13页 |
2 TALEs的结构 | 第13页 |
3 TALEs与靶标识别位点结合密码的破解 | 第13-15页 |
4 tal基因的功能 | 第15-20页 |
4.1 无毒性功能 | 第15-17页 |
4.2 毒性功能 | 第17-19页 |
4.3 先天免疫抑制功能 | 第19-20页 |
5 蛋白与DNA互作的研究方法 | 第20-22页 |
5.1 凝胶阻滞实验 | 第20-21页 |
5.2 DNase Ⅰ足迹试验 | 第21页 |
5.3 染色质免疫沉淀技术 | 第21页 |
5.4 农杆菌介导的烟草瞬时表达 | 第21-22页 |
6 TALEs的应用 | 第22-24页 |
6.1 不同病原菌中TAL效应蛋白的鉴定 | 第22页 |
6.2 寄主上抗病基因及感病基因的鉴定 | 第22-23页 |
6.3 基因修饰获得抗性 | 第23-24页 |
7 存在的问题及展望 | 第24页 |
8 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
下篇 研究内容 | 第25-62页 |
第一章 水稻白叶枯菌JXOV中tal17.5基因的克隆 | 第26-42页 |
1 材料与方法 | 第27-34页 |
1.1 菌株质粒 | 第27-28页 |
1.2 培养基、培养条件和抗生素 | 第28-29页 |
1.3 质粒提取、酶切回收及纯化 | 第29-31页 |
1.4 连接 | 第31页 |
1.5 转座子Tn5插入法辅助测序 | 第31-32页 |
1.6 连接产物的转化 | 第32-33页 |
1.7 水稻品种与接种方法 | 第33-34页 |
2 结果与分析 | 第34-39页 |
2.1 JXOV基因文库中7号克隆的选择 | 第34-35页 |
2.2 JXOV基因文库中7号克隆的致病力测定 | 第35-36页 |
2.3 tal17.5基因克隆 | 第36-39页 |
3 讨论 | 第39-42页 |
第二章 tal17.5基因功能的研究 | 第42-52页 |
1 材料与方法 | 第43-45页 |
1.1 所用材料 | 第43页 |
1.2 接种方法 | 第43页 |
1.3 生长速率的测定 | 第43-44页 |
1.4 细菌含菌量的测定 | 第44页 |
1.5 过敏反应 | 第44页 |
1.6 微过敏反应 | 第44页 |
1.7 活性氧检测 | 第44页 |
1.8 离子电导率 | 第44-45页 |
1.9 胼胝质沉积 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-50页 |
2.1 PXO99~A/tal17.5在寄主水稻上的功能研究 | 第45-47页 |
2.2 PXO99~A/tal17.5在非寄主本氏烟上的功能研究 | 第47-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
第三章 TAL17.5与寄主上靶标位点的结合 | 第52-62页 |
1 材料与方法 | 第53-57页 |
1.1 所用材料 | 第53-54页 |
1.2 引物序列 | 第54页 |
1.3 Tal17.5靶标基因的预测 | 第54-55页 |
1.4 表达载体的构建 | 第55页 |
1.5 报告载体的构建 | 第55页 |
1.6 农杆菌感受态细胞的制备与电转化 | 第55-56页 |
1.7 烟草注射菌液准备与注射 | 第56页 |
1.8 GUS组织化学染色 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-60页 |
2.1 Tal17.5与水稻上靶标基因的结合 | 第57-58页 |
2.2 Tal17.5与靶标的结合 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
全文总结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
本论文研究受资助基金 | 第72页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第72页 |