| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 中英文对照表 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 实验材料 | 第16-23页 |
| 1.1 细胞株 | 第16页 |
| 1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.4 试剂配制 | 第18-22页 |
| 1.5 实验动物 | 第22-23页 |
| 实验方法 | 第23-40页 |
| 1.1 构建质粒 | 第23-30页 |
| 1.1.1 PCR引物设计 | 第23页 |
| 1.1.2 细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 1.1.3 逆转录反应 | 第24页 |
| 1.1.4 PCR扩增 | 第24-25页 |
| 1.1.5 PCR扩增所得产物和载体p VITRO2的酶切 | 第25-26页 |
| 1.1.6 酶切产物胶的回收 | 第26页 |
| 1.1.7 靶基因片段与载体的连接 | 第26页 |
| 1.1.8 制备DH5a感受态细胞 | 第26页 |
| 1.1.9 转化 | 第26-27页 |
| 1.1.10 质粒提取 | 第27-28页 |
| 1.1.11 重组质粒酶切鉴定 | 第28页 |
| 1.1.12 无内毒素质粒DNA抽提 | 第28-30页 |
| 1.2 细胞实验 | 第30-38页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第30-32页 |
| 1.2.1.1 细胞培养用品的清洗与消毒灭菌 | 第30页 |
| 1.2.1.2 细胞培养 | 第30页 |
| 1.2.1.3 细胞传代 | 第30-31页 |
| 1.2.1.4 细胞冻存 | 第31页 |
| 1.2.1.5 细胞的复苏 | 第31-32页 |
| 1.2.2 质粒转染 | 第32页 |
| 1.2.3 RT-PCR检测目的基因表达 | 第32-34页 |
| 1.2.4 Western blot检测细胞 β 防御素蛋白水平的表达 | 第34-36页 |
| 1.2.5 MTT法检测细胞增殖抑制率 | 第36-37页 |
| 1.2.6.细胞凋亡检测 | 第37页 |
| 1.2.7 MBD2活性验证 | 第37-38页 |
| 1.3 动物实验 | 第38-39页 |
| 1.3.1 成瘤试验 | 第38-39页 |
| 1.3.2 Cr51释放法检测肿瘤特异性CTL的体外杀伤活性 | 第39页 |
| 1.4 统计学分析 | 第39-40页 |
| 实验结果 | 第40-49页 |
| 1.1 载体的选取 | 第40页 |
| 1.2 质粒大提后双酶切鉴定 | 第40页 |
| 1.3 质粒转染CT26肿瘤细胞效率 | 第40-41页 |
| 1.4 RT-PCR检测目的基因表达 | 第41-42页 |
| 1.5 Western blot检测细胞上清中β防御素在蛋白水平的表达 | 第42页 |
| 1.6 MTT细胞生长抑制分析 | 第42-43页 |
| 1.7 细胞凋亡检测 | 第43-45页 |
| 1.8 MBD2活性验证 | 第45-46页 |
| 1.9 成瘤性试验研究 | 第46-47页 |
| 1.10 Cr51释放法检测肿瘤特异性CTL的体外杀伤活性 | 第47-49页 |
| 讨论 | 第49-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 综述 | 第61-68页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第69页 |
