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基于循环放大及生物条码技术检测DNA与溶菌酶的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第1章 绪论第12-34页
    1.1 化学发光分析第12-19页
        1.1.1 化学发光机理第12-13页
        1.1.2 化学发光类型第13-14页
        1.1.3 化学发光类物质第14-15页
        1.1.4 化学发光与流动注射技术的联用第15-17页
        1.1.5 化学发光分析法在生化分析中的应用第17-19页
    1.2 信号放大技术第19-23页
        1.2.1 金纳米粒子第19页
        1.2.2 磁性微球第19-20页
        1.2.3 滚环复制放大第20-23页
    1.3 拉曼光谱分析第23-28页
        1.3.1 拉曼光谱工作原理第23-24页
        1.3.2 拉曼光谱仪组成第24-25页
        1.3.3 表面增强拉曼光谱分析第25-26页
        1.3.4 表面增强拉曼光谱在生物分析中的应用第26-28页
    1.4 立题依据及主要内容第28-29页
    参考文献第29-34页
第2章 基于滚环复制信号放大与流动注射化学发光技术检测DNA的研究第34-50页
    2.1 引言第34页
    2.2 实验部分第34-37页
        2.2.1 试剂及仪器第34-35页
        2.2.2 发卡DNA修饰的MB的制备第35-36页
        2.2.3 滚环复制放大(RCA)步骤第36页
        2.2.4 流动注射化学发光检测第36-37页
    2.3 结果与讨论第37-47页
        2.3.1 设计方案及工作原理第37-39页
        2.3.2 磁性微球及其固定DNA后的表征第39-40页
        2.3.3 滚环复制产物的凝胶电泳表征第40页
        2.3.4 过氧化物模拟酶(四分体)形成的验证实验第40-41页
        2.3.5 实验条件的优化第41-44页
            2.3.5.1 滚环复制反应时间的选择第42页
            2.3.5.2 缓冲溶液p H的影响第42-43页
            2.3.5.3 H_2O_2浓度对Luminol-H_2O_2体系化学发光强度的影响第43-44页
            2.3.5.4 Luminol浓度对Luminol-H2O2体系化学发光强度的影响第44页
            2.3.5.5 流动注射流速对Luminol-H_2O_2体系化学发光强度的影响第44页
        2.3.6 对照实验第44-45页
        2.3.7 靶DNA浓度的检测第45-46页
        2.3.8 实验方案的选择性研究第46-47页
    2.4 小结第47-48页
    参考文献第48-50页
第3章 基于滚环复制信号放大与生物条码技术的SERS光谱检测DNA的研究第50-67页
    3.1 引言第50页
    3.2 实验部分第50-53页
        3.2.1 试剂及仪器第50-51页
        3.2.2 金纳米粒子的制备第51-52页
        3.2.3 生物条码的制备第52页
        3.2.4 发卡DNA修饰的MB的制备第52页
        3.2.5 滚环复制放大(RCA)步骤第52-53页
        3.2.6 表面增强拉曼光谱检测靶DNA第53页
    3.3 结果与讨论第53-64页
        3.3.1 设计方案及工作原理第53-54页
        3.3.2 金纳米粒子的表征第54-56页
            3.3.2.1 金纳米粒子的紫外光谱表征第55页
            3.3.2.2 金纳米粒子的TEM表征第55-56页
        3.3.3 生物条码的紫外表征第56-57页
        3.3.4 对照实验第57-58页
        3.3.5 实验条件的优化第58-62页
            3.3.5.1 ROX-DNA浓度的优化第58-59页
            3.3.5.2 生物条码中捕获探针DNA与ROX-DNA比例的优化第59-60页
            3.3.5.3 切刻内切酶反应温度的优化第60-61页
            3.3.5.4 切刻内切酶反应时间的优化第61-62页
        3.3.6 靶DNA浓度的检测第62-63页
        3.3.7 实验方案的选择性研究第63-64页
        3.3.8 SERS与FI-CL的比较第64页
    3.4 小结第64-66页
    参考文献第66-67页
第4章 基于循环放大与生物条码技术的SERS光谱检测溶菌酶方法的研究第67-79页
    4.1 引言第67-68页
    4.2 实验部分第68-70页
        4.2.1 试剂及仪器第68-69页
        4.2.2 金纳米粒子的制备第69页
        4.2.3 生物条码的制备第69页
        4.2.4 MB-DNA-生物条码发光探针的组装第69-70页
        4.2.5 循环反应过程第70页
        4.2.6 溶菌酶的SERS检测第70页
    4.3 结果与讨论第70-76页
        4.3.1 设计方案及工作原理第70-71页
        4.3.2 实验条件的优化选择第71-75页
            4.3.2.1 生物条码用量的选择第72页
            4.3.2.2 溶菌酶适体DNA浓度的优化第72-73页
            4.3.2.3 溶菌酶反应温度的控制第73-74页
            4.3.2.4 聚合酶用量的选择第74-75页
        4.3.3 循环放大的实验验证第75页
        4.3.4 实验方案的选择性研究第75-76页
    4.4 小结第76-77页
    参考文献第77-79页
结论第79-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表的学术论文目录第81-82页

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