| 个人简历 | 第3-8页 |
| 中英文缩略词表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-15页 |
| ABSTRACT | 第15-21页 |
| 前言 | 第22-27页 |
| 第一章 DMDD对高糖高脂饮食联合STZ诱导的DKD小鼠的影响 | 第27-74页 |
| 1 实验材料 | 第27-30页 |
| 1.1 实验动物与饲料 | 第27-28页 |
| 1.2 主要药品及试剂 | 第28-29页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-44页 |
| 2.1 药物和试剂配制 | 第30-31页 |
| 2.1.1 DMDD溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.1.2 柠檬酸缓冲液的配制 | 第31页 |
| 2.1.3 STZ配制 | 第31页 |
| 2.2 动物分组及建模 | 第31页 |
| 2.3 给药干预 | 第31-32页 |
| 2.4 一般指标测定 | 第32页 |
| 2.5 葡萄糖耐量和胰岛素耐量试验 | 第32-33页 |
| 2.6 样品的采集和处理 | 第33页 |
| 2.7 生物化学检测 | 第33-34页 |
| 2.8 Elisa测定相关指标 | 第34-35页 |
| 2.9 石蜡切片 | 第35页 |
| 2.10 苏木精-伊红(H&E)染色 | 第35-36页 |
| 2.11 Masson染色 | 第36-37页 |
| 2.12 肾组织的透射电镜观察 | 第37页 |
| 2.13 免疫组织化学法测定肾组织中相关蛋白表达 | 第37-38页 |
| 2.14 RT-PCR法检测mRNA表达 | 第38-42页 |
| 2.15 Western-blot检测肾组织相关蛋白表达 | 第42-44页 |
| 2.16 统计学分析 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-68页 |
| 3.1 小鼠一般情况 | 第44页 |
| 3.2 DMDD对小鼠体重和肾重的影响 | 第44-46页 |
| 3.3 DMDD对小鼠血脂的影响 | 第46-48页 |
| 3.4 DMDD对小鼠血糖的影响 | 第48-50页 |
| 3.5 DMDD对葡萄糖耐量及胰岛素耐量的影响 | 第50-51页 |
| 3.6 DMDD对血清胰岛素的影响 | 第51-53页 |
| 3.7 DMDD对小鼠肾功能的影响 | 第53-56页 |
| 3.8 DMDD对糖尿病小鼠肾脏组织病理学的影响 | 第56-60页 |
| 3.8.1 肾组织HE染色结果 | 第56-58页 |
| 3.8.2 肾组织光镜Masson染色结果 | 第58-59页 |
| 3.8.3 肾组织透射电镜结果 | 第59-60页 |
| 3.9 肾组织相关蛋白的免疫组化结果 | 第60-64页 |
| 3.9.1 TLR4的蛋白表达 | 第60-61页 |
| 3.9.2 TGFβ1蛋白表达 | 第61-62页 |
| 3.9.3 BAMBI蛋白表达 | 第62-63页 |
| 3.9.4 Smad2/3蛋白表达 | 第63-64页 |
| 3.10 RT-PCR结果 | 第64-66页 |
| 3.11 Western-blot结果 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-73页 |
| 5 小结 | 第73-74页 |
| 第二章 DMDD对高糖诱导的HK-2细胞转分化的保护作用 | 第74-105页 |
| 1 实验材料 | 第74-78页 |
| 1.1 细胞 | 第74-75页 |
| 1.2 药物 | 第75页 |
| 1.3 主要试剂 | 第75-77页 |
| 1.4 主要仪器和设备 | 第77-78页 |
| 2 实验方法 | 第78-89页 |
| 2.1 药物和试剂配制 | 第78-79页 |
| 2.1.1 DMDD储备液及其系列浓度的配制 | 第78页 |
| 2.1.2 TAK-242溶液的配制 | 第78页 |
| 2.1.3 分离胶和浓缩胶配制 | 第78-79页 |
| 2.2 细胞培养操作 | 第79-80页 |
| 2.2.1 细胞换液 | 第79页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第79页 |
| 2.2.3 细胞计数 | 第79-80页 |
| 2.2.4 细胞冻存 | 第80页 |
| 2.2.5 细胞复苏 | 第80页 |
| 2.3 慢病毒转染 | 第80页 |
| 2.4 HK-2细胞转分化模型的建立 | 第80-81页 |
| 2.5 划痕实验观察HK-2细胞迁徙情况 | 第81页 |
| 2.6 CCK-8法确定DMDD剂量 | 第81-82页 |
| 2.7 ELISA法测定相关因子 | 第82页 |
| 2.8 HK-2细胞凋亡检测 | 第82-83页 |
| 2.9 免疫荧光 | 第83-84页 |
| 2.10 RT-PCR法检测mRNA表达水平 | 第84-87页 |
| 2.11 Western-blot检测细胞相关蛋白表达 | 第87-89页 |
| 2.12 统计学分析 | 第89页 |
| 3 研究结果 | 第89-101页 |
| 3.1 确定DMDD给药浓度 | 第89-90页 |
| 3.2 高糖对HK-2细胞形态的影响 | 第90页 |
| 3.3 高糖对HK-2细胞迁移的影响 | 第90-91页 |
| 3.4 高糖对HK-2细胞TLR4、BAMBI和p-Smad2/3的表达的影响 | 第91-92页 |
| 3.5 高糖刺激HK-2细胞EMT | 第92-93页 |
| 3.6 DMDD抑制高糖诱导的HK-2细胞EMT | 第93-95页 |
| 3.7 DMDD通过下调TLR4 抑制TGF-β/Smad信号减少EMT | 第95-96页 |
| 3.8 DMDD通过TLR4-BAMBI-TGFβ/Smad信号通路介导HK-2细胞发生EMT | 第96-99页 |
| 3.8.1 慢病毒转染情况 | 第97页 |
| 3.8.2 DMDD对BAMBI过表达HK-2细胞EMT的影响 | 第97-98页 |
| 3.8.3 DMDD对BAMBI沉默HK-2细胞EMT的影响 | 第98-99页 |
| 3.9 DMDD对炎症因子的影响 | 第99-100页 |
| 3.10 DMDD对HK-2细胞凋亡的影响 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-104页 |
| 5 小结 | 第104-105页 |
| 全文总结 | 第105-107页 |
| 综述 | 第107-121页 |
| 参考文献 | 第121-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第141-143页 |
