| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第1章 引言 | 第13-15页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 1.2 主要研究内容 | 第14-15页 |
| 1.2.1 哈维氏弧菌生长特性及灭活方法研究 | 第14页 |
| 1.2.2 美洲黑石斑抗哈维氏弧菌感染免疫应答研究 | 第14页 |
| 1.2.3 哈维氏弧菌灭活疫苗对美洲黑石斑免疫力及保护效果的研究 | 第14-15页 |
| 第2章 文献综述 | 第15-23页 |
| 2.1 石斑鱼弧菌病的研究 | 第15-16页 |
| 2.2 石斑鱼弧菌病防治研究 | 第16-19页 |
| 2.2.1 鱼类疫苗发展及种类 | 第16-17页 |
| 2.2.2 弧菌疫苗 | 第17-18页 |
| 2.2.3 免疫增强剂 | 第18-19页 |
| 2.2.3.1 微生物来源制剂 | 第18-19页 |
| 2.2.3.2 营养因子类物质 | 第19页 |
| 2.3 哈维氏弧菌研究现状 | 第19-21页 |
| 2.3.1 生物学特性 | 第19-20页 |
| 2.3.2 致病机理 | 第20页 |
| 2.3.3 发病症状及抗药性 | 第20-21页 |
| 2.4 石斑鱼免疫基因的相关研究 | 第21-23页 |
| 2.4.1 Toll通路研究 | 第21-22页 |
| 2.4.2 细胞因子研究 | 第22页 |
| 2.4.3 其他免疫相关基因 | 第22-23页 |
| 第3章 哈维氏弧菌生长特性及灭活方法研究 | 第23-27页 |
| 3.1 材料 | 第23页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 3.1.2 实验试剂与设备 | 第23页 |
| 3.2 生长特性 | 第23页 |
| 3.2.1 生长曲线绘制 | 第23页 |
| 3.3 灭活条件的筛选 | 第23-24页 |
| 3.3.1 甲醛浓度和温度对灭活时间的影响 | 第23-24页 |
| 3.4 疫苗的制备 | 第24页 |
| 3.5 灭活疫苗质量与安全性检测 | 第24页 |
| 3.5.1 无菌检测 | 第24页 |
| 3.5.2 均匀度检测 | 第24页 |
| 3.5.3 疫苗的安全性检测 | 第24页 |
| 3.6 结果与分析 | 第24-26页 |
| 3.6.1 哈维氏弧菌生长特性 | 第24-25页 |
| 3.6.2 甲醛浓度和温度对灭活时间的影响 | 第25-26页 |
| 3.7 讨论 | 第26-27页 |
| 第4章 美洲黑石斑抗哈维氏弧菌感染血清生化指标变化 | 第27-33页 |
| 4.1 材料和方法 | 第27-28页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第27页 |
| 4.1.3 取样 | 第27页 |
| 4.1.4 血清生化指标的测定 | 第27页 |
| 4.1.5 数据分析 | 第27-28页 |
| 4.2 结果分析 | 第28-30页 |
| 4.2.1 美洲黑石斑感染哈维氏弧菌后血清中溶菌酶活性变化 | 第28页 |
| 4.2.2 美洲黑石斑感染哈维氏弧菌后血清中碱性磷酸酶活力变化 | 第28-29页 |
| 4.2.3 美洲黑石斑感染哈维氏弧菌后血清中谷丙转氨酶活力变化 | 第29页 |
| 4.2.4 美洲黑石斑感染哈维氏弧菌后血清中谷草转氨酶活力变化 | 第29-30页 |
| 4.3 讨论 | 第30-33页 |
| 4.3.1 碱性磷酸酶(AKP) | 第30-31页 |
| 4.3.2 谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT) | 第31页 |
| 4.3.3 溶菌酶 | 第31-33页 |
| 第5章 美洲黑石斑抗哈维氏弧菌感染免疫应答 | 第33-46页 |
| 5.1 材料与方法 | 第34-35页 |
| 5.1.1 实验材料和实验方法 | 第34-35页 |
| 5.1.2 取样 | 第35页 |
| 5.1.3 试剂与仪器 | 第35页 |
| 5.2 RNA提取 | 第35-36页 |
| 5.3 cDNA第一链的合成 | 第36-37页 |
| 5.4 荧光定量PCR引物设计与验证 | 第37-38页 |
| 5.5 荧光定量PCR检测 | 第38页 |
| 5.6 数据处理及分析 | 第38-39页 |
| 5.7 结果与分析 | 第39-42页 |
| 5.7.1 定量PCR所用引物 | 第39页 |
| 5.7.2 TLR2在脾脏,头肾,肝脏和鳃中的表达 | 第39-40页 |
| 5.7.3 Myd88在脾脏,头肾,肝脏和鳃中的表达 | 第40-41页 |
| 5.7.4 HSP70在头肾,肝脏,脾脏和鳃中的表达 | 第41-42页 |
| 5.8 讨论 | 第42-46页 |
| 5.8.1 哈维氏弧菌感染对TLR2在美洲黑石斑组织内表达的影响 | 第42-43页 |
| 5.8.2 哈维氏弧菌感染对MyD88在美洲黑石斑组织内表达的影响 | 第43-44页 |
| 5.8.3 哈维氏弧菌感染对HSP70在美洲黑石斑组织内表达的影响 | 第44-46页 |
| 第6章 哈维氏灭活疫苗对美洲黑石斑免疫力及保护效果研究 | 第46-55页 |
| 6.1 材料 | 第47页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 6.2 方法 | 第47-48页 |
| 6.2.1 哈维氏弧菌灭活疫苗制备 | 第47页 |
| 6.2.2 注射免疫 | 第47页 |
| 6.2.3 取样 | 第47-48页 |
| 6.2.4 攻毒试验 | 第48页 |
| 6.3 RNA的提取及cDNA第一链合成 | 第48页 |
| 6.4 荧光定量使用引物 | 第48页 |
| 6.5 荧光定量PCR检测 | 第48页 |
| 6.6 数据处理及分析 | 第48页 |
| 6.7 结果与分析 | 第48-52页 |
| 6.7.1 TLR2在脾脏,头肾,肝脏和鳃中的表达 | 第49-50页 |
| 6.7.2 MyD88在脾脏,头肾,肝脏和鳃中的表达 | 第50-51页 |
| 6.7.3 HSP70在脾脏,头肾,肝脏和鳃中的表达 | 第51-52页 |
| 6.8 讨论 | 第52-55页 |
| 第7章 结论 | 第55-57页 |
| 第8章 短期温度胁迫对驼背鲈(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交子代幼鱼抗氧化及消化生理的影响* | 第57-68页 |
| 8.1 材料与方法 | 第58-59页 |
| 8.1.1 材料 | 第58页 |
| 8.1.2 条件 | 第58页 |
| 8.1.3 实验设计 | 第58-59页 |
| 8.1.4 取样 | 第59页 |
| 8.1.5 样品处理及指标检测 | 第59页 |
| 8.1.6 数据处理 | 第59页 |
| 8.2 结果 | 第59-63页 |
| 8.2.1 温度突变与温度渐变对摄食的影响 | 第59-60页 |
| 8.2.2 温度对血清和肝脏中抗氧化指标的影响 | 第60-63页 |
| 8.2.2.1 超氧化物歧化酶 | 第60-61页 |
| 8.2.2.2 过氧化氢酶 | 第61-62页 |
| 8.2.2.3 丙二醛 | 第62-63页 |
| 8.3 温度对消化生理指标的影响 | 第63-65页 |
| 8.3.1 温度突变与温度渐变对胃蛋白酶的影响 | 第63页 |
| 8.3.2 温度突变与温度渐变对脂肪酶的影响 | 第63-64页 |
| 8.3.3 温度突变与温度渐变组对淀粉酶的影响 | 第64-65页 |
| 8.4 讨论 | 第65-68页 |
| 8.4.1 突变温度与渐变温度对生长、摄食的影响 | 第65页 |
| 8.4.2 突变温度组与温度渐变组对鼠龙斑抗氧化指标的影响 | 第65-66页 |
| 8.4.3 突变温度组与温度渐变组对鼠龙斑幼鱼消化生理指标的影响 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
