摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 香菇概述 | 第12-13页 |
1.1.1 生物学特性 | 第12页 |
1.1.2 营养价值 | 第12-13页 |
1.2 高温胁迫对植物及真菌的影响 | 第13-15页 |
1.2.1 高温胁迫对植物和酵母的影响 | 第13-14页 |
1.2.2 高温胁迫对食用菌的影响 | 第14-15页 |
1.3 邻氨基苯甲酸合酶(TrpE)相关研究进展 | 第15-21页 |
1.3.1 邻氨基苯甲酸合酶的调控通路 | 第15-17页 |
1.3.2 邻氨基苯甲酸合酶结构 | 第17-18页 |
1.3.3 邻氨基苯甲酸合酶基因在植物中的表达研究 | 第18-19页 |
1.3.4 邻氨基苯甲酸合酶基因转化的研究 | 第19-21页 |
1.3.5 邻氨基苯甲酸合酶在微生物中的研究进展 | 第21页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-33页 |
2.1 试验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 供试菌株 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
2.1.4 供试培养基 | 第23-24页 |
2.1.5 引物信息 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-33页 |
2.2.1 LeTrpE蛋白结构分析 | 第25页 |
2.2.2 LetrpE基因载体构建 | 第25-30页 |
2.2.3 农杆菌介导的香菇菌丝遗传转化 | 第30页 |
2.2.4 RNAi和超表达转化子筛选 | 第30-31页 |
2.2.5 荧光定量PCR检测相关基因表达量 | 第31页 |
2.2.6 Southern杂交 | 第31-32页 |
2.2.7 转化子菌丝形态观察及耐热性测定 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-46页 |
3.1 LeTrpE蛋白结构和同源性分析 | 第33-34页 |
3.2 LetrpE基因RNAi干扰 | 第34-40页 |
3.2.1 RNAi载体构建 | 第34-35页 |
3.2.2 RNAi转化子筛选 | 第35-37页 |
3.2.3 色氨酸与IAA合成途径中其他酶基因的表达水平 | 第37-38页 |
3.2.4 转化子菌丝生长速度测定及形态观察 | 第38-39页 |
3.2.5 转化子热激后的恢复生长情况 | 第39-40页 |
3.3 LetrpE基因超表达 | 第40-46页 |
3.3.1 超表达载体构建 | 第40-42页 |
3.3.2 超表达转化子筛选 | 第42-43页 |
3.3.3 色氨酸与IAA合成途径中其他酶基因的表达水平 | 第43-44页 |
3.3.4 转化子菌丝生长速度测定及菌落形态观察 | 第44-45页 |
3.3.5 转化子热激后的恢复生长情况 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 香菇LetrpE基因沉默和超表达效果的评价 | 第46-47页 |
4.2 LetrpE及IAA代谢途径与香菇耐热性的相关性问题 | 第47-48页 |
4.3 LeTrpE与转录因子及互作蛋白在香菇耐热性调控中的作用机制问题 | 第48-49页 |
5 总结与展望 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
附录 | 第60-68页 |
致谢 | 第68页 |