| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-37页 |
| 第一章 反刍动物妊娠建立的研究进展 | 第16-26页 |
| 1.1 黄体溶解机制 | 第17-18页 |
| 1.2 孕酮调控子宫内膜功能和孕体伸长作用 | 第18-20页 |
| 1.3 干扰素-TAU的发现、表达及功能 | 第20-23页 |
| 1.3.1 干扰素-tau的抗溶黄体功能 | 第20-21页 |
| 1.3.2 干扰素-tau调控子宫内膜功能和孕体伸长作用 | 第21-22页 |
| 1.3.3 子宫内膜上的经典I型干扰素刺激基因 | 第22-23页 |
| 1.3.4 子宫内膜非经典IFN-τ刺激基因 | 第23页 |
| 1.4 反刍动物子宫内膜分泌产物在妊娠建立的作用 | 第23-24页 |
| 1.5 前列腺素调控子宫内膜功能和孕体伸长作用 | 第24-26页 |
| 第二章 内质网应激和自噬 | 第26-37页 |
| 2.1 内质网稳态 | 第26-27页 |
| 2.2 未折叠蛋白反应 | 第27-29页 |
| 2.3 内质网相关降解 | 第29-31页 |
| 2.4 UPR信号通路与生殖生理学 | 第31-32页 |
| 2.5 自噬 | 第32-33页 |
| 2.6 自噬与胚胎发育 | 第33-34页 |
| 2.7 内质网应激和自噬 | 第34-36页 |
| 2.8 CREBRF的研究进展 | 第36-37页 |
| 第二部分 实验研究 | 第37-98页 |
| 第三章 激素对山羊子宫内膜容受性形成的影响 | 第37-52页 |
| 3.1 材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-43页 |
| 3.2.1 永生化山羊子宫内膜上皮(EECs)和永生化山羊胎盘滋养层细胞(GTCs)的培养 | 第38-39页 |
| 3.2.2 IFN-τ使用剂量的筛选 | 第39页 |
| 3.2.3 RNA提取和Real time PCR检测 | 第39-40页 |
| 3.2.4 激素处理对EECs的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.5 细胞全蛋白的提取 | 第42页 |
| 3.2.6 Western Blot | 第42-43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 IFN-τ使用剂量的筛选 | 第43-44页 |
| 3.3.2 激素处理对促进孕体伸长基因表达的影响 | 第44页 |
| 3.3.3 激素处理对前列腺素分泌和合成酶表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.4 激素处理对细胞粘附能力的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.5 激素处理对EECs中 UPR通路的影响 | 第46-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 3.5 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 内质网应激在激素调控山羊子宫内膜上皮细胞功能中的作用及其机制 | 第52-76页 |
| 4.1 材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第52-53页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第53页 |
| 4.2 方法 | 第53-59页 |
| 4.2.1 永生化山羊子宫内膜上皮(EECs)和永生化山羊胎盘滋养层细胞(GTCs)的培养 | 第53-54页 |
| 4.2.2 内质网应激激活剂、抑制剂或mTOR抑制剂对EECs的处理 | 第54页 |
| 4.2.3 RNA提取和Real time PCR检测 | 第54-55页 |
| 4.2.4 细胞全蛋白的提取和Western Blot | 第55页 |
| 4.2.5 细胞免疫荧光 | 第55-56页 |
| 4.2.6 前列腺素分泌水平的检测 | 第56页 |
| 4.2.7细胞粘附实验 | 第56页 |
| 4.2.8 山羊ATF6 基因shRNA慢病毒载体构建 | 第56-58页 |
| 4.2.9 慢病毒的包装和干扰效率检测 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-73页 |
| 4.3.1 TG或4-PBA对内质网应激标志基因的影响 | 第59-61页 |
| 4.3.2 TG或4-PBA对子宫内膜上皮细胞功能的影响 | 第61-63页 |
| 4.3.3 shATF6 干扰载体鉴定 | 第63-64页 |
| 4.3.4 包装质粒的鉴定 | 第64-65页 |
| 4.3.5 shATF6 慢病毒包装 | 第65页 |
| 4.3.6 shATF6 慢病毒滴度检测 | 第65-66页 |
| 4.3.7 shATF6 干扰效率的检测 | 第66-67页 |
| 4.3.8 干扰ATF6 对自噬的影响 | 第67-68页 |
| 4.3.9 干扰ATF6 对子宫内膜上皮细胞功能的影响 | 第68-70页 |
| 4.3.10 雷帕霉素预处理对shATF6 EECs自噬的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.11 雷帕霉素预处理对shATF6 EECs细胞功能的影响 | 第71-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-75页 |
| 4.5 小结 | 第75-76页 |
| 第五章 CREB3 调节因子在激素调控山羊子宫内膜上皮细胞功能的机制研究 | 第76-98页 |
| 5.1 材料 | 第76-77页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第76-77页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第77页 |
| 5.2 方法 | 第77-80页 |
| 5.2.1 永生化山羊子宫内膜上皮(EECs)和永生化山羊胎盘滋养层细胞(GTCs)的培养 | 第77-78页 |
| 5.2.2 雷帕霉素或氯喹对EECs的处理 | 第78页 |
| 5.2.3 RNA提取和Real time PCR检测 | 第78-79页 |
| 5.2.4 细胞全蛋白的提取和Western Blot | 第79页 |
| 5.2.5 细胞免疫荧光 | 第79页 |
| 5.2.6 前列腺素分泌水平的检测 | 第79页 |
| 5.2.7细胞粘附实验 | 第79页 |
| 5.2.8 山羊CREBRF基因shRNA慢病毒载体构建 | 第79页 |
| 5.2.9 慢病毒的包装和干扰效率检测 | 第79-80页 |
| 5.2.10 细胞活力检测 | 第80页 |
| 5.2.11 细胞周期检测 | 第80页 |
| 5.2.12 细胞增殖检测分析 | 第80页 |
| 5.3 结果与分析 | 第80-95页 |
| 5.3.1 激素处理对CREBRF和自噬的影响 | 第80-81页 |
| 5.3.2 shCREBRF干扰载体鉴定 | 第81-82页 |
| 5.3.3 shCREBRF慢病毒包装 | 第82-83页 |
| 5.3.4 shCREBRF慢病毒滴度检测 | 第83页 |
| 5.3.5 shCREBRF干扰效率的检测 | 第83-85页 |
| 5.3.6 干扰CREBRF对 EECs细胞增殖和周期的影响 | 第85-87页 |
| 5.3.7 干扰CREBRF对 mTOR通路和自噬的影响 | 第87-88页 |
| 5.3.8 干扰CREBRF对子宫内膜上皮细胞功能的影响 | 第88-90页 |
| 5.3.9 雷帕霉素预处理对shCREBRF EECs mTOR和自噬信号通路的检测 | 第90-91页 |
| 5.3.10 雷帕霉素预处理对shCREBRF EECs细胞功能的影响 | 第91-93页 |
| 5.3.11 氯喹预处理对shCREBRF EECs细胞功能的影响 | 第93-95页 |
| 5.4 讨论 | 第95-96页 |
| 5.5 小结 | 第96-98页 |
| 结论 | 第98-101页 |
| 创新点和不足 | 第99-100页 |
| 下一步研究计划 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-115页 |
| 缩略词 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简介 | 第118页 |
