摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 前言 | 第14-19页 |
1.1 肝癌的研究现状 | 第14-15页 |
1.2 莪术醇 | 第15-16页 |
1.3 细胞凋亡机制 | 第16-18页 |
1.4 课题研究内容及预期结果 | 第18-19页 |
第二章 莪术醇的体外抗肝癌药效学研究 | 第19-30页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料 | 第19-21页 |
2.2.1 细胞系 | 第19-20页 |
2.2.2 主要试剂 | 第20页 |
2.2.3 主要仪器 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-23页 |
2.3.1 实验用溶液的配制 | 第21页 |
2.3.2 细胞株的培养 | 第21-22页 |
2.3.3 细胞存活率的测定 | 第22页 |
2.3.4 平板克隆实验 | 第22-23页 |
2.3.5 划痕实验 | 第23页 |
2.3.6 统计分析 | 第23页 |
2.4 结果 | 第23-29页 |
2.4.1 莪术醇对肝癌细胞具有增长抑制作用 | 第23-27页 |
2.4.2 莪术醇抑制Bel-7402细胞克隆的形成 | 第27-28页 |
2.4.3 莪术醇抑制Bel-7402细胞的迁移 | 第28-29页 |
2.5 分析与讨论 | 第29页 |
2.6 小结 | 第29-30页 |
第三章 莪术醇体内抗肝癌药效学研究 | 第30-38页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 仪器与材料 | 第30-31页 |
3.2.1 实验动物 | 第30页 |
3.2.2 细胞系 | 第30页 |
3.2.3 主要试剂 | 第30-31页 |
3.2.4 主要仪器 | 第31页 |
3.3 实验方法 | 第31-33页 |
3.3.1 主要溶液配制方法 | 第31页 |
3.3.2 急性毒性试验测定莪术醇LD_(50)(Lethal Dose,50%) | 第31-32页 |
3.3.3 荷瘤裸鼠体内药效学实验 | 第32-33页 |
3.3.4 统计分析 | 第33页 |
3.4 结果 | 第33-35页 |
3.4.1 莪术醇LD_(50)的确定 | 第33-34页 |
3.4.2 莪术醇具有体内抗肝癌增殖作用 | 第34-35页 |
3.5 分析与讨论 | 第35页 |
3.6 小结 | 第35-38页 |
第四章 莪术醇诱导肝癌细胞凋亡作用机制的研究 | 第38-58页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 仪器与材料 | 第38-39页 |
4.2.1 细胞系 | 第38页 |
4.2.2 主要试剂 | 第38-39页 |
4.2.3 主要仪器 | 第39页 |
4.3 实验方法 | 第39-45页 |
4.3.1 实验用溶液的配制 | 第39-40页 |
4.3.2 Hoechst 33258染色实验 | 第40页 |
4.3.3 线粒体膜电位检测实验 | 第40-41页 |
4.3.4 FITC-AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡实验 | 第41页 |
4.3.5 Western Blot实验 | 第41-45页 |
4.3.6 肿瘤组织免疫组织化学染色 | 第45页 |
4.3.7 PI染色法检测细胞周期的变化 | 第45页 |
4.4 实验结果 | 第45-56页 |
4.4.1 莪术醇诱导肝癌细胞形态发生变化 | 第45-46页 |
4.4.2 莪术醇降低肝癌细胞线粒体膜电位 | 第46-47页 |
4.4.3 莪术醇诱导肝癌细胞发生凋亡 | 第47-49页 |
4.4.4 莪术醇通过抑制Raf/MEK/ERK通路诱导人肝癌细胞凋亡的发生 | 第49-55页 |
4.4.5 莪术醇对肝癌细胞周期的影响 | 第55-56页 |
4.5 分析与讨论 | 第56-57页 |
4.6 小结 | 第57-58页 |
第五章 结论与展望 | 第58-60页 |
5.1 结论 | 第58页 |
5.2 展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录1 中英文对照词汇表 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67页 |