| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 乳腺癌现状概述 | 第12页 |
| 1.1.1 乳腺癌概述 | 第12页 |
| 1.1.2 乳腺癌治疗现状 | 第12页 |
| 1.2 青篙素及其衍生物 | 第12-15页 |
| 1.2.1 青篙素简介 | 第13页 |
| 1.2.2 青篙素衍生物 | 第13-15页 |
| 1.3 拼合原理 | 第15-16页 |
| 1.3.1 成盐拼合 | 第15-16页 |
| 1.3.2 成酯拼合 | 第16页 |
| 1.3.3 非盐非酯拼合 | 第16页 |
| 1.4 睾酮简述 | 第16-17页 |
| 1.5 组织蛋白酶 | 第17-18页 |
| 1.5.1 组织蛋白酶简述 | 第17页 |
| 1.5.2 组织蛋白酶K (Cathepsin K) | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的、内容、创新点和意义 | 第18-20页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第18页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第18页 |
| 1.6.3 研究创新点 | 第18-19页 |
| 1.6.4 研究意义 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第20页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.3 常用试剂 | 第20-22页 |
| 2.2 仪器和设备 | 第22-23页 |
| 2.3 实验试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.4 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.4.1 复苏细胞 | 第25页 |
| 2.4.2 细胞传代 | 第25页 |
| 2.4.3 细胞冻存 | 第25页 |
| 2.4.4 质粒扩增和提取 | 第25-26页 |
| 2.4.5 细胞瞬时转染 | 第26页 |
| 2.4.6 细胞总蛋白提取和定量 | 第26-27页 |
| 2.4.7 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳和蛋白免疫印迹实验(Western Blot) | 第27-28页 |
| 2.4.8 提取细胞RNA以及反转录PCR | 第28-30页 |
| 第3章 体外实验研究青蒿素衍生物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第30-37页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第30-31页 |
| 3.2.2 试剂以及配制 | 第31页 |
| 3.2.3 主要使用设备 | 第31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.3.1 青蒿素衍生物对乳腺癌细胞增殖影响的研究 | 第31页 |
| 3.3.2 流式细胞术检测青蒿素衍生物对细胞凋亡水平的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 实验结果 | 第32-36页 |
| 3.4.1 SM934-睾酮抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和SK-BR-3的增殖能力 | 第32-33页 |
| 3.4.2 SM934-睾酮孪药对乳腺癌细胞的增殖抑制具有时间依赖性 | 第33-34页 |
| 3.4.3 SM934-睾酮孪药对人正常肝细胞增殖无明显影响 | 第34页 |
| 3.4.4 SM934-睾酮能够促进乳腺癌细胞的凋亡 | 第34-36页 |
| 3.5 讨论 | 第36-37页 |
| 第4章 体外实验研究青蒿素衍生物对乳腺癌细胞转移能力的影响 | 第37-46页 |
| 4.1 引言 | 第37-38页 |
| 4.2 实验材料 | 第38页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第38页 |
| 4.2.2 试剂 | 第38页 |
| 4.2.3 主要实验设备 | 第38页 |
| 4.3 实验方法 | 第38-39页 |
| 4.3.1 划痕实验 | 第38-39页 |
| 4.3.2 Transwell迁移实验 | 第39页 |
| 4.3.3 Transwell侵袭实验 | 第39页 |
| 4.4 实验结果 | 第39-45页 |
| 4.4.1 SM934-睾酮抑制乳腺癌细胞的运动能力 | 第39-41页 |
| 4.4.2 SM934-睾酮抑制乳腺癌细胞的迁移能力 | 第41-43页 |
| 4.4.3 SM934-睾酮抑制乳腺癌细胞的侵袭能力 | 第43-45页 |
| 4.5 讨论 | 第45-46页 |
| 第5章 计算机辅助预测孪药SM934-睾酮作用靶标及其验证 | 第46-55页 |
| 5.1 引言 | 第46页 |
| 5.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 5.2.1 细胞株 | 第46页 |
| 5.2.2 试剂盒和主要试剂 | 第46页 |
| 5.2.3 主要实验设备 | 第46-47页 |
| 5.3 实验方法 | 第47-48页 |
| 5.3.1 计算机辅助靶标预测 | 第47页 |
| 5.3.2 分子对接 | 第47页 |
| 5.3.3 靶标基因mRNA表达检测 | 第47页 |
| 5.3.4 靶标基因蛋白表达水平检测 | 第47-48页 |
| 5.4 实验结果 | 第48-53页 |
| 5.4.1 孪药靶标预测结果 | 第48页 |
| 5.4.2 计算机模拟药物与靶标结合模式 | 第48-51页 |
| 5.4.3 SM934-睾酮能够调控降低Cathepsin K mRNA表达水平 | 第51-52页 |
| 5.4.4 SM934-睾酮能够调控降低Cathepsin K蛋白表达水平 | 第52-53页 |
| 5.5 讨论 | 第53-55页 |
| 第6章 孪药对乳腺癌细胞增殖转移抑制的分子机制研究 | 第55-69页 |
| 6.1 引言 | 第55页 |
| 6.2 实验材料 | 第55-56页 |
| 6.2.1 实验细胞 | 第55页 |
| 6.2.2 药品及试剂 | 第55-56页 |
| 6.2.3 主要使用设备 | 第56页 |
| 6.3 实验方法 | 第56-59页 |
| 6.3.1 构建Cathepsin K表达敲低质粒 | 第56-58页 |
| 6.3.2 克隆形成实验 | 第58-59页 |
| 6.3.3 流式细胞术检测敲低Cathepsin K的表达对细胞凋亡水平的影响 | 第59页 |
| 6.3.4 划痕实验检测敲低Cathepsin K的表达对细胞运动能力的影响 | 第59页 |
| 6.3.5 Transwell迁移实验检测敲低Cathepsin K的表达对细胞迁移能力的影响 | 第59页 |
| 6.3.6 Transwell侵袭实验检测敲低Cathepsin K的表达对细胞侵袭能力的影响 | 第59页 |
| 6.4 实验结果 | 第59-67页 |
| 6.4.1 Cathepsin K shRNA质粒敲低效率验证 | 第59-62页 |
| 6.4.2 敲低Cathepsin K的表达可以显著抑制乳腺癌细胞的增殖 | 第62页 |
| 6.4.3 敲低Cathepsin K的表达可以诱导乳腺癌细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 6.4.4 敲低Cathepsin K的表达可以抑制乳腺癌细胞的运动侵袭转移能力 | 第63-66页 |
| 6.4.5 Cathepsin K的下游通路机制研究 | 第66-67页 |
| 6.5 讨论 | 第67-69页 |
| 第7章 孪药SM934-睾酮的乳腺癌体内药效研究 | 第69-72页 |
| 7.1 前言 | 第69页 |
| 7.2 实验材料 | 第69-70页 |
| 7.2.1 实验细胞 | 第69页 |
| 7.2.2 药品及试剂 | 第69页 |
| 7.2.3 主要使用设备 | 第69-70页 |
| 7.3 实验方法 | 第70页 |
| 7.3.1 裸鼠乳腺癌皮下移植瘤模型 | 第70页 |
| 7.3.2 灌胃给药 | 第70页 |
| 7.4 实验结果 | 第70-71页 |
| 7.5 讨论 | 第71-72页 |
| 第8章 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第82页 |
