摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1.前言 | 第11-20页 |
1.1 课题研究背景 | 第11-12页 |
1.2 .研究现状 | 第12-18页 |
1.2.1 LPS的研究现状 | 第12-13页 |
1.2.2 牛磺酸的研究现状 | 第13页 |
1.2.3 肠道免疫屏障的研究现状 | 第13-16页 |
1.2.4 与LPS相关信号通路的研究现状 | 第16-17页 |
1.2.5 MAPK信号通路的研究现状 | 第17-18页 |
1.3 .本研究目的与意义 | 第18-20页 |
2.试验材料与方法 | 第20-31页 |
2.1 试验材料 | 第20-24页 |
2.1.1 材料与方法 | 第20-21页 |
2.1.2 试验设计及饲养管理 | 第21页 |
2.1.3 试验药品与试剂 | 第21-23页 |
2.1.4 试验选用器材 | 第23-24页 |
2.2 试验样品的采集与处理 | 第24-25页 |
2.2.1 血样采集处理 | 第24页 |
2.2.2 肠道取样处理 | 第24-25页 |
2.3 检测指标 | 第25页 |
2.3.1 血清中免疫球蛋白和致炎性因子含量测定 | 第25页 |
2.4 免疫组化法观察回肠中SIGA数量变化 | 第25-26页 |
2.5 用QRT-PCR法检测回肠中炎性因子表达水平 | 第26-29页 |
2.5.1 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
2.5.2 回肠组织总RNA的提取 | 第27页 |
2.5.3 总RNA纯度分析 | 第27页 |
2.5.4 总RNA的反转录 | 第27-28页 |
2.5.5 DNaseI消化及cDNA合成 | 第28-29页 |
2.5.6 荧光定量PCR | 第29页 |
2.5.7 基因表达与定量计算与假设 | 第29页 |
2.5.8 数据统计分析 | 第29页 |
2.6 WESTERN-BLOTTING法检测肠道组织中炎性相关信号通路 | 第29-31页 |
2.6.1 各组分及配方 | 第29-30页 |
2.6.2 回肠组织蛋白的提取 | 第30页 |
2.6.3 Bradford法蛋白浓度的测定 | 第30-31页 |
3.试验结果与分析 | 第31-43页 |
3.1 一般情况观察 | 第31页 |
3.2 回肠表现观察 | 第31-32页 |
3.3 血清中免疫球蛋白和致炎性因子含量测定 | 第32-33页 |
3.3.1 血清中免疫球蛋白含量 | 第32页 |
3.3.2 血清中致炎性因子含量 | 第32-33页 |
3.4 仔猪回肠组织中SIGA的数量 | 第33-35页 |
3.5 回肠中致炎性因子MRNA表达量 | 第35-37页 |
3.5.1 TNF-α中mRNA表达量 | 第35页 |
3.5.2 IL-6中mRNA表达量 | 第35-36页 |
3.5.3 IL-12中mRNA表达量 | 第36-37页 |
3.6 TOLL样受体TLR2、TLR4基因MRNA表达水平 | 第37-38页 |
3.6.1 Toll样受体TLR2基因mRNA表达量 | 第37页 |
3.6.2 Toll样受体中TLR4基因mRNA表达量 | 第37-38页 |
3.7 TLR4信号通路中NF-ΚB信号通路中部分蛋白表达量 | 第38-43页 |
3.7.1 NF-κB信号通路中的IκBα蛋白表达量 | 第38-39页 |
3.7.2 MAPK信号通路中的p38蛋白表达量 | 第39-40页 |
3.7.3 MAPK信号通路中的p38磷酸化蛋白表达量 | 第40页 |
3.7.4 MAPK信号通路中的ERK蛋白表达量 | 第40-41页 |
3.7.5 MAPK信号通路中的P-ERK蛋白表达量 | 第41-43页 |
4.讨论 | 第43-46页 |
4.1 牛磺酸对LPS刺激下仔猪血清和组织中免疫球蛋白数量变化影响 | 第43页 |
4.2 牛磺酸对LPS刺激下仔猪组织中炎症因子数量变化 | 第43-44页 |
4.3 牛磺酸对LPS刺激下TLR4信号通路蛋白表达量影响 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51-52页 |