摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-15页 |
1.1 研究目的及意义 | 第9-10页 |
1.1.1 研究的目的 | 第9页 |
1.1.2 研究的意义 | 第9-10页 |
1.2 研究背景 | 第10-15页 |
1.2.1 转基因作物的重要性 | 第10-11页 |
1.2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第11-12页 |
1.2.3 基因型对水稻转化的影响 | 第12页 |
1.2.4 籼稻Kasalath的改良 | 第12-13页 |
1.2.5 抗草铵膦Bar基因的研究及应用 | 第13-15页 |
第二章 材料和方法 | 第15-27页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 转化受体 | 第15页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第15页 |
2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第15页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第15-16页 |
2.1.5 培养基 | 第16-17页 |
2.1.6 常用的缓冲液和试剂 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-27页 |
2.2.1 农杆菌感受态的制备和转化 | 第18页 |
2.2.2 质粒DNA的小量提取(SDS法) | 第18-19页 |
2.2.3 籼稻成熟胚的组织培养和转化 | 第19-20页 |
2.2.4 水稻叶片总DNA的提取(2×CTAB法) | 第20页 |
2.2.5 PCR检测 | 第20-21页 |
2.2.6 Southern检测 | 第21-22页 |
2.2.7 草铵膦抗性检测 | 第22页 |
2.2.8 PAT蛋白含量检测 | 第22-23页 |
2.2.9 hiTail-PCR扩增插入序列的右边界序列 | 第23-26页 |
2.2.10 数据处理 | 第26-27页 |
第三章 结果与分析 | 第27-40页 |
3.1 Kasalath改良品系的Bar基因遗传转化 | 第27-29页 |
3.1.1 质粒载体转化农杆菌的菌落PCR检测 | 第27页 |
3.1.2 Kasalath改良品系成熟胚的愈伤组织诱导和转化 | 第27-29页 |
3.2 Kasalath改良品系遗传转化效率评价 | 第29-34页 |
3.2.1 转化事件的鉴定 | 第29-32页 |
3.2.2 基因转化效率的评价 | 第32-34页 |
3.3 再生植株目的蛋白表达分析 | 第34-36页 |
3.3.1 T_1代植株中PAT含量检测 | 第34-35页 |
3.3.2 T_2代植株中PAT含量检测 | 第35-36页 |
3.4 外源基因遗传稳定性研究 | 第36-38页 |
3.4.1 T_2代植株的除草剂抗性表现 | 第36-37页 |
3.4.2 阳性植株T_2代PCR检测 | 第37-38页 |
3.5 hiTail-PCR扩增边界序列 | 第38-40页 |
第四章 讨论和结论 | 第40-46页 |
4.1 讨论 | 第40-43页 |
4.1.1 Kasalath的改良及转化效率评价 | 第40-41页 |
4.1.2 基因转化效率的计算方式 | 第41-42页 |
4.1.3 Bar基因转化事件的证据和目的蛋白表达水平 | 第42-43页 |
4.1.4 Bar基因在转化事件中的遗传分离 | 第43页 |
4.2 主要结论 | 第43-44页 |
4.3 创新点和展望 | 第44-46页 |
4.3.1 创新点 | 第44页 |
4.3.2 展望 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
缩略词 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |