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蝗绿僵菌GTP酶激活蛋白基因MaGyp2的功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略词第9-10页
1 绪论第10-17页
    1.1 引言第10-11页
    1.2 研究背景第11-15页
        1.2.1 环境压力对昆虫病原真菌的影响第11-12页
        1.2.2 Rab蛋白与RabGAP的关系第12-14页
        1.2.3 Rab GTPase激活蛋白Gyp的相关研究进展第14-15页
    1.3 立题依据及研究目的第15页
        1.3.1 立题依据第15页
        1.3.2 研究目的第15页
    1.4 研究内容第15-16页
    1.5 技术路线第16页
    1.6 本研究的创新之处第16-17页
2 蝗绿僵菌MaGyp2的功能研究第17-49页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 供试载体、菌株及昆虫第17页
        2.1.2 主要培养基第17-18页
        2.1.3 主要试剂及试剂盒第18-19页
        2.1.4 主要实验溶剂第19-20页
        2.1.5 主要设备第20页
    2.2 主要实验方法第20-34页
        2.2.1 大肠杆菌感受态的制备第20-21页
        2.2.2 大肠杆菌感受态的转化第21页
        2.2.3 农杆菌感受态的制备第21-22页
        2.2.4 农杆菌的电转化第22页
        2.2.5 农杆菌介导的蝗绿僵菌的转化第22-23页
        2.2.6 MaGyp2基因的生物信息学分析第23页
        2.2.7 MaGyp2敲除突变载体和回复突变载体的构建第23-25页
        2.2.8 MaGyp2敲除和回复菌株的筛选及验证第25-26页
        2.2.9 基因组的微量提取第26页
        2.2.10 真菌基因组的大量提取第26-27页
        2.2.11 Southern Blot验证敲除转化子第27-29页
        2.2.12 MaGyp2对蝗绿僵菌孢子特性的影响第29-30页
        2.2.13 毒力测定第30页
        2.2.14 DNA损伤分析第30-32页
        2.2.15 RNA的提取及反转录第32-33页
        2.2.16 qRT-PCR第33-34页
        2.2.17 数据处理第34页
    2.3 实验结果与分析第34-46页
        2.3.1 MaGyp2生物信息学分析第34-36页
        2.3.2 MaGyp2敲除和回复菌株的构建及验证第36-37页
        2.3.3 MaGyp2对蝗绿僵菌生长和产孢的影响第37-38页
        2.3.4 MaGyp2对蝗绿僵菌逆境敏感性的影响第38-40页
        2.3.5 MaGyp2对蝗绿僵菌毒力的影响第40-41页
        2.3.6 紫外照射下MaGyp2在蝗绿僵菌中的表达第41-42页
        2.3.7 MaGyp2缺失降低蝗绿僵菌抗氧化能力第42-43页
        2.3.8 MaGyp2影响紫外逆境下抗氧化相关基因的表达第43页
        2.3.9 MaGyp2缺失增强紫外辐射对蝗绿僵菌DNA的损伤第43-44页
        2.3.10 MaGyp2影响紫外修复相关基因的表达第44-45页
        2.3.11 MaGyp家族基因的表达第45-46页
    2.4 讨论第46-49页
        2.4.1 MaGyp2的结构特点第46-47页
        2.4.2 MaGyp2增强紫外敏感性分析第47-48页
        2.4.3 MaGyp2与家族成员的关系第48-49页
3 主要结论与后续工作建议第49-50页
    3.1 主要结论第49页
    3.2 后续实验安排第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-58页
附录第58页
    作者在攻读硕士学位期间发表论文目录第58页

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